脂联素对皖南花猪性腺发育的影响研究.pdf

安徽农业大学
硕士学位论文
脂联素对皖南花猪性腺发育的影响
姓名:邵康
申请学位级别:硕士
专业:动物学
指导教师:周杰
2011-06
摘要
皖南花猪是安徽省优良的地方猪种,其优良的遗传品质和较强的繁殖性能在中国
猪种中具有明显的独特性。脂肪组织分泌的细胞因子很多与生殖相关,而脂联素
(Adp)作为脂肪组织分泌最多的一种生物活性物质,与生殖的关系十分密切。本试
验通过分析皖南花猪血清中性激素含量的发育性变化规律及性腺组织中脂联素受体
与性腺中性激素合成因子表达量的发育性变化规律与相关性,探讨Adp与皖南花猪生
殖作用的联系。通过重组脂联素(rAdp)对猪睾丸间质细胞和卵巢颗粒细胞的影响,
探索Adp对生殖激素合成的影响及机制。 
1  皖南花猪血清性激素含量的发育性变化及性腺中相关基因时序性表达
选择 0d、30d、45d、90d、180d  不同日龄皖南花猪进行试验,各日龄样本数  10 
头(公、母各 5 头)。ELISA 法测定公猪血清中 T 和母猪血清中 E2 的水平;RT­PCR 
法检测睾丸和卵巢组织中 AdpR1、A dpR2、LHR  、F SHR、S tAR、C YP11A1、C YP19 mRNA 
表达。结果显示:
(1)皖南花猪公猪各日龄中血清T浓度有极显著发育性变化(P<),表现为 
0~45d显著下降,而后维持稳定。皖南花猪母猪各个日龄E2浓度也有极显著的发育性
变化(P<),整体表现为先降低,再升高,然后趋于稳定状态。0d与45d母猪血
清E2浓度有两个峰值,30d、90d  和180d差异不显著。
(2)AdpR1  mRNA 在睾丸中的发育性变化极显著(P<),AdpR2  mRNA 在
睾丸中的发育性变化整体表现为上升趋势。A dpR1 mRNA 在卵巢中有显著的发育性变
化(P<),AdpR2 mRNA 在卵巢中有极显著的发育性变化(P<)。睾丸和卵巢 
AdpR1 mRNA 的表达量均高于 AdpR2 mRNA。
(3)C YP11A1、StA  R 和 LHR mRNA 在睾丸中表达量有显著的发育性变化( P< 
或 P<);F SHR mRNA 在卵巢中表现为极显著的发育性变化模式( P<),C YP19 
mRNA 无显著性发育变化。
(4)相关性分析结果:
睾丸组织中 AdpR1 与 CYP11A1 mRNA 表达量显著相关(r=,P<);LHR 
分别与 CYP11A1 和 StAR mRNA 表达量显著相关( r=,P <;r=  ,P <); 
CYP11A1 与 StAR mRNA 表达量极显著正相关(r=,P<)。
卵巢组织中 AdpR1 mRNA 与 AdpR2 mRNA 显著正相关( r=,P <);A dpR1 
mRNA 与 CYP19 mRNA 显著负相关(r=­,P<)。
以上结果表明: 
AdpR1 mRNA 在睾丸组织的高表达提示脂联素可能通过 AdpR1 介导对睾丸的调
I
节作用,其发育性变化和 CYP11A1  mRNA 呈正相关,提示脂联素对睾酮的生成有一
定的促进作用。
卵巢组织中 AdpR1 mRNA 与 CYP19 mRNA 的负相互作用影响卵巢中 E2 的合成。 
AdpR1、AdpR2  mRNA 的正相关,AdpR1  mRNA 的高表达,AdpR1  mRNA 与 CYP19 
mRNA 的负相关性提示脂联素对卵巢的作用通过 AdpR1 对卵巢中 E2 的分泌起抑制作
用。 
2  脂联素对猪睾丸间质细胞和卵巢颗粒细胞性激素生成的影响及机制
选取10d皖南花猪公猪,无菌条件下取睾丸组织分离培养间质细胞;选取卵巢颗
粒细胞进行相关处理后进行增殖培养。传代培养两天后用rAdp处理,12h后ELISA法
测定间质细胞培养液中T和颗粒细胞培养液中E2的水平;荧光定量实时PCR法检测睾
丸间质细胞和卵巢颗粒细胞中AdpR1、AdpR2、LHR、FSHR、StAR、CYP11A1、CYP19 
mRNA表达量。结果显示:
(1)细胞培养液中 T 和 E2 的浓度变化: 
2μg/mL rAdp 处理后的睾丸间质培养液上清中 T 显著升高( P<),pound 
C+2μg/mL Adp 处理后 T 浓度有下降趋势,但差异不显著。U0126+2μg/mL rAdp 处理
后 T 浓度有上升的趋势,但差异不显著