华中农业大学
硕士学位论文
紫云英根瘤中共生固氮相关抑制表达基因的克隆与鉴定
姓名:吴梅
申请学位级别:硕士
专业:微生物学
指导教师:李友国
20090601
摘要达,根瘤和叶片中的表达差异不大,去瘤根中的表达量最高。彳奶�蛟谒�屑觳庾�在本室前期工作中,通过抑制差减杂交,建立了紫云英结瘤固氮过程中的差异表达��文库,本研究将其下调表达��文库进行了全文库测序,共获得���之间。将所有序列进行了同源比较,比对条件为匹配区域长度���且相似度��ァ7�弦G蟮墓灿��觯�⑾�其中�鲈谑�菘庵姓也坏狡渫�雌�危�赡艽��个新的基因。将符合条件的基表达相关�个,代谢相关�个,膜及转运相关�个,应激防御相关�觯�粗5�根据测序分析结果,对其中的�龌�蚪�辛税攵�縍���橹し治觯�峁�表明:它们在根瘤中表达水平均比未接种根中要低。运用�����—����������ɑ竦昧似渲�个基因���虯��的全长��和编码区。序列分析���鹊绲阄�.�。与豌豆中的�.氧代植二烯酸.�,�.还原酶同源性较高,不含信号肽。��编码��个氨基酸的多肽,含有一个�个氨基酸的信号肽,信号肽可以被切除,成熟的多肽���鹊绲阄�.�。与拟南芥质体蓝素相似。另外�龌�颍篈��编码的蛋白与拟南芥���托恐讣易宓鞍紫嗨疲珹��嗦氲牡鞍子肽饽辖婀�趸�物酶相似,��编码的蛋白与杨毛果预测蛋白相似,��编码的蛋白与热休克蛋����,���嗨啤�果显示:从不同植物器官中基因的表达情况来看,��和��在根瘤中的表达水平都较未接种根中低,均在紫云英根瘤中呈下调表达特征。��在植物茎中几乎不表织中均有表达,根瘤、茎和叶中表达相当,去瘤根中表达量最高。从接种后不同时段的基因的表达情况来看,��在成熟根中的转录水平远高于幼根,主要在�—���梢约觳獾揭桓���浔泶锪慷己艿�����。由此推测,��在接种早期幼根中发挥生理功能,具体作用尚不明确。个有效序列,��克隆插入片段在���,��因按分子功能分类,分为�个类群:核糖体蛋白�个,信号转导相关�个,基因白�觯�俣ǖ鞍�个,无同源片段�龊推渌�个。表明:��编码的多肽含��霭被�幔�肿恿课��分子量为�����进一步通过实时荧光定量���芯苛薃��虯��氖笨蘸妥橹�泶锾卣鳌=�表达。相反,��在成熟根中的转录水平远低于幼根。接种后�较高的表达量,随后一直到接种后�主要在成熟根中参与茉莉酸的合成,调控根瘤菌的侵染和根瘤形成,而��主要紫云英根瘤中共生固氮相关抑制表达基因的克隆与鉴定������
以上实验结果为进一步通过超表达深入研究目标�碌鞅泶�基因在紫云英结瘤固氮过程中的功能打下了良好工作基础。关键词:�������幌碌鞅泶铮��谎醮�捕�┧峄乖�福恢侍謇端兀恍�指蛋白;过氧化物酶;热休克蛋白华中农业大学��届硕�貉�宦畚������
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导师签名:猢帆Ⅻ夕年/月多日研究蚴:舅均签名日期留∞尸年易月彦日学位论文作者签名:墨呜签名日期:沙刁年多月艿日否华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书年如需保密,解密时间独创性声明学位论文使用授权书月日本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确
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