高效液相色谱法测定畜禽肉中土霉素四环素金霉素残留量.docx

高效液相色谱法测定畜禽肉中
土霉素、四环素、金霉素残留量
叶 英
(农业部食品质量监督检验测试中心广东湛江 524001)
1 前言
近年来, 由于在家畜禽的饲料和治疗中广泛应用到了四环素抗生素(TC s) , 从而引起畜禽肉及其制品中 TC s 的残留。长期食用含 TC s 的食品会危害人体健康, 因此应严格控制畜禽肉中 TC s 的残留量。国家标准 GB ƒ T 14931. 1—1994 规定: 采用液相色谱法测定畜禽产品中土霉素(O TC)、四环素(TC)、金霉素(CTC) 残留量, 但三种抗生素(TC s) 中对 CTC 的检测效果不太理想, 本文在此基础上进行了改进, 使测试方法更加准确、可靠。
2 实验部分
2. 1 仪器与试剂
美国惠普 H P 21100 型液相色谱仪配 DAD (二极管阵列检测器)、H 66025 型超声波仪、800 型离心机。
0. 01 m o lƒL 磷酸二氢钠(pH 2. 5) : 称取
1. 56 g 磷酸二氢钠溶解于 1 000 m l 水中, 用
30% 硝酸调 pH 值至 2. 5, 过 0. 45 Λm 滤膜。
5% 高氯酸、30% 硝酸、0. 1 m o lƒL 盐酸溶液、0. 01 m o lƒL 盐酸溶液、乙腈(色谱纯)、二重蒸馏水。
O TC、TC、CTC 标准储备液配制: 准确称取O TC、TC、CTC 固体标准品各
0. 01 g, 分别用 0. 1 m o lƒL 盐酸溶液、0. 01 m o lƒL 盐酸溶液和蒸馏水溶解并定容至 10 m l, 此三种标准储备液 O TC、TC、CTC 含量
各为 1. 0 m gƒm l (4℃可存 1 周)。
O TC、TC、CTC 混合标准使用液配制: 分别准确吸取O TC、TC、CTC 标准储备
液各 0. 1 m l, 用水定容至 10 m l, 此混合标准使用液中O TC、TC、CTC 含量分别为 10 Λgƒ m l (当天配制当天使用)。
2. 2 色谱条件
色谱柱: H ypersilC18 150 × 4 mm , 流动相: 乙腈ƒ0. 01 m o lƒL 磷酸二氢钠= 65ƒ35, 柱温: 25℃, 流速: 1. 0 m lƒm in, 检测波长: 0~ 2. 80 m in 为 355 nm、2. 81~ 3. 80 m in 为 268 nm , 进样量: 20 Λl。
2. 3 样品处理
准确称取切碎并混合均匀的肉样 5. 0 g, 加入 5% 高氯酸 10 m l, 搅拌均匀后用超声波提取 15 m in, 倾出上层溶液, 再加入 10 m l 5% 高氯酸, 搅拌均匀后再用超声波提取 10 m in, 合并两次提取液, 于 60℃水浴浓缩并定容至适当体积。用转速为 3 000 rƒm in 的离心机离心 10 m in, 取上清液过 0. 45 Λm 滤膜, 滤液供测定用。
2. 4 测定
按上述色谱条件, 以保留时间定性, 峰面积定量, 用峰面积求算O TC、TC、CTC 含量。 3 结果
3. 1 线性关系
用上述色谱条件, 在 0~ 10 Λgƒm l 范围内, O TC、TC、CTC 线性关系良好, O TC、 TC、CTC 工作曲线回归方程见表 1。