溯源技术幻灯片.ppt

食源性疾病溯源技术的应用
技术需求:

、不同区域分离的分离株之间的关系。
解决方法:
1. 生化、血清、噬菌体等—间接,可靠性低
、核酸—直接,准确
脉冲场凝胶电泳技术
Pulse-Field-Gel-Electrophoresis(PFGE)
菌株指纹鉴定系统
RiboPrinter Microbial Characterization System (RP)
技术简介:脉冲电场凝胶电泳包括在琼脂糖凝胶中包埋菌体DNA,原位溶解,用限制性内切酶消化染色体DNA,切割少许包含染色体DNA片段的胶块并插入到凝胶孔中,通过在电泳仪中预先设置好的模式不断改变电场方向进行电泳,这些限制性片段在凝胶中被分离为不连续的电泳条带,可以把不同分离株的DNA限制性片段进行比较以确定其亲缘关系
PFGE( 1984年)
Schwartz和Cantor
一、原理
特点:
: DNA分子的完整性、分布均一性
:通过正交的交变脉冲电场的不断改变,使包埋在琼脂糖凝胶中的DNA分子的泳动方向做相应改变,小的DNA分子比大的变形快,故小分子泳动得快,从而在凝胶上按染色体片段大小而呈现出电泳带型。分辨能力高,满足大分子DNA 的分离要求。
:
,分析食品中检出的致病菌与病人标本中检出的致病菌是否有同源性
,确定散发病例之间的病原关系

确定食源性致病菌在食物链中相关的食品,寻找预防食品污染的关键环节,具备对突发事件的反应能力,建立和完善食源性致病菌及食源性疾病的监测系统和预警系统。
:统一的条件参数和Maker(伤寒H9812),标化后使得不同实验室的PFGE电泳图谱具备可比性,建立网络—-USA\ -CANADA