白喉疫苗的制备工艺
刘允攀
201122161872
白喉病(Diphtheria )是由白喉杆菌引起的急性呼吸道传染病,以咽、喉等处粘膜充血、肿胀并有灰白色伪膜形成为突出临床特征,严重者可引起心肌炎与末梢神经麻痹。白喉属中医学温病范畴,中医文献中的“喉痹”、“喉风”、“锁喉风”、“白蚁疮”、“白缠喉”等包括本病。
该病多发生于小儿,但今年成人亦不少見。现在白喉病的传染性已得到有效的控制并有效的治疗。目前我国针对此病的策略是以预防为主,治疗为辅。而预防采取的主要措施就是采用白喉疫苗
白喉疫苗又称白喉类毒素,%-%甲醛,放置38℃,4周后,气毒性消失,但能使动物产生免疫能力,从而制得白喉毒素的类毒素。白喉类毒素是一种用于白喉病的自动免疫制剂,是由产毒力高的白喉杆菌培养液,经福尔马林脱毒后精制(或脱毒后精制)而成。通常制成吸附剂或与其他预防制剂配成混合制剂使用。
吸附精制白喉疫苗的工艺流程图
干燥菌种
种子
产毒培养液
传代
保浦氏培养基
34-35℃,48-54h
全培养液
精制毒素
过滤
保浦氏培养基
34-35℃,50h
沉淀
%甲醛
硫酸铵二段沉淀分离
溶解
透析
除菌
过滤
精制类毒素
吸附精制类毒素
脱毒
%甲醛,室温2-3d
%甲醛,36-36℃,35d
AL(OH)3
吸附
(1) 菌种欲制得有效的免疫用类毒素,必须有高效价的毒素,国际上产毒最著名的菌种为1896年Park和williams分离的第8号菌株(PW8),该株系介于光滑与粗糙之间的中间型(SR)。我国目前生产采用:PW8 Weissensee亚株,为来自罗马尼亚PW8的传代株,该柱一直保持着较高水平的产毒能力。该菌株可采用下列培养基。
其氨基氮含量,菌种产毒能力得到很大提高:
③改良林氏培养基由Linggood原制培养基改良而成。
(2)培养产毒培养方法有两种:一为表面培养,二为深层培养。深层培养较表面培养能获得更高效价的毒素。采用深层培养法,有利于细菌生长过程中能源的补充,供氧量的调节及pH的控制,更好的发挥细菌产毒的能力。白喉杆菌深层
培养中因素控制包括以下几个方面:-35℃之间;,-;,既可以稳定培养过程的pH,又延长培养时间,有利于白喉杆菌的生长产毒;,适宜的氨基酸补充,可以延长产毒时间使产毒单位提高。
(3)脱毒毒素经甲醛加温处理后,取出毒性而保留其抗原性,形成类毒素的过程称为脱毒
①脱毒应考虑温度、pH、甲醛浓度以及毒素自身等影响:一般来说温度高、pH高、甲醛浓度高都有利于毒素脱毒,但同时易造成抗原的损失,破坏其免疫原性。因此要注意平衡以上诸因素的关系,既达到毒素脱毒的目的,且又脱毒完全,减少毒素逆转现象的发生。温度超多40℃对抗原就有很
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