实验肌糖元的酵解作用.ppt实验肌糖元的酵解作用
一、目的要求
1. 学习鉴定糖酵解作用的原理和方法。
2. 了解糖酵解作用在糖代谢过程中的地位及生理意义。
二、基本原理
肌糖元
丙酮酸
有氧
缺氧
TCA循环
CO2+H2O
乳酸
浓硫酸
乙醛
羟基联苯
红紫色物质
注:催化酵解作用的酶系统来源于肌肉糜
三、材料与试剂
肌肉糜
%糖元溶液(%淀粉溶液)
液体石腊(隔绝空气,形成无氧条件)
15%偏磷酸溶液()
四、实验步骤
1、处死动物和制备肌肉糜
(1)处死动物:
(2)制备肌肉糜:放血立即取背部和腿部肌肉。在低温条件下用剪刀尽量把肌肉剪碎即成肌肉糜,低温保存备用。
四、实验步骤
2、肌肉糜的酵解
(1)取4支试管,编号后各加入3ml %糖元溶液(%淀粉溶液)。
(2)1、2号管为试验管,3、4号管为对照管。向对照管内加入15%偏磷酸2ml。
(3),用玻璃棒将肌肉碎块打散,搅匀,再分别加入少许液体石腊(约1ml/管)。
(4)将4支试管同时放入37℃恒温水浴中保温2h。
(5)取出试管,立即向试管内加入15%偏磷酸2ml,混匀。将各试管内容物分别过滤,弃去沉淀。
(6)取每个样品的滤液4ml,分别加入已编号的试管中,然后向每管内加入饱和硫酸铜溶液1ml,混匀,,塞上橡皮塞后用力振荡。
(7)放置30分钟,并不时振荡,使糖沉淀完全。将每个样品分别过滤,(或者离心3000转/分,15分钟),弃去沉淀。
四、实验步骤
(1)取4支洁净、干燥的试管(编号)~4滴对羟基联苯试剂,混匀后放入冰浴中冷却。
(2)
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