【栩恒检测】耀州窑及其青釉瓷鉴定检测.ppt

【栩恒检测】耀州窑及其青釉瓷鉴定检测.ppt.ppt赖式法测定血清丙氨酸氨基转移酶
生物化学检验教研室
赖式法测定血清丙氨酸氨基转移酶
掌握: 赖式法测定血清丙氨酸氨基转
移酶的原理。
熟悉:赖式法测定血清丙氨酸氨基转
移酶标准曲线的绘制。
了解:血清丙氨酸氨基转移酶测定的
临床意义。
赖式法测定血清丙氨酸氨基转移酶
实验目的
丙氨酸和α-酮戊二酸在血清转氨酶的作用下生成丙酮酸及谷氨酸。-二硝基苯肼,-二硝基苯腙。-二硝基苯腙在碱性条件下显红棕色。根据显色深浅求得血清中转氨酶的活力。
赖式法测定血清丙氨酸氨基转移酶
实验原理
[实验器材]
恒温水浴箱
分光光度计
赖式法测定血清丙氨酸氨基转移酶
[实验试剂]
磷酸盐缓冲液
基质缓冲液
-二硝基苯肼溶液
NaOH溶液
丙酮酸标准液
绘制标准曲线
赖式法测定血清丙氨酸氨基转移酶
赖式法测定血清丙氨酸氨基转移酶
加入物
测定管(ml)
空白管(ml)
血清


基质缓冲液

混匀37摄氏度水浴准确保温30分钟
-二硝基苯肼


基质缓冲液

混匀37摄氏度水浴准确保温30分钟



将基质缓冲液和血清在37摄氏度水浴预温5分钟
室温放置10分钟,波长505nm比色,蒸馏水调零,读取各管吸光
值,以Au-AB查标准曲线
黄疸、高脂血症、溶血应做血清对照。
测定值超过200单位时,应将标准稀释后再进行测定。
控制好测定时的温度和保温时间。
丙酮酸钠的纯度,对曲线也有影响。纯度低,曲线斜率就低,所查得的酶活力单位可显著增加。所以如果丙酮酸钠变黄应不用。
-二硝基苯肼的配制要准确。
注意事项
临床意义
ALT增高
传染性肝炎及其他肝胆疾病:如肝癌、中毒
性肝炎、胆管及胆囊炎
心血管疾病:心肌梗塞、心肌炎、脑出血
骨骼疾病:多发性肌炎、肌营养不良等
血清ALT测定的实验原理是什么?
血清ALT测定的临床意义是什么?
课后思考