蜂胶的抗氧化及抑菌作用.docx

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高良姜素、芦丁、山萘酚、山萘甲素,鼠李素,松属素等,其5,7-二羟基3,4-二甲黄酮和5-羟基4,7-二甲氧基双氢黄酮等蜂胶的特有成分,蜂胶大局部的生理及药理功能都与此类化合物有亲热关系。蜂胶中挥发性成分——萜烯类化合物等形成了蜂胶特别香气,分析鉴定出94种化合物,包括长叶烯、a-古芸烯、去氢白菖烯、 a-雪松烯、香橙烯、a-芹子烯、杜松萜烯、大根香叶烯、 a-广藿香烯、桉叶油醇、杜松烯醇等。蜂胶化学成分提取方法蜂胶的化学成分提取主要承受蜂胶的抗氧化作用在机体中氧自由基02-通过脂质过氧化损伤、破坏细胞膜等,最终使组织器官发生病理转变,氧自由基又是具有更大毒性的羟自由基和过氧化氢的前体, 所以对机体危害较大。能制衡或去除自由基的物质称抗氧化剂,它们能干扰自由基链反响的启动和放大,阻断其反响过程,抑制其产生。抗氧化剂有两类,一类是酶类抗氧化剂,另一类是非酶类抗氧化剂,蜂胶属后一类[18]。一般认为,抗氧化剂的作用机理主要包括三个方面:(1)对自由基的直接清除作用;(2)阻断自由基的反响链;(3)提高体内抗氧化酶活力和抗氧化物质含量,如谷胱甘肽等[19]。有争论说明,蜂胶黄酮类对自由基有直接的去除作用蜂胶黄酮的抗氧化作用[19]。Krol等(1990)争论觉察蜂胶乙醇提取液具有明显的抗氧化功能, 主要缘由是由于蜂胶中黄酮类化合物与超氧阴离子反响,阻挡自由基反响的引发,或与铁离子螯合阻挡羟基自由基的生成,或与脂质过氧化基反响阻挡脂质过氧化过程。Scheller等(1990)利用电子顺磁共振的方法争论蜂胶乙醇提取液对自由基的作用,结果说明蜂胶中黄酮类化合物对2,2-苯基-1-苦肼基游离基有猛烈的抑制作用,可有效地去除自由基。Rapta等争论觉察,蜂胶醇提取液中黄酮类和咖啡酸酯类具有较强的去除自由基和抗氧化力量,并且承受测定氧化复原电势的方法分析出抗氧化、去除阴离子自由基力量最强的是高良姜素和白杨素。Moon等(2001)指出高良姜属于黄酮类化合物中的黄酮醇类,在蜂胶中的含量很高,具有抗氧化、去除自由基活性和抑制化学药物的生殖毒性作用,是一种值得考虑的作为化疗导致生殖毒性的对抗物质。化学发光法争论说明,两种古巴蜂胶醇提取物对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶产生的超氧阴离子均有捕获力量。它们的浓度为5旧/⑷/ml时对超氧阴离子自由基的抑制率为50%,与72⑷/⑷/ml儿茶素等效。对烷氧自由基的半数捕获浓度为 ⑷/ml,⑷/ml维生素E等效。蜂胶醇提取物对鲁米诺-H2O2产生的化学发光也有抑制作用, 这可能与其所含的黄酮类化合物有关。陈明之等人觉察蜂胶提取液去除 OH自由基的力量与总黄酮含量呈正相关,但其去除02-自由基的力量与总黄酮含量并无相关性,其缘由有待于进一步深入争论。同时蜂胶提 取液具有良好的抗油脂氧化力量。徐颖等人通过承受乙醇回流提取法提取蜂胶黄酮,并用乙酸乙酯对乙醇提取物进展精制,通过邻苯三酚自氧化法,邻二氮菲一一Fe2+法和DPPH法评价其去除自由基力量,并比较了蜂胶黄酮与VC、银杏黄酮等自由基去除剂的作用效果,争论说明:蜂胶黄酮有较强的自由基去除力量。蜂胶挥发油的抗氧化作用赵强等人通过承受超临界CO2萃取和冷冻分别得到蜂胶挥发油,用化学发光法测定蜂胶挥发油对羟自由基和超氧阴离子自由基具有去除力量。桑慧等人利用在体模型及体外试验争论了蜂胶对总SOD活力及MDA含量的影响,。结果:在蜂胶水提液抑制AngII诱导的平滑肌细胞增殖过程中总SOD活力增加,MDA含量降低,与AngII组均差异显著(P<);蜂胶能增加高脂血症兔的总 SOD活力,降低LDL、MDA含量,与模型组相比,差异显著(P<)。结论:在抑制动脉粥样硬化病变过程中,蜂胶具有抗脂质过氧化作用。蜂胶挥发油中含量最高的化合物分别为:172三十五碳烯(%),12二十二烯(%),二十七碳烷(%),a2桉叶油醇(%),羊毛甾醇醋酸酯(%),其中萜烯类及其衍生物总相对含量为 %,黄酮类化合物为2”,6”2二羟基242甲氧基查尔酮和柚木柯因两种,%。据文献报道,巴西蜂胶具有多种生理活性 ,而其主要成分类别为萜烯类、含异戊二烯基衍生物和对2羟基桂皮酸[16218],在蜂胶挥发油中萜烯类化合物很可能是产生抗氧化效果的主要成分。蜂胶中咖啡碱酯类的抗氧化作用Kimoto等(1999)争论觉察蜂胶提取物中的咖啡酸苯乙酯(CAPE)可明显降低三醋酸腈铁盐氧化引起的肾损伤,阻挡肾脏和肺脏病变的发生。Sudina(1993)等指出CAPE是蜂胶提取液中的活性成分之一,亚油酸和花生四烯酸的氧化过程。在能在微摩尔的浓度范围内抑制 5-脂加氧酶催化的10凶浓度时,可完全阻断人的噬中性粒细胞反响性氧化物的产生和黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统。Atilla等认为O2-或OH自由基在外伤或多次灌注所致局部缺血引起的脊髓神经元损伤的发病机理中扮演着重要角色。 并通过大白兔大动脉堵塞并屡次灌流的试验方法来争论蜂胶中的 CAPE对脊髓神经元的保护作用。组剂量为10呵ol/kg,阳性比照组用30mg/kg的甲基强的松龙。结果觉察蜂胶中的CCAPEAPE具有良好的抗氧化活性,能明显降低组织中MDA的含量,对脊髓神经元表现出明显的保护作用,降低脊髓神经元损伤的程度。蜂胶中的活性物质CAPE还是脂氧合酶的水竞争性抑制剂,当CAPE浓度为10⑷/ml时,它可以完全阻断人中性白细胞和黄嘌呤氧化酶体系产生的活性氧。蜂胶中其它组分的抗氧化作用p等从巴西蜂胶的水提取物中分别出一种苯基丙烯酸衍生物的化合物,活性强于维生素C和维生素E。蜂胶水提取物还可以保护纤维细胞免受高压氧的胁迫,-黄嘌呤其抗氧化使得蜂胶水提取物具有抗炎症作用。德国学者vol-pert(1993)争论觉察,蜂胶的水提取物对心肌黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶催化的氧化反响均有抑制作用,对吲哚乙酸的过氧化反响也有抑制作用,其抗氧化作用可能与所含的单酚和多酚化合物有关。Hilmi等(1999)争论了蜂胶对硒诱导型白内障模型的影响,主要是利用蜂胶的抗氧化作用,结果觉察,蜂胶、环氟拉嗪、砾精和维生索C抑制硒诱导型白内障生成率分别为70%、60%、%和40%,而白果制品Egb761对白内障的形成几乎无效果。说明蜂胶的抗氧化作用不仅仅来源于黄酮类化合物,其它成分也起肯定的作用。提取方法和种类对蜂胶抗氧化作用的影响曹炜等(2001)以抑制非细胞体系产生的超氧阴离子和羟基自由基为方法争论蜂胶的抗氧化活性,结果说明蜂胶能有效地去除机体外产生的02-和OH自由基,并呈现量效关系。ARjun等(2000)争论了巴西、秘鲁、荷兰和中国等多种蜂胶的细胞毒性、保肝活性和清除DPPH自由基的能力,结果说明,巴西蜂胶和中国蜂胶水提取物去除力比醇提取物强、而秘鲁和荷兰蜂胶的醇提物去除DPPH自由基的能DPPH自由基的力量比水提物强。巴西蜂胶的水提取物、甲醇提取物和氯仿提取物均有去除1,1-Ciphenyl-2-picryhydrazyl自由基和氧自由基的作用。Lin(1999)等争论了蜂胶乙醇提取液对酒精慢性中毒引起的谷胱甘肽和微粒体酶的影响, 觉察剂量为30mg/kg体重时,可以明显抑制细胞色素P-450、复原型辅酶n代谢依靠的细胞色素C复原酶的活性,削减谷胱甘肽和羟基苯胺的产生,阻挡脂质氧化过程。沈海涛(2002)争论觉察蜂胶对油脂的抗氧化力量随提取液浓度的增加而增强,但在去除氧自由基试验中觉察氧自由基的去除力量与总黄酮、说明蜂胶中除了黄酮类化合物之外还有其它的抗氧化作用成分。总酚无对应关系,孙丽萍等人以蜂胶为原料,分别以甲醇、乙醇、氯仿、蒸馏水为溶剂进展萃取,测定各萃取物总酚与黄酮类物质的含量,通过测定复原力量,去除 DPPH自由基力量的测定来比较4种不同萃取物的抗氧化性。结果说明:甲醇萃取物具有较强的抗氧化性。,%。乙醇萃取物通过石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮依次分级萃取后所得到物各项4种萃取指标测定结果说明,氯仿萃取了蜂胶乙醇萃取物中主要成分,但乙酸乙酯和丙酮萃取物的复原力量及去除DPPH自由基去除力量较佳,.798,%%。3. 蜂胶的抑菌作用蜂胶,除具有调整免疫、抗氧化、抗疲乏、抗癌、抗菌等生物学和药理学作用外,还具有良好的抑菌作用,但其抑菌作用机理还尚未报道。一般认为,自然抗菌物质的抗菌机理分为两大类:(1)破坏菌体构造,作用于细胞壁、原生质膜及细胞内容物;(2)影响代谢作用与生理活动,对酶体系作用,抑制呼吸作用,、西兰蜂胶药液和[47]。30%乙醇溶液进展体外抑菌试验表明,蜂胶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌有明显的抑制作用。SatoT等争论了蜂胶对引起胃癌的幽门螺杆菌的作用,觉察蜂胶能杀死幽门螺杆菌, 抑制脲酶活性,促进胃液分泌,削减胃病发生。张天宝等将10%蜂胶乙醇液依据1:6加水稀释后对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作用 15分钟,杀灭率均为100%,按1:%。20分钟,%,曾莉萍承受琼脂平板集中法对河南蜂胶抑制金黄色葡萄球菌进展了争论,觉察随pH增加,河南蜂胶对金黄色葡萄球菌的抑菌活性呈阶段性减弱。的抑菌活力减弱,,产生抑菌环的最小浓度为随浓度降低,%〔即试验剂量为&47⑷〕,证明河南蜂胶对金黄色葡萄球菌有明显的抑菌活性。还证明对丙型链球菌无明显的抑菌活性,对甲型链球菌和乙型链球菌有明显的抑菌环活性,抑菌活性随浓度降低而减弱。陈志宝等人争论了蜂胶对金黄色葡萄球菌毒力因子的抑制作用,pH增加和觉察蜂胶能够抑制标准29213的生长,在低浓度时抑菌作用较弱,虽然亚抑菌浓度的蜂胶不能完全抑制金葡菌生长,但却能够抑制金葡菌的多种毒力因子的分泌。蜂胶对a-溶血素的分泌抑制作用最强,且在较宽浓度范围都能明显降低a-溶血素的分泌。杨明等人以乙醇浸出提取的蜂胶和CO2超临界萃取提取的蜂胶为材料 ,测定了两种蜂胶的效果和最低抑菌浓度。结果说明:两种蜂胶对大肠埃希氏杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球-+4++枯苹杆南-+4++4变旳丰「凿-+++++菌、白念珠菌和紫色癣菌都有肯定抑菌效果 ,~。申慧亭等人承受琼脂挖沟法与琼脂确定浓度法 ,对20种临床常见的病原菌和条件致病菌〔金黄色葡萄球菌、链球菌、绿脓杆菌 ,结核杆菌、肺炎球菌、伤寒杆菌、甲型副伤寒杆菌、丙型副伤寒杆菌、白色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌等〕都有抑制生长的作用 ,对结核杆菌、白色念珠菌,型隐球菌进展了试验室条件下的蜂胶抗菌活性争论。结论 :蜂胶在体外试验条件下有明显的抗细菌、抗真菌以及抗结核分枝杆菌的作用 ,而且这种作用不受试验方法的影响。1/3201/6401/1280“2河■■+++4++++++++++++++表2琼脂确定浓度法蜂胶对 20种细菌与真菌抗菌结果记录IJ101/20)/40VX白也诃商埔诃产气杆脩人型副协底杆曲-----y-y++++++++-++++++++++++++一一-+++■+44+■-■44+两型链序荫-+++++■-一■-KSE轩曲〔无彝} =----一------44--+<■++++++1+++++++兰桃芳等人:承受水、95%乙醇及与超声波的综合作用从原蜂胶中提取蜂胶液,将得到的蜂胶提取液稀释成 %、%、%、%,并分别对蜡样芽孢杆菌、 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、黑曲霉五种菌进展抑菌圈直径和最小抑制浓度(MIC)的测定。结果说明,超声波作用于95%的乙醇蜂胶液的方法提取效果最好,%。不同提取方法得到的蜂胶提取液的抑菌作用存在差异,以超声波和乙醇提取的蜂胶液对受试菌作用最强。蜂胶提取液对大肠杆菌的抑制作用最强。其次是沙门氏菌和蜡样芽孢杆菌,最差的是黑曲霉。有关资料说明,蜂胶中抗菌物质主要为黄酮类物质和树脂 ,这些物质大局部为脂溶性,经有机溶剂提取的蜂胶液抑菌效果比较好[9]。该争论通过对蜂胶中活性物质的提取和抗菌作用观看初步说明,经HPLC法检测89%乙醇提取的蜂胶粗提物消灭多个峰值 ,即检测到多种化合物,其中黄酮峰值较高,%,其它化合物还有待进一步定性检测。孟日增等人利用体外抑菌试验考察了蜂胶粗提物对金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌的抑菌效果,结果均呈高敏。据文献报道,蜂胶除了能抑制金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌外制蜡样芽孢杆菌、沙门氏菌、黑曲霉[10]。,还能抑陈志宝等人争论说明,蜂胶能够抑制标准菌株较弱,虽然亚抑菌浓度的蜂胶不能完全抑制金葡菌生长29213的生长,在低浓度时抑菌作用,但却能够抑制金葡菌的多种毒力因子的分泌。蜂胶对a-溶血素的分泌抑制作用最强,且在较宽浓度范围都能明显降低 a-溶血素的分泌。蜂胶提取物的抑菌机理周先汉等人争论了蜂胶提取物的抑菌活性及其抑菌机理。较低的pH值有利于蜂胶发挥抑菌作用;温度高于常温时,蜂胶的抑菌活性有所降低,但在常规的杀菌温度范围内,仍有较好的抑菌效果且较为稳定;金属离子对蜂胶的抑菌效果影响不大。蜂胶对细菌细胞壁与细胞膜都有肯定的作用,使其通透性增加,造成细胞内物质外流,破坏了细胞正常代谢的物质根底,从而到达了抑菌效果。蜂胶提取物抑菌成分稳定性争论孟良玉等人以蜡样芽孢杆菌为指示菌争论蜂胶提取物抑菌成分的稳定性。 结果说明:蜂胶提取物具有较强的抑菌活性,对热处理、pH值、紫外线、金属离子均具有较好的稳定性,仅在121C或pH10处理后其抑菌活性才明显下降。蜂胶在实际生产中的应用鸡蛋保鲜蜂胶中抗菌物质主要为黄酮类物质和树脂,这些化合物可以杀灭或抑制蛋壳外表的微生物。另外,蜂胶具有良好的成膜作用,可以在蛋壳外表形成一层薄膜,防止微生物侵入蛋壳,同时可阻碍蛋内外气体交换,削减蛋内水分流失,进而延长鸡蛋的保鲜期。孟良玉等人通过试验觉察不同提取方法得到的蜂胶提取液的抑菌作用存在差异,以超声波和乙醇综合作用提取的蜂胶液体对受试菌作用最强;蜂胶提取液对大肠杆菌的抑制作用最强,其次是沙门氏菌和蜡样芽孢杆菌。不同浓度的蜂胶提取液对鸡蛋的保鲜效果略有不同,具体的最正确保鲜浓度还有待后续试验进展争论。柑橘保鲜魏强华等人承受蜂胶涂膜剂对柑橘进展保鲜处理,通过正交试验法对蜂胶涂膜剂配方进行优化。通过测定柑橘样品的感官变化、失重率变化及VC含量的变化,确定柑橘保鲜效果。结果说明:最佳的蜂胶涂膜剂配方为蜂胶浓度柑橘保鲜效果最好,可以有效延长柑橘的货架期。番茄保鲜1%、明胶浓度1%、%,此时魏强华等人承受蜂胶涂膜剂对番茄进展保鲜处理,通过正交试验法对蜂胶涂膜剂配方进行优化。通过测定番茄样品的感官变化、失重率变化及维生素 C含量的变化,确定番茄保鲜效果。试验结果说明,%、明胶浓度为1%、%,此时番茄样品保鲜效果最好,可以有效延长番茄样品的货架期。 蜂胶在蜜饯奈李中防霉防腐效果争论高建等人将蜂胶作为一种纯自然食品防霉防腐保鲜剂应用于蜜饯产品加工中 ,替代化学防腐剂苯甲酸钠。方法:选择0 05%~0 2%的蜂胶应用于蜜饯奈李产品加工中规用量0 05%化学防腐剂苯甲酸钠比照。结果:0 05%蜂胶产品组抑菌效果优于,同时与常0 05%苯甲酸钠组。参加0 05%~0 2%蜂胶对蜜饯奈李产品中霉菌及细菌生殖体有较好的抑菌作用,而且对产品风味及品质无影响。《]。