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为什么可以根据菌落数目来计算样品中微生物的数量?
掌握涂布平板法、稀释倒平板法、划线分离法分离微生物的操作技术;
掌握微生物样品稀释法。
初步掌握无菌操作技术和平板菌落计数法。
什么是微生物的纯培养,从固体培养基中分离微生物的方
法有哪些?
实验原理
实验二 从土壤中分离和纯化微生物
土壤样品:按无菌操作要求有目的地取某一类型的土壤。
培养基:牛肉膏蛋白胨培养基,高氏一号培养基,马铃薯培养基(上次实验成果)
无菌生理盐水。
其它物品: 无菌培养皿,无菌吸管,洗耳球,无菌玻璃涂棒,无菌报纸,药勺,10%酚溶液。
实验器材
3 材料与方法
方法()
01
,注意更换枪尖
02
10-4、10-5、10-6;
03
制备土壤稀释液
04
振荡20 min
05
三角烧瓶中为什么要加玻璃珠?
06
取土壤过程中怎样减少杂菌污染?
07
倒平板
将培养基加热熔化,冷至55-60℃,(在高氏1号培养基中加入
10%酚数滴),(在马铃薯培养基中加入链霉素溶液至终浓度为
30ug/mL,)混匀后倒入平板。
(操作方法,教师示范)
每平板12 mL
静置5-10min
涂布
标记浓度
取菌液
1mL
玻璃涂棒灭菌
涂布
03
04
05
06
01
02
培养
细 菌
霉 菌
放线菌
倒置培养24-48h
倒置培养3-5天
选取平板上长有50-200个菌落的稀释度计算每毫升的含菌量,
同一稀释度的三个重复平板上菌落数应相差不大,且不同稀释度
计算的数据也不应相差太大。
平板菌落计数
28℃培养箱
37℃培养箱
方法()
取样
()
01
倒平板
(45℃,12mL,旋动)
教师示范
02
倒置培养
03
方法()
A
B
C
划线
(教师示范)
倒置培养
倒平板
用文字描述实验项目、实验目的、材料与方法.
实验结果。观察菌落数目、菌落形态特征,数据可设计表格表示。注意用三线表,要求有表格名称,项目清晰。
实验分析。比较涂布平板法和稀释倒平板法两种操作方法的结果?作为初学者更适合用什么方法?实验操作中存在什么问题,应如何改进?
实验报告
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