植物可溶性糖含量检测.ppt

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实验七
植物可溶性糖的测定
DEFENCE
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实验原理
糖在硫酸作用下生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用生成绿色络合物，颜色的深浅与糖含量有关，在650nm波长下OD值与糖含量成正比，由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化，故必须在反应后立即在同一时间内比色。
01
实验仪器 ： 分光光度计
02
恒温水浴锅
03
分析天平
04
刻度试管
05
漏斗
实验器材
恒温水浴锅
分光光度计
分析天平
实验试剂
乙醚
醋酸铅
草酸纳粉末
PART
ONE
实验材料
青菜梗
实验步骤
可熔性糖的提取：称取5克新鲜青菜梗于研钵中，加乙醚少许，磨成匀浆，倒入烧杯中，水洗涤，再加蒸馏水30-40ml，然后水浴加热70-80摄氏度，半小时冷却后逐滴加入饱和中性醋酸铅，以除去蛋白质，直至加液时不再出现白色沉淀为止，然后将此混合液连同残渣一并倒入100ml容量瓶中，充分振荡定容，过滤，于事先放有少量草酸钠粉末的三角瓶中，所得的透明液体即为可溶性糖提取液。
实验步骤
显色及比色：吸取上述糖提取液1ml，加入5ml蒽酮试剂混合，沸水浴煮10min，取出冷却，在625nm处测OD值，从标准曲线上取得提取液中糖的含量。
绘制标准曲线：取标准糖溶液将其稀释成一系列0、20、40、60、80毫克每摩尔的不同浓度的溶液，按上述方法分别测其OD值，然后绘制标准曲线。