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目录
课题意义
1
国内外研究进展
2
实验材料、仪器和试剂
3
实验方法
4
实验结果
5
结论
6
/CONTENTS
1、课题的意义
中华鳖(Trionyx Sinensis),俗称甲鱼,营养丰富,肉味鲜美,又是珍贵的药材,其成分含动物胶、角蛋白、维生素D及碘等,具有滋阴清热、平肝益肾及消於的功能。对于雄性甲鱼其生长速度较快,裙边较雌性宽,营养价值则更为丰富。
本课题从温度这一因素研究其对中华鳖性腺分化发育的影响,可为雄性化苗种的培育提供技术支持。
2、国内外研究进展
关于中华鳖的性别决定,国内外曾有人做过相关研究,但结果却不尽相同。阮成旭(2004)和朱道玉(2000)的研究发现,孵化温度在32℃时中华鳖雄性比例较高,%、88%,而27℃时雌性比例较高。巫旗生(2011)等用300枚受精卵分6个温度梯度进行研究,结果显示,雄性所占比例随温度升高而上升。
聂刘旺(2001)的研究结果却与朱道玉等人的研究所得出的规律相反,发现中华鳖高孵化温度产雌性,低孵化温度产雄性。
另外在甲壳类对虾方面,杨丛海(1993)等将中国对虾(Penaeus chinensis)~42℃的高温处理30 s,∶1,差异极为显著。
3、实验材料、仪器和试剂
布温氏固定液,带式苏木精,%伊红,二甲苯,梯度乙醇,中性树胶,蒸馏水。显微镜,数码相机,切片机,电热恒温干燥箱、塑料沙盘、解剖器材、载玻片、盖玻片、恒温培养箱。
中华鳖受精卵500枚,卵重范围在3~5g,~。(由河北康态中华鳖良种有限公司提供)
4、试验方法
(固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→染色→拍照观察)
待分化结束后,解剖观察并对性腺作石蜡切片
02
(空气湿度控制在85%左右,沙湿度10~15%)
在32℃恒温箱内培养
01
分两组进行孵化,每组250枚受精卵
统计雌雄数、计算雌雄比,整理分析数据
到第13天时,分别用18℃和40℃的极限温度刺激鳖卵6h,之后继续在32℃下孵化
雌鳖 胚胎
雄鳖 胚胎
Ov
O
K
K
K
T
卵巢:O;输卵管:Ov;精巢:T;肾脏:K
雌鳖 胚胎
雄鳖 胚胎
Ov
O
O
K
K
K
T
T
卵巢:O;输卵管:Ov;精巢:T;肾脏:K
精巢发育对比
15d,18℃处理 精巢
Sp
24d,18℃处理 精巢
Sp
15d,40℃处理 精巢
Sp
24d,40℃处理 精巢
Sp
精原细胞:Sp
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