四因子诱导iPSCs方法的改良及大鼠肾脏固有细胞来源的iPSCs的获得.docx

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引言：
iPSCs是通过在体细胞中引入一组能产生基因表达模式变化的因子，在体外重编程细胞的方法。其中，四因子诱导的iPSCs方法（Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc）是最广泛使用的方法之一。 然而，iPSCs的制备和应用受到很多限制，例如，许多iPSCs的制备方法都使用癌症相关的gene c-Myc，引起细胞不正常增殖和肿瘤形成。此外，原代依赖性小鼠成纤维细胞用于此方法制备的iPSCs存在很多不足。在本研究中，我们改良了四因子诱导iPSCs方法并成功获得了来源于大鼠肾脏固有细胞的iPSCs。
材料和方法：
通过改进四因子诱导iPSCs方法，使我们成功地重编程了大鼠肾脏固有细胞。我们同步引入Oct4、Sox2、Klf4和Lin28基因。我们通过病毒转染的方式提供这些基因到大鼠肾脏固有细胞并且发现这些基因被表达。在接下来的2-3周内，我们观察到形成了全部重编程的iPSCs克隆。我们进一步证实了这些iPSCs的特点，包括典型的hibernation-like生长，ES细胞表面标志CD34、CD45、CD29、Sca-1、CD44和CD90，以及正常的发育能力和三胚层发育的刻板印记。
结果：
我们通过改良的四因子诱导iPSCs方法成功地获得了大鼠肾脏固有细胞来源的iPSCs。我们使用了非病毒系统导入转录因子，并且避免了使用抗癌基因c-Myc，大大减少了细胞转化为肿瘤的可能性。我们发现，这种改进技术比常规四因素诱导iPSCs技术更加高效。
讨论：
在本研究中，我们成功地获得了大鼠肾脏固有细胞来源的iPSCs。在制备方法方面，我们使用了非病毒系统导入转录因子，这减少了致癌基因c-Myc对iPSCs制备的影响。我们观察到改进后的方法获得高效和高质量的iPSCs。无论是对于基础研究还是治疗领域，这些iPSCs都具有重要的应用前景。
结论：
在本研究中，我们改进了四因子诱导iPSCs的方法并成功获得了来源于大鼠肾脏固有细胞的iPSCs。我们使用非病毒系统转导Oct4、Sox2 Klf4和Lin28转录因子，这大大减少了细胞转化为肿瘤的风险。改进后的方法能够高效地制备高质量的iPSCs，这对基础研究和临床治疗都具有重要意义。