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绪言
1、微生物学 定义：研究微生物形态、生理、遗传变异、生态分布以及其与人类关系 科学，广义 微生物学还包括免疫学，甚至还包括寄生虫学，尤其是原虫学。
2、微生物特点：①个体微小，需借助显微镜观测，其群体可见。②构造简朴，繁殖快，分布广。③比较面积大（有助于物质互换，代谢繁殖）。④易变异，适应性强。
3、微生物种类：三型八大类三菌四体一病毒）
真菌细胞型：细胞核有核膜、核仁，细胞器完整°Eg:真菌。
原核细胞型：仅有原始核，无核仁、核膜，细胞器很不完善。DNA和RNA同步存在（拟核/核体）Eg：细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体。
非细胞型微生物：最小 一类微生物，无经典细胞构造。只能在活细胞内生长繁殖。 :病毒。
4、微生物学发展过程
第一阶段一一形态课时期：1683年荷兰吕文虎克初次观测到微生物。1861年巴斯德否认“自然发生说”；证明发酵由微生物引起。
第二阶段一一生理学及免疫学奠基时期：
I巴斯德（微生物学、生理学与免疫学 重要奠基人）历史性奉献：①酒是某种微生物发酵产物②处理了酒 败坏问题③研究炭疽病、人 狂犬病，确定这些疾病由对应 微生物引起、微生物可以至弱作作防止传染病用，并且对至弱 途径做了示范性 试验④发明免
疫学 防止接种⑤发明巴氏消毒法
II科赫（建立微生物研究 基本操作技术和对病院细菌 研究，有突出奉献）功绩：①发明培养基并用于纯化微生物②发明染色观测、显微摄影③科赫法则④证明炭疽病原因-炭疽杆菌发现结核病源菌-结核杆菌
【科赫法则：①病原微生物应在同一疾病中查见，但在健康动物体内不存在②该病原菌能被分离培养得纯种③该纯培养物接种至易感动物，能产生同样 疾病④自人工感染 试验动物体内能再次分离培养得到相似 病原】
【免疫措施：注射、服、点眼、滴鼻、气雾】
第三阶段一一近代及现代微生物
理论上获得 成就极其应用价值：①进入真正意义上 基因工程时代②进行化学治疗腰肌和抗生素研究③组织移植、免疫耐受研究，抗原抗体反应在诊断及防治疾病上应用技术上 重大创新及其应用价值①电子显微镜 应用②标识抗原或标识抗体 应用③细胞培养、空斑技术、蛋白质及核酸提纯④核磁共振仪使用⑤分子克隆、PCR （聚合酶链式反应）、DNA测试、基因组学及电子计算机等技术应用
微生物学领域 三大进展：微生物遗传学、免疫学及病毒学
第1篇总论
第一章细菌形态构造
【内容提纲】细菌个体微小，经染色后在光学显微镜下才能观测。最常用 是革兰染色法，可讲细菌分为革兰阴性和革兰阳性两大类。
就某种细菌而言，菌体有一定 大小、形态及排列方式。
细菌 基本构造包括细胞壁、细胞膜、细胞质及拟核等。
革兰阳性菌 细胞壁有较厚 肽聚糖及特有 磷壁酸。
革兰阴性菌有外膜，外膜由外膜蛋白、脂多糖等构成，外膜下有一薄层肽聚糖。
细菌 特殊构造有荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等，各有一定 构造及特殊 生理功能，与细菌致病性及免疫原性有关。
细菌是原核生物界中 一大类单细胞微生物，它们个体微小，形态构造简朴，广义 细菌除一般细菌外，还包括立克次体、衣原体、支原体、螺旋体及放线菌。
复习思索题
1、细菌大小、基本形态
答：
大小：细菌个体微小，需染色后在光学显微镜下才能观测到。细菌大小 度量单位一般是微米。
形态：形态比较简朴，有球状、杆状和螺旋状三种基本形态及某些其他形态。
细菌 繁殖方式都是简朴 裂殖，不一样细菌裂殖后其菌体排列方式不一样。有特性性、
相对稳定 形态和排列方式 细菌有球菌、双球菌、链球菌、葡萄球菌（四联、八叠）、杆
菌、螺形菌合适条件下培养 细菌在对数生长期形态经典。不亮环境或老龄期，会出现与正常形状不一样样个体，称为衰老型或退化型。
但有些细菌虽然在合适 环境中生长，其形状也很不一致，有多形性。
2、菌落概念，菌落实际意义
菌落：某个细菌在合适条件下、在适合生长固体培养基表面或内部，培养后分裂繁殖出巨大 菌体，形成一种肉眼可见、有一定形态 独立群体。【单个细菌及其后裔构成“大家族”】
菌苔：生长 菌落连成一片。【多种“大家族”】
菌落实际意义：菌落肉眼可见，多种细菌菌落在大小、色泽、质地、表面形状、边缘构造等方面均有个各自 特性。观测细菌 菌落特性，可推测该细菌 种类，工作中一般通过固体培养基上分离培养 菌落，进行细菌 分离、纯化、传代、计数和鉴定等。
3、细菌 基本构造和特殊构造（绘制细菌构造模式图）
基本构造：细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核等基本构造。
特殊构造：荚膜、S层、鞭毛、菌毛、芽孢等。
4、比较革兰氏阳性和阴性细菌细胞壁 异同
阳性
阴性
厚度
厚 15~80nm
薄 10 15nm
肽聚糖
多 40%~95%
少 10%~20%
脂类
少 1%~4%
多 11%~22%
磷壁酸
5
X
外膜
X
5
脂蛋白
X
"
脂多糖
X
/
5、脂多糖和外膜蛋白 构成及功能
构成
功能
脂多糖（LPS ）
（革兰阴性菌所特有，位于外膜最表面）由类脂A、关键多糖和侧链多糖三部分构成
①可以吸附钙离子、镁离子等阳离子②为噬菌体提供特异吸附受体
外膜蛋白（OMP）
（外膜中向前多种蛋白质
统称，按含量和功能分为重
要次要两类）
重要OMP:微孔蛋白、脂蛋白
微孔蛋白：分子筛作用，与细胞粘附和特定物质摄取有关、受体作用
脂蛋白:使外膜层与肽聚糖牢固连接，可作为噬菌体受体，或参与铁及其他营养物质转运
6、细菌遗传物质
拟核和质粒。
遗传物质DNA无核膜包围，分布于菌体中央形成拟核（核体）。拟核含细菌 遗传基因，其功能是控制细菌遗传和变异。
质粒在拟核DNA之外，游离 小型双股DNA分子，含细菌生命非必须基因，其功能是控制产生菌毛、毒素、耐药性和细菌素等遗传性状。质粒能独立复制传给子代。
7、细菌荚膜概念及重要功能
概念：某些细菌在其生活过程中，在细胞壁外周产生一层包围整个菌体、边界清晰粘液样物质。
重要功能：①抗吞噬②抗有害物质损伤③营养物质 储存场所（重要含多糖类）与废物排出
之地。
8、细菌芽孢特点及意义（某些革兰阳性菌在一定 环境条件下，在菌体内形成一种圆形或卵圆形 休眠体，称为芽孢或内芽孢。未形成芽孢 菌体称为繁殖体或营养体，老龄芽孢将脱离原菌体独立存在，称为游离芽孢）
特点：①对高温、干燥、辐射、化学药物等有强大抵御力。
含水量低，壁厚而致密，通透性差不易着色，折光性强。
芽孢内新陈代谢几乎停止，处在休眠状态，但能保持潜在萌发力。
不是繁殖器官，一种芽孢萌发只产生一种营养状态细胞。
意义：①芽孢抵御力强，可在自然界中存在数年，是重要传染源，但芽孢并不直接引起疾病，只有发芽成为繁殖体后，才能迅速大量繁殖而致病。
芽孢抵御力强，故应以杀灭芽孢座位可靠 灭菌原则。
可根据其形态位置鉴别细菌
第二章细菌生长繁殖与生态
【内容提纲】
细菌菌体 形成是一种复杂 住，波及物质摄取、生物合成、聚合作用（DNA复制，转录、翻译）及组装四个环节。
菌体以二等分分裂法无性繁殖。
细菌群体 生长繁殖和培养时间呈特定规律，用生长曲线表达，并可分为缓慢期、对数期、稳定期及衰亡期四个阶段。
大多数细菌可在人工培养基上生长。根据细菌对氧气和温度需求差异，可将细菌分为需氧菌、厌氧菌、兼性菌以及嗜温菌、嗜冷菌、嗜热菌等。
生化试验系根据细菌传代特点设计，用于细菌鉴定。
自然界中 细菌多以群落存在，生物被膜是一种重要 体现形式，其抵御力较游离细菌强，其生长受控于密度感应系统。后者通过信号分子作用，在基因水平完毕对细菌群落生长 调控。
微生物种群之间在自然界存在着复杂 互相作用，正常菌群对维护动物健康至关重要。
复习思索题
L形成细菌个休代谢过程有何特点？
细菌生长和繁殖速度极快，超过动物细胞10~1倍
细菌运用多种化合物作为能源能力远远强于动物细胞
细菌对营养需求比动物细胞更为多种多样，由于他们有多种代谢旁路
细菌可运用超长流水线式生产方式生成大分子物质
细菌能生产诸如肽聚糖、脂多糖、磷壁酸等特殊物质
2、物质摄取 方式有哪几种？各有何特点?
单纯扩散
被动扩散，细胞内外物质最简朴一种互换方式。细胞膜两侧 物质靠浓度差（浓度梯度）进行分子扩散，不需要能量。无特异性和选择性，速度较慢，细胞内为溶质浓度一旦到达平衡，扩散便停止。
增进扩散
某些物质与某些位于细胞膜特异性载体蛋白相结合，然后将其转运至细胞内，这一过程具有特异性和选择性，不需要能量。
积极运送
细菌吸取营养物质 一种重要方式，需要特异性载体蛋白，能将特异性溶质逆浓度梯度泵入细胞，因此需要能量。
基因位转
物质在运送 同步受到化学修饰，从而能愠缘不停输入细胞，此种方式在缺氧环境中最常见，其过程波及从可溶物向分子 化学变化，需要特异性载体蛋白参与，需要能量。
3、细菌菌体分裂为何只需较短时间?
细菌以二等分分裂法进行无性繁殖。大多数细菌菌体在合适条件下分裂需要较短时间，是由于在上一轮复制尚未完毕时，下一轮细胞分裂已经启动。此外染色体DNA存在多种复制叉，可使自带 染色体DNA同步开始部分复制。
4、何谓细菌 生长曲线？怎样确定？有何意义？不一样步期有何特点？
细菌生长曲线：将细菌接种在液体培养基并置于合适 温度下，定期取样检查活菌数，可发现其生长过程具有规律性。以时间为横坐标、以活菌数为纵坐标，可得出一条生长曲线。曲线显示了细菌生长繁殖 四个期。
细菌 生长曲线是在体外人工培养条件下观测到，在动物体内因受诸多原因 制约，未必能出现此种经典 曲线，但对细菌生长规律 研究及实践有重要 参照价值。
如下为各个时期及其特点:
缓慢期
细菌来到新环境 一种适应过程。菌体增大，代谢活跃，合成并积累所需酶系统。RNA含量明显增长，但DNA含量无变化。此时细菌数并不增长。
对数期
细菌此时生长迅速，以恒定速度进行分裂繁殖，活菌数以几何级数增长，到达顶峰。生长曲线靠近一条斜直线。该期病原菌致病力最强，其形态、染色特性及生理活性较经典，对抗菌药物作用较为敏感。
稳定期
因营养消耗、代谢产物蓄积等，细菌繁殖速度下降，死亡数逐渐上升，新繁殖活菌数与死亡数大体平衡。该期细菌形态及生理形状常有变化。毒素等代谢产物大多在此时产生。
衰亡期
细菌开始大量死亡，死菌数超过活菌数。细菌菌体变形或自溶，染色不经典，难以进行鉴定。
5、何谓培养基？种类有哪些？
培养基还是人工配制 基质，具有细菌生长繁殖必需 营养物质。培养基制成后，一般都要
进行灭菌处理。
种类：按营养构成，状态，功能差异辨别
基础培养基
含多数细菌生长繁殖所需 基本营养成分，常用新鲜牛肉浸膏，加入适量蛋白胨、NaCl、磷酸盐，~。
营养培养基
在基础培养基内，添加葡萄糖、血液或血清等，即成营养培养基，最常用是血琼脂平板(在营养琼脂中加入5%新鲜血液配制成)
液体培养基
在液体培养基中加入1%~2% 琼脂，加热融化再冷却凝固。用于细菌分离纯化、菌落观测、生物活性检测等，可制成试管斜面或倾倒平面。
固体培养基
%琼脂。可做穿刺试验，观测细菌 运动力。
半固体培养基
鉴别培养基
针对特定菌种设计，根据其特定产物，在培养基中加入特定作用底物或显色指示剂，凭肉眼识别颜色既能鉴别菌种°Eg三糖铁培养基和麦康凯培养基。
选择培养基
在培养基中加入某些化学物质，对不一样细菌分别产生克制或增进作用，从而可从混杂多种细菌 样本分离出所需细菌°Eg麦康凯培养基、SS培养基、伊红美蓝培养基等。
厌氧培养基
为培养厌氧菌而设计。
6、试述重要 细菌生化反应 原理及用途。P28 P29
多种细菌可以分解运用 营养物质不一样，对相似营养物质 分解产物也不一样，据此可以设计特定 生化反应，作为鉴定细菌只用。细菌 合成代谢产物如毒素、色素等也有一定鉴别意义，但一般不用生化反应检测。
常用 生化反应有氧化酶试验、触酶试验、氧化发酵(O/F)试验、VP试验及甲基红试验等。
可采用微量法和常量法。目前一般多用商品化微量生化试剂检测剂盒。
VP试验
由两学者创立得名。大肠杆菌和产气杆菌均能发酵葡萄糖，产酸，产气，两者不能区别。但产气杆菌能使丙酮酸脱落，生成中性 乙酰甲基甲醇，后者在碱性溶液中被空气中分子样所氧化，生成乙二酰与培养基中含胍基 化合物发生反应，生成红色化合物，是为阳性。大肠杆菌不能生成乙酰甲基甲醇，故为阴性。
甲基红试验
在VP试验中，产气杆菌分解葡萄糖，产生 两分子丙酮酸转变为一分子中性 乙酰甲基甲醇，故最终 酸类较少，培养液pH >。以甲基红(MR)做指示剂是，溶液呈橘黄色，是为阴性。大肠杆菌分解匍萄糖时，丙酮酸不转变为乙酰甲基甲醇，故培养基酸性较强，pH <,甲基红指示剂呈红色，则为阳性。
7、生物被膜有何特点。
生物被膜中 细菌由于被多糖等物质包埋而受到保护，对外环境抵御力及对抗生素抗性均较同种游离 单个菌体强，影响抗生素 疗效和灭菌效果。电镜下可观测到细菌 生物被膜呈连片状 菌体团块。研究表明有 细菌如嗜水气单胞菌，治病菌株可形成生物被膜，而非致病菌不形成。生物被膜形成手细菌密度感应系统调控。
8、何谓密度感应系统调控？举例阐明其应用价值。P30
9、试述益生菌和益生元概念及应用价值。
某些细菌或真菌有助于宿主胃肠道微生物区系 平衡，能克制对宿主有害 微生物 生长，用这些微生物制成 制剂称为益生菌或益生素。饲料或食品中 某些寡糖例假如寡糖(FOS )等成分，不被宿主消化吸取，但等选择性 刺激宿主消化道有益微生物或饲喂 益生菌 生长，对宿主产生有益作用，此类成分叫益生元或益生素元。益生菌及毕生缘亦可联合使用。两者对动物有一定保健作用。
10、何谓菌群失调？保持动物正常菌群有何重要意义？
因患病、外科手术、环境变化和滥用抗菌药物等原因，宿主某个微生物正常菌群中 细菌种类和数量发生变化，对机体导致损失，出现一定病理效应 状态，称为菌群失调。例如长期持续或短期大量服大肠杆菌敏感 抗菌药物，杀死了肠道有益大肠杆菌，致使对抗菌药物不敏感致病性大肠杆菌或其他肠道致病菌借机大量增值，引起肠道疾病。
正常菌群与其宿主之间形成一种共生关系，详细表目前营养免疫和生物拮抗三个方面°P32
11、 试述悉生生物学和悉生动物 概念、试验动物分类(包括定义)以及培育试验动物意义。
悉生动物学：是用无菌动物技术研究微生物与其宿主互相关系 生命科学，它是在科学研究与临床医学中应用悉生动物科学。
悉生动物：一切生命形态都懂得 动物。根据概念可分为五类，其中无特定病原体动物应用正日趋广泛。
无菌动物
不带任何微生物动物，即无外源菌动物。实际上某些内源性病毒或正常病毒很难清除，因此无菌动物实际上是一种相对概念。无菌动物中尚有一种无Y球蛋白动物。
悉生动物
侠义 悉生动物是指无菌动物，广义也指有目 地带有某种或某些已知微生物动物。无菌动物带有或接种了一种微生物动物叫单联悉生动物，带两种微生物者称双联微生物，依次类推，称为三联或多联微生物。
无特定病原体动物
(SPF )
是指不存在某些特定具有病原性或潜在病原性微生物动物。例如为了排除某些细菌如假单胞菌属、变形杆菌属、克雷伯菌属等干扰，可通过无菌动物与这些细菌以外正常菌群相联络培育SPF动物。
清洁动物
是指动物来源于剖腹产，喂养与半屏蔽系统，其体内外不能携带人畜共患病和动物重要传染病病原体。是无菌动物与健康动物纯粹正常微生物群相联络成果。
一般动物
是指在开放条件下喂养，其体内外存在着多种微生物和寄生虫，但不能携带人畜共患病病原微生物动物。
培育试验动物意义：由于无菌动物不受任何微生物刺激和干扰，因此可以用于研究动物体内外微生物区系对机体 影响及微生态学研究，可用来研究免疫、肿瘤、病理及传染病