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篇1：林可霉素提取技术
为了寻找适合萃取林可霉素的二元萃取剂，对林可霉素在不同溶剂中的分配系数以及二元萃取剂的性能进行了研究。
萃取剂; 苯甲醇正辛醇; 林可霉素; 分配系数
林可霉素的提取工艺是以正丁醇萃取法萃取率高而被国内各生产厂家所采用，但该方法存在溶剂消耗大、能耗高、操作环境差等缺点。
混合醇类萃取剂可降低溶剂的损耗、中性膦类萃取剂与正丁醇相比有效的提高萃取率，但是，这些萃取剂在生产工艺过程中都还存在一些问题，如：混合醇类萃取剂萃取率较低、操作温度高、溶剂气味难闻;中性膦类萃取剂价格高、毒性大，影响产品质量;肟类萃取剂反萃较难实现等。
因此，研究开发新型萃取剂具有重要的理论和应用价值。
对于萃取剂的选择除应满足萃取率高、选择性好等基本要求外，还应当兼顾损耗、能耗、环保以及人员安全等多方面因素。
多元萃取体系除具备原有单一溶剂萃取体系的选择性高、分离效果好和适应性强的特点外，还具有提高同位素或相似物选择性、降低两相间互溶度、提高萃取效率、加快传质速率及改善操作条件等优点。
一、材料与方法
1、试验材料
林可霉素原粉来自华北制药厂华滦分厂。苯甲醇、正辛醇、正己烷、间二甲苯、二甲苯乙酸异丁酯、丁酸乙酯和乙酸正戊酯为中国医药(集团)上海化学试剂厂产品，分析纯。
2 、试验仪器
WZZ22S数字式自动旋光仪，上海精密科学仪器有限公司生产。GC122气相色谱仪，上海分析仪器厂产品。PHS23型酸度计，上海第二分析仪器厂产品。
3 、分析方法
林可霉素的分析方法用旋光法测定。萃取剂的分析方法用气相色谱测定，测定条件为：柱箱170℃，离子室180℃，进样器200℃
(1)萃取分配系数的计算 林可霉素易溶于水，能溶于甲醇、乙醇等大部分有机溶剂。其在两相中的分配系数用林可霉素在两相中的效价浓度之比计算，即D=u0/ua(1)
式中：D――分配系数，u0、ua――林可霉素分别在有机相和水相中效价浓度(μ/ml)。
(2)协萃系数的计算 部分二元萃取剂组成的萃取体系存在协萃效应，其协萃系数的计算方法如下：
定义：D加和=D1X1+D2(1-X1)(2)
式中：D1、D2――萃取剂1和2的萃取分配系数，X1表示萃取剂1的摩尔分数。
设D协同为协萃分配系数，则协萃系数R为：
R=D协同/D加和(3)
显然，R>1，表明有协同效应;RA>C。
5 优化工艺的验证实验： 按优化工艺条件重复3次实验进行验证，%，表明实验所确定的工艺条件为优化工艺条件。
6 超声波循环提取实验： 超声波循环提取器中加入丙酮2200ml(10倍)，开启搅拌转子，调节转速为1000r/min。缓慢加入菌体220g，待料液完全循环后，开启超声波发射器，按正交实验确定的优化工艺条件(功率300W，单次辐射时间3s，提取时间40min)进行实验，%，略高于验证实验所得提取率。循环放大实验表明该优化工艺条件可应用于灰黄霉素提取。
三 结论
本研究通过正交设计实验，对灰黄霉素的超声波提取工艺条件进行了优化。确定了超声波提取灰黄霉素的优化工艺条件为：10倍量的丙酮为提取溶剂，功率300W，单次辐射时间3s，提取时间40min。%，%，表明了该优化工艺条件应用于灰黄霉素的提取是可行的。
篇4：林可霉素生物合成技术
在合成培养基中利用林可链霉菌发酵生产林可霉素。
当向培养基中加入生物素和氨基酸时，林可霉素的产量受到很大影响。
篇5：林可霉素生物合成技术
林可霉素是一种高效广谱抗生素，临床用于由抗革兰阳性菌引起疾病的治疗。
林可霉素A的分子式为C18H34N2O6S，，它与林可霉素B在结构上的区别为：林可霉素A 4位上为正丙基，而林可霉素B4位上是乙基， 两者在药理上存在着很大的区别，林可霉素B的抑菌活性比林可霉素A低，但对人的毒副作用较大。
我国药典要求成品中B含量小于5%。
本文采用合成培养基进行摇瓶发酵实验，选择玉米浆中含量较丰富的D生物素、L谷氨酸、L缬氨酸等15个因子首先进行两水平因子设计实验，以筛选出显著影响因子，然后进行响应面设计实验，通过软件分析得到优化的发酵培养基配方。
一、材料与方法
1、菌种
林可链霉菌(Streptomyces lincolnensis)L427，由江西国药有限公司提供。
2 、培养条件与培养方法
种子培养种子摇瓶于30℃，220r/min培养48h。
摇瓶发酵培养 按30%的接种量将种子液接入发酵培养基，30℃，220r/min，培养168h。
3、生物效价的测定
采用管碟法。
鉴定菌为藤黄八叠球菌[Sarcina lutea，CMCC(B)28001]，由江西国药有限责任公司提供。
林可霉素(lincomycin)标准品购自Sigma公司。
二、结果与讨论
1 、实验设计
通过两水平因子设计(2 Level Factorial Design)实验可迅速找出生物素和氨基酸中对林可霉素的发酵生产有显著影响的因子，进一步对显著影响因子进行响应面设计(response surface design，RSD)实验，对结果进行优化分析可得到优化配方。
所采用的实验设计、数据分析软件为Design Expert 。
(1)两水平因子设计 该设计可从大量影响因子中快速找出显著影响因子，设计方案和结果如表1所示。
用软件进行分析，，%，故本设计模型是显著的。
，%，说明模型的响应曲面图显著弯曲，提示模型具有很强的显著性。
鉴于此，选择生物素、谷氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、亮氨酸和酪氨酸作为影响发酵生产林可霉素的关键因素，进行响应面设计。
其他可信度较小的因素对林可霉素的发酵生产无显著影响，在下一步的培养基优化中不予考虑。
(2)响应面设计 将6个显著影响因子进行响应面设计中的中心组合设计(central composite design，CCD)，可得出响应值(生物效价)关于各显著影响因子的多项二次拟合方程，再对响应面进行分析，可得响应值与各因子之间、因子与因子之间的相互关系，经过综合分析得出整个响应区域中响应值的最优值和影响因子含量的最佳组合。
①中心组合设计 6个显著影响因子D生物素(a)、L谷氨酸(b)、L缬氨酸(c)、L蛋氨酸(d)、L亮氨酸(e)和L酪氨酸(f)的浓度范围分别为30～100μg/L，90～190、30～130、20～120、40～1400和20～120mg/L。
设计方案和实验结果如表2所示，“-1”、“0”和“1”分别表示对应影响因子的最低浓度值、中间浓度值和最高浓度值。
软件分析得知，模型的拟合度(RSquared)，;校正决定系数(Adj RSquared)，%响应值(Titres)的变化,%不能用此模型来解释;模型的信噪比(Adeq Precision)，一般来说，模型的信噪比大于4就是较好的模型，进一步说明本模型设计是非常成功的。
②分析与优化 利用软件对生物效价预测值与显著影响交互项ab、ac、ad、ae、af、bc、cd、ce、ef之间的响应面图进行分析，得知上述交互作用项对生物效价的影响很大，在低浓度范围内，生物素浓度越低，生物效价的预测值越大;谷氨酸和缬氨酸之间、缬氨酸和亮氨酸之间以及亮氨酸和酪氨酸之间对生物效价的影响具有显著的正协同效应;缬氨酸和蛋氨酸对生物效价的影响存在拮抗效应，缬氨酸浓度较高和蛋氨酸浓度较低时，预测效价值较高。
对上述结果进行分析可知，低浓度的生物素对林可链霉菌的糖代谢、脂代谢和氨基酸代谢有促进作用;林可链霉菌对谷氨酸的需求量较高，可能是因为其参与较多的脱氨基和转氨基反应，生成了较多的α酮戊二酸等中间产物，一方面对三羧酸循环有强化作用，另一方面可为林可霉素的生成提供丰富的中间产物;缬氨酸和亮氨酸为分支氨基酸，它们脱氨基可生成支链脂肪酸，对林可链霉菌的生长有刺激作用;酪氨酸为林可霉素A合成的前体，补入适量的前体，可提高林可霉素A的合成速率和产量。
蛋氨酸为去甲基林可胺转甲基反应的甲基供体，它对林可霉素的合成速率可能具有较大的限制作用，而缬氨酸对林可霉素的生长具有刺激作用，菌体生长与林可霉素的合成在某种程度上说是一种相互制约的关系，这样就表现为蛋氨酸和缬氨酸之间的拮抗作用，而且林可霉素的合成要求有较高的菌浓，故培养基中应适当增加缬氨酸的浓度，相应适当降低蛋氨酸的浓度。
3 、验证实验
为了检验优化结果的有效性，在摇瓶中同步进行了优化组、对照组I(培养基中无生物素和氨基酸)和对照组II(培养基中按原配方加入6个显著影响因子)的验证实验，结果如表4所示。
三、结论
在化学合成培养基中用林可链霉菌发酵生产林可霉素，通过两水平因子设计实验对生物素和氨基酸组分进行筛选，得出六个对生物效价有显著影响的因子：D生物素、L谷氨酸、L缬氨酸、L蛋氨酸、L亮氨酸和L酪氨酸;通过响应面设计实验和软件的优化分析得到上述六个显著影响因子的含量分别为30μg/、83、29、，最终发酵液的最大预测效价为2275μg/ml。
采用优化配方进行摇瓶实验，最终发酵液的生物效价为2116μg/ml;而采用对照I和II配方进行摇瓶实验，最终发酵液的生物效价分别为893和1481μg/ml，%%。
篇6：植物提取生产线建设项目技术总结报告
一、项目的基本情况
氢溴酸**是由**经合成而得，主要用于治疗阿尔茨海默氏症、小儿麻痹后遗症、重症肌无力等疾病，被收入美国药典，欧盟也颁发药典适应证书，我国已列入国家基本医疗保险药品。
目前氢溴酸**来源于合成和植物提取，合成成本高，植物提取依然有利可图。植物提取原料是**属植物的鳞茎。
我公司长期以来致力于**属植物的种植、繁育和提取研究，不仅摸清了**书属植物的种类及在世界和中国的分布状况，还先后完成了近30项科研项目。我公司依托多项科研成果，根据国家产业政策和《**市“十一五”科学与技术发展规划》，以“循环经济”思想为指导，按照生物产业、生物制药和生态能源实施原则，走**属植物产业化链式开发的道路。本项目是此产业化链式开发的`重要一环。
二、项目实施主要内容：
本项目主要研究内容为**的提取技术、纯化技术及氢溴酸**的合成技术、检测技术研究，并在此基础上建成年产50kg**的提取中试生产线一条。
三、项目完成情况
(一)技术研究情况总结
1、提取技术研究总结
**目前的提取技术有酸水提取法、醇提法、碱化有机溶剂提取法等。酸水提取法以酸水为溶媒从**鲜片里面浸提**，虽然酸水成本低廉，但由于所用酸水数量多、有腐蚀性，对设备和后续浓...
篇7：甘草不同组织的提取技术
甘草不同组织的提取技术
从甘草不同组织中提取高质量的RNA,为进一步合成双链cDNA,:采用几种常用方法(高盐溶液法、LiCl沉淀法、CTAB法和SDS法)提取甘草不同组织的RNA,并以1%琼脂糖凝胶电泳和A260/A280,A260/A230的':LiCl沉淀法对于甘草不同组织中的RNA具有更好的提取效果,条带清晰,完整性较好,且A260/A280和A260/,,:采用LiCl沉淀法提取甘草不同组织中的RNA具有更好的效果,适于从富含多糖的植物组织中提取RNA.