乳铁蛋白水解物中抗菌肽的分离与纯化综述报告.docx

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引言
乳铁蛋白水解物是从牛乳中提取的一种复合蛋白质，其成分包括乳蛋白、乳清蛋白、乳铁蛋白等。乳铁蛋白中含有丰富的抗菌肽，这些抗菌肽对各种病原微生物都具有广谱杀菌作用，包括细菌、真菌、病毒等。因此，乳铁蛋白水解物成为了一种具有广阔市场前景的天然抗菌肽来源。本文将对乳铁蛋白水解物中抗菌肽的分离与纯化进行综述，为相关研究提供参考。
一、抗菌肽的性质和来源
抗菌肽是一种具有较低分子量的蛋白质，通常由20~50个氨基酸组成，具有广谱抑菌作用。抗菌肽在物种间具有高度保守性，可以从各种生物体中提取得到，包括人类、动物、植物等。其中，动物和人类的粘液、血液、肠道等组织和分泌物中含有较多的抗菌肽。
乳铁蛋白是一种天然存在于牛乳中的复合蛋白质，占据乳酪中的9%~12%。乳铁蛋白含有175个氨基酸残基，其中有两个互补的半胱氨酸残基可以形成独特的亚硫酸盐桥，从而使蛋白质分子更加稳定。乳铁蛋白具有延迟铁的吸收、调整肠道菌群平衡、增强免疫功能等功能。同时，乳铁蛋白还含有多肽链和肽，其中就包括多种抗菌肽。
二、抗菌肽的分离与纯化方法
（IEC）
离子交换色谱法是将分子带电性质的蛋白质按照分子电荷的大小不同，在固相材料上进行分离。IEC适用于分离带正电荷或负电荷的多肽或蛋白质。与其他色谱法相比，IEC在分离精度方面占有优势。
射流电喷雾（EliSpray）与质谱联用技术可以用于多肽或蛋白质的质量检测，定量和定性等，具有灵敏度高、精确度高以及检测时间短等显著优点。
借助IEC方法，已经成功分离并鉴定了乳铁蛋白水解物中的多肽和肽类抗菌肽，其中包括hepcidin、lactoferricin、lactoferrampin等抗菌肽。
（GFC）
凝胶层析法是将蛋白质按照分子量大小分离的一种方法。通过在凝胶层析柱中进行分离，可将不同分子量的蛋白质分离开来。此方法分离精度高，但柱效不高，在分离前需经过较为复杂的预处理。
利用GFC方法，研究人员从乳铁蛋白中成功分离出了一个新型的抗菌肽，命名为LFampin 268-284，该抗菌肽对革兰氏阳性菌具有很强的抑菌作用。
（RP-HPLC）
反相高效液相色谱法可以从含有大量杂质样品中快速分离出目标成分。该方法能够快速、灵敏地分离出小分子化合物、多肽和蛋白质等化合物。在抗菌肽纯化领域，RP-HPLC是常用的一种方法。
利用RP-HPLC方法，研究人员成功地从乳铁蛋白水解物中分离出了多种抗菌肽，如lactoferricin B和lactoferricin Y。其中，lactoferricin Y表现出对革兰氏阴性菌的强烈抑制作用。
三、抗菌肽的应用

抗菌肽在食品保鲜方面具有应用潜力。其中，lactoferricin的抑菌活性特别强，对革兰氏阳性菌和阴性菌以及酵母菌均表现出很好的抑制作用。因此，这种抗菌肽可以被应用于巧克力、酸奶、肉类和奶酪制品等食品的保鲜。

由于抗菌肽对各种病原菌都具有抑制作用，因此在医药领域中具有广泛的应用前景。目前，已有不少抗菌肽被用于治疗各类感染性疾病，如肺炎、盆腔炎和皮肤感染等。
结论
乳铁蛋白水解物中含有多种抗菌肽，其中乳铁蛋白水解物包含的抗菌肽更是具有广谱作用。通过离子交换色谱法、凝胶层析法和反相高效液相色谱法等多种方法，已经成功地分离了多种抗菌肽，并为抗菌肽的应用提供了可能。此外，抗菌肽在食品保鲜和医药领域等方面也具有广阔的应用前景。