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分子生物学讲座(3)省公开课一等奖全国示范课微课金奖ppt课件.pptx


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“θ”型复制
滚环复制
D环复制
不需要RNA引物复制
第1页
环状DNA能够采取双向同时进行,形成θ样中间物,故又称“θ”型复制,最终两个复制方向相遇而终止复制。
有些环状DNA采取另个一个方式,即滚环复制。比如许多病毒DNA复制、F因子在接合(conufgation)转移时其DNA复制。
第2页
第3页
在研究真核细胞内线粒体DNA复制时,发觉了DNAD环复制。复制过程分为四个阶段。D环复制特点是两条链复制不是同时。
第4页
腺病毒DNA,为线状。
从一端开始复制,而且对两端无选择性,各 占50%机率。
全部腺病毒DNA生长链上都有一个特异蛋白质分子。和dCMP结合成蛋白-dCMP复合物。
DNA聚合酶以此末端蛋白-dCMP复合物为引物连续合成
不需要RNA引物DNA复制
第5页
第二节 反转录作用(reverse transcription)
1960年Temin等在致癌RNA病毒中发觉了一个特殊DNA聚合酶,该酶以RNA为模板,依据碱基配对标准,按照RNA核苷酸次序(其中U与A配对)合成DNA。这一过程与普通遗传信息流转录方向相反,故称为反转录,催化此过程DNA聚合酶叫做反转录酶(reverse transcriptase)。
以后发觉反转录酶不但普遍存在于RNA病毒中,哺乳动物胚胎细胞和正在分裂淋巴细胞中也有反转录酶。
第6页
反转录酶作用是以dNTP为底物,以RNA为模板,按5′→3′方向,合成一条与RNA模板互补DNA单链,这条DNA单链叫做互补DNA(complementary DNA, cDNA),它与RNA模板形成RNA-DNA杂交分子。随即又在反转录酶(RNase H活性,可降解RNA)或者碱作用下,水解掉RNA链,再以cDNA为模板合成第二条DNA链,完成由RNA指导DNA合成过程。
第7页
第8页
反转录过程
(Klenow fragment)
DNA polymerase I .
blunt-ended DNA
第9页
反转录过程
第10页

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