玉米纹枯病生防细菌的分离鉴定及应用.docx

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玉米纹枯病（Gibberella zeae）是一种极具破坏力的病害，它会引起玉米穗部的感染，导致穗部腐烂、收获量下降甚至无法收获。其病原细菌Gibberella zeae，对玉米的危害性非常严重。由于其喜欢温湿条件和轻微的机械损伤，因此容易感染玉米。防治方法主要是通过病害生防细菌的分离鉴定和应用，从而实现控制病害的目的。
一、玉米纹枯病的发生和危害
玉米纹枯病是一种由真菌Gibberella zeae引起的病害，该病会主要危害玉米的嫩穗部分，也就是玉米穗头部。感染后，穗头部分会发生橘黄色变化，并扩散到整个穗部位，并最终导致收获量大幅下降，严重时可能导致玉米无法收获。此外，因为Gibberella zeae可产生次生代谢产物，如DON等，这些化合物不仅会污染食品，还会对动物产生负面影响。
因此，对于玉米纹枯病应引起足够的重视。然而，由于这个危害性较强的病害的发生难以预测，因此寻找一种相对有效的防治方法变得尤为重要，而生防细菌的分离鉴定和应用即是其中之一。
二、生防细菌的作用
生防细菌是指在典型文化实验中对由植物病原微生物引起的坏疽和腐烂病产生抑制作用的微生物。生防细菌最早被应用于水稻手枪糖等作物对褐色烟青病的防治，并且随着应用的扩大，目前已经在玉米、大豆、棉花等多个作物上应用。生防细菌应用的原理主要是与它们的存在方式和作用方式有关，它们可以通过以下方式发挥作用：
（1）菌液可直接喷洒在作物上，对有害菌起到直接杀菌的作用。
（2）可进入植物体内，通过影响或抑制植物体内的病原微生物和调节植物生长，起到生物防治的作用。
三、玉米纹枯病生防细菌的分离鉴定
生防细菌的筛选和鉴定是生防病害的关键，必须针对性强，方法科学。分离结果必须是比较稳定，准确的，并且对玉米纹枯病有较好的防治作用才能起到实际的应用价值。
1、生防细菌的分离
生防细菌的分离以玉米找根为材料，先将玉米根洗净后，分别用灭火钳和手剪刀剪除草体和顶出，再将剩余根放入滴灌瓶内，注射100毫升滴灌液或用微量移液管直接滴加液体培养基中，摇晃20~24小时，待菌液吸泡后接种到琼脂平板上，接种体积取决于样品的含量。在玉米样品中分离出的生防细菌有Pseudomonas fluorescens、Bacillus thuringiensis、Bacillus mycoides、Bacillus cereus等。
2、生防细菌的鉴定
生防细菌的鉴定主要通过一系列的分离、筛选、鉴定、实验确认来完成，具体步骤为：
（1）菌液培养和筛选
生防细菌可以在富含营养和生长因子的液体培养基上生长，目前主要应用的是Luria-Bertani (LB)、查培培养基等。将生防细菌株接种于这些液体培养基中，适当条件下转动孵育培养8~12小时。通过观察生长情况进一步筛选生防细菌，优先选择生长健壮、产生孢子的细菌。
（2）生化试验及分子生物学检测
研究者可以通过一系列的生化试验，如碳水化合物发酵、酵素活性检测、蛋白质分析等，对分离出的生防细菌进行鉴定和确定相关基因序列信息。例如，菌株的identication和特异性检测可以通过PCR扩增细菌特异性杂交、探针杂交等实验手段完成。
四、纹枯病生防细菌的应用
纹枯病生防细菌的应用主要有四个方面：
（1）喷洒
生防细菌培养得到的菌液可以在盆栽和田间喷雾防治玉米纹枯病。
（2）根际处理
生防细菌可以与化肥或有机肥混合，并施于玉米的根际进行处理。
（3）种衣处理
将生防细菌与玉米的种子混合使用，通过种衣抗病效应进行防治。
（4）合作会
生防细菌的应用可以与其他防治方法一起使用，如化学防治、遗传评价等。
五、总结
玉米纹枯病对于玉米生产和安全极具威胁性，因此寻求一种低成本且有高效防治方法尤为重要。生防细菌的应用是一种非常实用的防治方式，先通过分离鉴定获得目标菌株，再通过实验确认效果，最后进行大面积使用。总之，加强对玉米纹枯病的防治研究和应用，可以有效地减缓其对玉米产量和质量的不良影响，从而提高玉米产业生产效益。