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第九单元 生物技术实践
专题二十三 传统发酵技术与微生物的应用
考点 1 传统发酵技术的应用
1.[2025 陕西渭南六校联考,15 分]答复以下有关泡菜制作的问题:
制作泡菜时,所用盐水需煮沸,其目的是 。为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水
中参加少量陈泡菜液,参加陈泡菜液的作用是 。
泡菜制作过程中,乳酸发酵的过程即乳酸菌进展 的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的 中。(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 、 和 等。
(4)从开头制作到泡菜品质最正确这段时间内,泡菜液渐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ,缘由是 。
2.[2025 河北九校联考,15 分]请答复以下利用微生物发酵制作食品的相关问题:
果酒制作离不开酵母菌,酵母菌是兼性厌氧型微生物,在 、呈 的发酵液中,酵母菌可以生长生殖,而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。
在变酸的酒的外表可以观看到一层白色菌膜,其形成缘由是 。当缺少糖源时,醋酸菌可将乙醇转变为 ,再转变为醋酸。
民间制作腐乳时,当豆腐上长出毛霉后,要对豆腐进展装瓶,制作后期要参加酒和卤汤,其中酒含量一般掌握在左右,假设酒精含量过高,会导致 。
工业化生产以上食品,需要对微生物进展纯化。不同微生物培育的温度和时间往往不同,可以每隔 24 小时统计一次菌落数目,选取 时的记录作为结果,这样可以防止因培育时间缺乏而遗漏菌落的数目。在肯定的培育条件下,依据微生物在固体培育基上形成菌落的 (请写出两种)等特征可以区分不同的菌落。
考点 2 微生物的培育与应用
3.[2025 安徽示范高中联考,15 分]大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌,其代谢产物能与染料伊红美蓝反响,使菌落呈黑色。其培育基配方如表所示。
成分 蛋白胨 乳糖 磷酸二氢钾含量 10 g 10 g 2 g
琼脂20~
30 g
蒸馏水 1 000 mL
2%的伊红水溶液
20 mL
%的美蓝水溶液
13 mL
答复以下问题:
该培育基中,蛋白胨为大肠杆菌供给的主要养分有 和维生素。
在接种大肠杆菌前,需先将灭菌后的空白培育基放在恒温箱中培育一段时间,观看是否有菌落生成,其目的是 。
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为了检测严峻污染的水体中大肠杆菌的数量,将水样适当稀释后,取样涂布在上述平板培育基中,应选择颜色为 的菌落进展计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推想样品中的活菌数,其原理是 。(4)将 1 mL 水样稀释 1 000 倍,在 3 个平板上用涂布法分别接入 mL 稀释液;经适当培育后,3 个平板上的菌落数分别为 39、38 和 37。据此可得出每升水样中的活菌数为 。
(5)除利用特定培育基选择鉴定某种细菌外,还可以依据 对细菌进展初步的鉴定和分类。
4.[2025 河北唐山模拟,15 分]在日常生活中,人们格外重视食品安全问题。当食品中的大肠杆菌数目超过某一限定值之后会对人体造成严峻危害,因此,大肠杆菌含量是检测食品卫生状况的重要指标。以下是能够检测大肠杆菌数量 的三种方法。答复以下问题:
平板计数法:培育大肠杆菌通常使用 (填“LB”或“查氏”)培育基,其成分有酵母膏、蛋白胨、NaCl、
H2O、X,其中为大肠杆菌供给氮源的是 ,X 代表 。
滤膜法:将体积的水过滤后,将滤膜放在 培育基上培育。在该培育基上,大肠杆菌的菌落呈现色。利用该方法所统计的样品中的菌落数往往较实际值低的缘由是 。
多管发酵法:依据大肠杆菌能发酵乳糖产酸产气的特征,检测水样中的大肠杆菌。该方法使用的是乳糖蛋白胨培育液,其乳糖可为大肠杆菌供给 和 。
1.[2025 四川绵阳一诊,15 分]米酒酒精含量低,口味香甜醇美,深受人们的宠爱。家庭制作米酒时,一般先把糯米淘净,蒸熟,摊开冷透;然后再将酒曲浸水活化,直到冒出鱼眼大小的气泡;最终将冷却的熟米与活化的酒曲混合后再进展发酵。答复以下问题:
酒曲中的微生物主要是酵母菌,酵母菌的呼吸类型是 。酵母菌进展酒精发酵的反响式是 。
酒曲浸水后会被活化的缘由是酒曲中的微生物 。
将冷却的熟米与活化的酒曲混合后,装入一个干净的泡菜坛里进展发酵, (填操作)可保证无氧环境。
室内温度在 10 ℃左右时,可用棉絮将泡菜坛包裹起来,由于酵母菌进展酒精发酵的最适温度是 。米酒酒精度数一般不会很高,缘由是 。
2.[2025 广东广州阶段训练,15 分]掌握饮用水中的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施,答复以下与检验饮用水中的大肠杆菌有关的问题。
检验大肠杆菌的含量时,有时需要将水样进展一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培育基的外表进展培育,记录菌落数量,这种方法称为 。如下图为四种菌落分布图,在这些菌落分布中,一般不能由该方法得到的是 (填字母)。
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用上述方法检验大肠杆菌的含量时 (填“需要”或“不需要”)设置空白比照,缘由是 。(3)在统计菌落数目时,一般选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因 而遗漏菌落的数目。假设分别取 mL 已稀释 103 倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培育基的外表进展培育,培育基中大肠杆菌的菌落数分别为 55、56、57,则每升原水样中大肠杆菌数为 。
(4)统计的菌落数往往比接种水样中活菌的实际数目 (填“高”或“低”),缘由是 。3.[2025 长春质量监测,15 分]丰富且不行食用的木质纤维素被作为潜在原料用于生产乙醇,这首先需要获得高产纤维素酶的纤维素分解菌。如图是从腐殖土中筛选纤维素分解菌的流程,请分析答复:
腐殖土溶液→选择培育→①→将样品涂布到鉴别培育基上→选择产生透亮圈的菌落(1)图中步骤①为 ,鉴别培育基中应参加 。
(2)纤维素分解菌可产生纤维素酶,纤维素酶至少包括 三种组分,为进一步确定得到的是 纤维素分解菌,还需要进展 。纤维素酶活性的测定方法为 。(3)利用纤维素生产乙醇时,发酵罐中还需要接种 菌,发酵时应掌握温度为 ℃, 通气状况
为 。
4.[2025 陕西局部学校摸底,15 分]争论觉察土壤中的一种极毛杆菌,能够以 3,4-二甲苯酚为碳源,对土壤残留农药中的该成分有较好的降解作用。请答复:
某兴趣小组欲从土壤中筛选出能高效降解3,4-二甲苯酚的极毛杆菌菌株,分别极毛杆菌的土样应来自土壤,在配制筛选极毛杆菌的培育基时对其碳源的选择应 ,在试验室一般承受
法对配制的培育基进展灭菌。
分别纯化极毛杆菌时,首先需要用 对土壤浸出液进展梯度稀释的理由是 , 该分别纯化方法为 。假设承受平板划线法分别土样中的极毛杆菌,在进展其次次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开头划线,这样做的目的是 。
为了统计土壤浸出液中极毛杆菌的总数,他们选用稀释倍数分别为 104、105、106 的稀释液进展涂布,每种稀释液都设置了 3 个培育皿。为了保证明验的准确性,还应设置的一组比照试验是 。5.[2025 安徽合肥检测,15 分]争论显示溶藻细菌对掌握水华有格外重要的作用,争论人员从池塘中采集水样,参加无菌锥形瓶中,用摇床在 37 ℃下振荡培育 20 min,使其均匀分散成菌悬液,再通过分别、纯化、鉴定得到了溶藻细菌。请答复以下问题:
分别前需用无菌移液管从菌悬液中吸取菌液1 mL,进展梯度稀释。梯度稀释的目的是 。再取每个稀释度下的菌悬液 mL 用 法接种到细菌固体培育基上,每个梯度做三组试验,在 37 ℃恒温培育箱中培育,直至长出菌落。
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假设将 1 mL 菌悬液稀释 106倍,再取 mL 接种到细菌固体培育基上,分别形成了 263、278、269 个菌落,则每毫升原菌悬液中有细菌 个,用该方法所得结果一般比实际值偏低的缘由是 。(3)水华为蓝藻爆发所致。争论人员尝试利用溶藻细菌限制蓝藻数量,相关试验如下图(图中①~⑥表示试验步骤)。试验组做三个重复试验。
为完善试验设计方案,应增设比照组,可实行的做法是 。6.[2025 湖北一般高中联考,11 分]红酸汤是一种很有特色的火锅底料,制作流程如下图。请分析答复以下问题:
密封发酵时,常在坛中参加成品红酸汤,其目的是 。乳酸发酵的过程即乳酸菌进展的过程。
装坛时坛口留有一点空间而不装满的目的是 ,红酸汤制作过程的初期会有气泡冒出,但气泡的产生会渐渐停顿,试分析缘由: 。
红酸汤有利于人体肠道内多种益生菌的生长。消化道炎症往往与益生菌群削减、有害菌群增多有关。争论说明, 治疗消化道慢性炎症时,不宜滥用抗生素,滥用抗生素的害处有 。7.[2025 安徽合肥调研,14 分]某同学在做微生物试验时,不留神把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起,得到混合菌。请你完善分别得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的试验步骤,并答复有关问题。
主要步骤
①制备两种培育基:一种是 培育基,另一种是加青霉素的培育基。分别分成两份,依次标上 A、A”
和 B、B”,备用。
②分别向A、B 培育基中接种
③接种后,放在恒温箱中培育 3~4 天。
。
④分别从A、B 培育基的菌落中挑取生长良好的菌种,接种到 A”、B”培育基中。
⑤接种后,把 A”、B”培育基放入恒温箱中培育 3~4 天。
(2)答复以下问题
在步骤①中,为保证无杂菌污染,试验中应承受的主要措施有:对培育基进展
、将
在酒精灯火焰上
灭菌、接种过程在 四周进展。在步骤④中,A 培育基上生长良好的菌种是
。④⑤两个步骤的目的是
获得
。
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1.[乳酪制作,社会责任][15 分]如图表示乳酪(有酸甜味的一种食品)的生产流程,牛奶中含有乳糖,乳糖可被水解为葡萄糖和半乳糖。请答复以下有关问题:
颖牛奶 (Ⅰ)巴斯德消毒法 (Ⅱ)温度恢复至培育温度 (Ⅲ)发酵(参加两种细菌) (Ⅳ)在 37 ℃下培育包装和储存
注:巴斯德消毒法是将原料加热至68~70 ℃,并保持此温度 30 min 以后急速冷却到 4~5 ℃;颖牛奶没有甜味。(1)生产流程中进展步骤Ⅱ的目的是 ,步骤Ⅲ中参加的两种细菌中包括用 (填“液体” 或“固体”)培育基扩大化培育后获得的乳酸菌,在培育过程中必需掌握的环境因素有 (至少答复两个)。
在发酵过程中,颖牛奶中的 (填具体物质名称)被分解导致乳酪有甜味,乳酸菌进而分解 产生乳酸,使乳酪有酸味。
在生产乳酪的过程中参加颖草莓碎片就能制作出草莓乳酪,草莓中含有丰富的糖,在 (填罗马数字)阶段后参加草莓碎片最适宜,缘由是 。
2.[情境,社会责任][11 分]约 亿年前二叠纪末期,很多物种由于无法准时适应当时气候变化而灭亡。但细菌 X 得到快速大量生殖,细菌X 快速大量生殖的缘由包括:细菌 X 能利用海洋沉积层的二氧化碳和氢气合成并释放甲烷, 显著转变气候和海洋化学成分;火山喷发导致镍元素快速增多,这种至关重要的养分物质帮助微生物(细菌 X)生殖。镍污染是由镍及其化合物所引起的环境污染,镍对环境是一种潜在的危害物。请答复:
X 细菌的代谢类型最可能是 ,该细菌的遗传信息主要存在于 (填细胞构造)中。
鉴于细菌X 在高浓度镍污染废水的生物处理中能发挥很大作用,某同学欲筛选高效缓解镍污染的细菌X,他应从采集土样。
筛选细菌X 的培育基从功能上讲属于 培育基,培育基中 (填“需要”或“不需要”)添加有机碳源, (填“需要”或“不需要”)添加含镍化合物。
在纯化细菌X 时,为了得到单菌落,常承受的接种方法有 。为了进展计数,该同学吸取菌液 1 mL 稀释 1 000 倍,然后吸取稀释后的菌液 mL,接种于固体培育基上培育。一段时间后观看菌落并
计数,试验重复三次,得到 3 个培育皿中菌落数分别为 70、80、90,则该菌液的浓度是 个细菌/mL。
答 案
专题二十三 传统发酵技术与微生物的应用
1.(除标明外,每空 2 分)(1)杀灭杂菌 增加乳酸菌数量 (2)无氧呼吸 细胞质 (3)温度(1 分) 腌制时间(1 分) 食盐用量(1 分)(三空挨次可颠倒) (4)乳酸菌数量增多,杂菌数量削减 乳酸菌比杂菌更耐酸
2.(除标明外,每空 2 分)(1)缺氧(1 分) 酸性(1 分) (2)酒外表氧气浓度较大,醋酸菌会大量生殖形成菌膜(3 分) 乙醛 (3)12% 腐乳成熟时间延长 (4)菌落数相对稳定 外形、大小、隆起程度、颜色
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【解析】 (1)在缺氧、呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长生殖,而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。(2)由于酒的表层氧气浓度较大,醋酸菌会大量生殖形成菌膜,所以在变酸的酒的外表可以观看到一层白 色菌膜。当氧气、糖源都充分时,醋酸菌可以将糖分解为醋酸;当氧气充分、缺少糖源时,醋酸菌可将乙醇转变为乙 醛,再将乙醛转变为醋酸。(3)制作腐乳后期要参加酒和卤汤,其中酒的含量一般掌握在 12%左右,加酒可以抑制微生物的生长,同时使腐乳具有独特的香味。假设酒精含量过高,会使腐乳成熟的时间延长。(4)不同微生物所需培育温度 和时间往往不同,可以每隔24 小时统计一次菌落数目,为防止因培育时间缺乏而遗漏菌落的数目,应中选取菌落数相对稳定时的记录作为结果。在肯定的培育条件下,依据微生物在固体培育基上形成菌落的外形、大小、颜色等特征 可以区分不同的菌落。
3.(除标明外,每空 2 分)(1)碳源、氮源 (2)检测培育基制备是否合格(或灭菌是否彻底,3 分) (3)黑色 当样品的稀释度足够高时,培育基外表生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌(3 分) (4)×108(3 分) (5)菌落的外形、大小等菌落特征
【解析】 (1)蛋白胨可为大肠杆菌供给碳源、氮源和维生素。(2)为了检测培育基制备是否合格(或灭菌是否彻底), 在接种大肠杆菌前,需先将灭菌后的空白培育基放在恒温箱中培育一段时间,观看是否有菌落生成。(3)大肠杆菌的 代谢产物能与培育基中的染料伊红美蓝反响,使菌落呈黑色,因此,为了检测严峻污染水体中大肠杆菌的数量,将水 样适当稀释后,取样涂布在题述平板培育基中,应选择颜色为黑色的菌落进展计数。当样品的稀释度足够高时,培育 基外表生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌,因此可通过统计平板上的菌落数来推想样品中的活菌数。(4)将 1 mL 水样稀释 1 000 倍,在 3 个平板上用涂布法分别接入 mL 稀释液;经适当培育后,3 个平板上的菌落数分别为 39、38 和 37,据此可得出每升水样中的活菌数为(39+38+37)÷3÷×1 000×1 000=×108。(5)一般来说,在肯定的培育条件下,同种微生物表现出稳定的菌落特征,因此可以依据菌落的外形、大小等菌落特征对细菌进 行初步的鉴定和分类。
4.(除标明外,每空 2 分)(1)LB(1 分) 酵母膏、蛋白胨 琼脂 (2)伊红美蓝 黑 当两个或多个细胞连在一起时, 平板上观看到的只是一个菌落(答案合理即可) (3)碳源 能量
【解析】 (1)培育大肠杆菌通常使用LB 培育基,该培育基中的酵母膏和蛋白胨可为大肠杆菌供给氮源。用平板计数法检测大肠杆菌数量时,所用的培育基应为固体培育基,故该LB 培育基中还应含有琼脂。(2)在伊红美蓝培育基上, 大肠杆菌的菌落呈黑色,统计黑色菌落的数目,就可估算出单位体积样品中大肠杆菌的数目。但由于两个或多个大肠杆菌细胞连在一起时,平板上只能观看到一个菌落,故用滤膜法得到的统计值往往要比实际值低。(3)多管发酵法是 依据大肠杆菌能发酵乳糖产酸产气的特征,检测水样中大肠杆菌的方法。乳糖可为大肠杆菌供给碳源和能量。
1.(1)兼性厌氧型(2 分) C H O →2C H OH+2CO (3 分) (2)得到更多的水分,陈代谢增加(3 分) (3)向坛盖边缘的
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水槽中注满水(2 分) (4)18~25 ℃(2 分) 酵母菌发酵过程中产生的酒精对酵母菌细胞有毒害作用(3 分)
【解析】 (1)酵母菌的呼吸类型为兼性厌氧型。在无氧条件下,酵母菌能进展酒精发酵,反响式为 C H O →
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2C H OH+2CO 。(2)酒曲浸水后会被活化的缘由是酒曲中的微生物获得了更多的水分,陈代谢增加。(3)可以向坛盖
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边缘的水槽中注满水,以保证酵母菌发酵的无氧环境。(4)酵母菌进展酒精发酵的最适温度为 18~25 ℃。酵母菌发酵过程中产生的酒精对酵母菌细胞有毒害作用,因此,米酒酒精度数一般不会很高。
2.(除标明外,每空2 分)(1)稀释涂布平板法 D (2)需要 需要检测培育基是否被污染(答案合理即可) (3)培育
时间缺乏(答案合理即可) ×108 (4)低(1 分) 当两个或多个细胞连在一起时,平板上观看到的只是一个菌落
【解析】 (1)分析题干信息可知,对微生物计数时,承受的接种方法是稀释涂布平板法。得到图D 所示结果的接种方法是平板划线法,其他三个图都是利用稀释涂布平板法接种得到的结果。(2)对微生物进展培育时,需要设置一个 不接种细菌的空白培育基,可以检测培育基是否被污染。(3)在统计菌落数目时,一般选择菌落数目稳定时的记录作 为结果,从而可以避开因培育时间缺乏等而遗漏菌落数目。三个培育基中大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57,其平均值是 56,每升原水样中的大肠杆菌数量为 56÷×103×103= ×108。(4)当两个或多个细胞连在一起时,平板上观看到的只是一个菌落,因此统计结果往往比实际值低。
3.(除标明外,每空 2 分)(1)梯度稀释 刚果红(1 分) (2)C 酶、C 酶、葡萄糖苷酶 发酵产纤维素酶的试验 测定
1 X
纤维素完全分解所需时间(测定单位时间产生葡萄糖的量或对葡萄糖的产生量进展定量测定,答出纤维素分解状况、葡萄糖产生量给 1 分) (3)酵母 18~25 先通气后密封
【解析】 (1)由于选择培育之后菌群的密度较大,需要进展梯度稀释之后再将样品涂布到鉴别培育基上,才能形成
单个菌落,便于鉴别。刚果红可以与纤维素形成红色复合物,因此鉴别培育基中应参加刚果红。(2)纤维素酶至少包 括 C 酶、C 酶和葡萄糖苷酶三种组分,为进一步确定得到的是纤维素分解菌,还需要进展发酵产纤维素酶的试验。可
1 X
以通过测定纤维素完全分解所需的时间测定纤维素酶活性的大小。(3)酵母菌通过无氧呼吸可将葡萄糖转化为乙醇, 一般状况下,要先通气后密封,使酵母菌数量到达肯定程度后再进展酒精发酵。发酵温度应掌握在18~25 ℃。
4.(除标明外,每空 2 分)(1)3,4-二甲苯酚含量高的 以 3,4-二甲苯酚为唯一碳源 高压蒸汽灭菌 (2)无菌水(1 分) 土壤浸出液中菌的浓度高,直接培育很难分别得到单菌落,同时用无菌水可以防止杂菌污染 稀释涂布平板法 将 聚拢的菌种逐步稀释以便获得单个菌落 (3)未接种的空白培育基
【解析】 (1)筛选目的菌时,应从富含该菌的土壤中采集土样,极毛杆菌对土壤残留农药中的 3,4-二甲苯酚有较好的降解作用,因此应从该物质含量高的土壤取样。筛选某种微生物的选择培育基应有利于该种微生物生存,而不利于其他微生物生存,极毛杆菌能够以 3,4-二甲苯酚为碳源,因此配制筛选极毛杆菌的培育基时应以3,4-二甲苯酚为唯一碳源,试验室对培育基进展灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。(2)分别纯化极毛杆菌时,首先需要用无菌水对土 壤浸出液进展梯度稀释,这样既可避开杂菌污染,又可将极毛杆菌分散开,以便在培育基外表形成单个菌落。利用系 列梯度稀释的方法对微生物进展分别纯化属于稀释涂布平板法。利用平板划线法分别该菌时,在进展其次次及以后 的划线时,总是从上一次划线的末端开头划线,这样可以将聚拢的菌种逐步稀释以便得到单个菌落。(3)通过稀释涂 布平板法计数该菌时,需要设置一组空白比照组,即未接种的空白培育基。
5.(每空 3 分)(1)使水样中的各种微生物分散成单个细胞 (稀释)涂布平板 (2)×109 当两个或多个细胞连在
一起时,平板上观看到的只是一个菌落 (3)在比照组的每个培育皿中,各滴加等量的、不含溶藻细菌的培育液
【解析】 (1)梯度稀释的目的是使水样中的各种微生物分散成单个细胞,以便在固体培育基外表形成单个菌落。对微生物进展分别并计数通常承受稀释涂布平板法进展接种。(2)每毫升原菌悬液中有细菌(263+278+269)÷3×106÷
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=×109(个),由于当两个或多个细胞连在一起时,平板上观看到的只是一个菌落,故用稀释涂布平板法所得的 结果一般比实际值偏低。(3)为了排解培育液对蓝藻的影响,应当在比照组每个培育皿中各滴加等量的、不含溶藻细菌的培育液。
6.(除标明外,每空2 分)(1)增加乳酸菌含量 无氧呼吸 (2)防止西红柿发酵后发酵液外溢 刚入坛内,西红柿外表
的杂菌(酵母菌等)呼吸产生 CO ,随着乳酸积存抑制了杂菌的生长,乳酸菌产生乳酸的过程不产生 CO (合理即可,3 分)
2 2
(3)滥用抗生素会杀死肠道内多种益生菌、抗生素对有害菌产生选择作用(合理即可)
【解析】 (1)成品红酸汤中乳酸菌的含量比较高,在坛中参加成品红酸汤的目的是增加乳酸菌的含量,从而缩短发酵时间。乳酸发酵是乳酸菌进展无氧呼吸的过程。(2)在发酵过程中,由于细胞呼吸会产生热量,同时坛中存在某些 发酵过程中能产生CO 的杂菌,上述两种状况都可能导致发酵液外溢,所以装坛时需在坛口留一点空间。装坛发酵的
2
初期,西红柿外表的某些杂菌呼吸会产生CO ,所以发酵液中有气泡冒出,随着发酵时间的延长,乳酸菌发酵产生的乳
2
酸增多,抑制了杂菌的生长,而乳酸菌发酵过程中不产生气体,所以气泡的产生会渐渐停顿。(3)滥用抗生素会杀死肠道内多种益生菌,同时抗生素对有害细菌产生选择作用,使具有抗药性的有害细菌的基因频率增加,抗生素失去效 用。
7.(每空2 分)(1)①无氮 ②混合菌 (2)高压蒸汽灭菌 接种环 酒精灯火焰 圆褐固氮菌 纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌
【解析】 (1)圆褐固氮菌是一种细菌,具有固氮力量,能利用空气中的氮气作为氮源,酵母菌是真菌,不具有固氮力量;青霉素能杀死细菌,但对真菌没有作用。制备的两种培育基,一种是无氮培育基(在这种培育基中圆褐固氮菌能生长,酵母菌不能生长),另一种是加青霉素的培育基(在这种培育基中酵母菌能生长,圆褐固氮菌不能生长)。利用这两种选择培育基即可将两种微生物分别开。步骤②为分别向A、B 培育基中接种圆褐固氮菌和酵母菌的混合菌。(2)试验中,常对培育基进展高压蒸汽灭菌,将接种工具(接种环)在酒精灯火焰上进展灼烧灭菌,接种过程应在酒精灯火焰 四周进展(以防止环境中微生物的污染)。A 培育基是无氮培育基,圆褐固氮菌可在其上正常生长。④⑤两个步骤的目的是获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。
1.(除标明外,每空 2 分)(1)为乳酸菌发酵供给适宜的温度环境 液体 无氧、酸性条件等 (2)乳糖 葡萄糖 (3) Ⅳ 避开草莓内的糖在发酵过程中被分解,以保存草莓的风味(3 分)
2.(除标明外,每空 1 分)(1)自养厌氧 拟核 (2)镍污染严峻的土地上(2 分) (3)选择 不需要 需要 (4)平板划线法和稀释涂布平板法(2 分) 400 000(2 分)
【解析】 (1)由题干信息“细菌X 能利用海洋沉积层的二氧化碳和氢气合成并释放甲烷,显著转变气候和海洋化学成分;火山喷发导致镍元素快速增多,这种至关重要的养分物质帮助微生物(细菌 X)生殖”可知,细菌 X 的代谢类型是自养厌氧型。细菌 X 是原核生物,其遗传信息主要存在于拟核。(2)由于镍是细菌 X 至关重要的养分物质,帮助细菌X 生殖。因此,欲筛选高效缓解镍污染的细菌X,应从镍污染严峻的土地采集土样。(3)由于细菌 X 能利用海洋沉积层的二氧化碳和氢气合成并释放甲烷,所以在选择培育基中不需要添加有机碳源;由于镍是细菌 X 至关重要的养分物质,
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帮助细菌X 生殖,所以筛选细菌X 的培育基需要添加含镍化合物。(4)纯化菌种时,为了得到单菌落,常承受的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。该菌液的浓度为(70+80+90)÷3×1 000÷=400 000(个细菌/mL)。
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