实验九和十微生物的生理生化反应省公开课一等奖全国示范课微课金奖PPT课件.pptx

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糖发酵试验
吲哚试验
产硫化氢试验
vp试验 甲基红试验 淀粉水解试验
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一、目标要求
；
。
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二、基本原理
因为各种微生物新陈代谢类型不一样，所以，对各种物质利用后所产生代谢产物也不一样，我们能够用化学反应来测定微生物代谢产物，这种反应称为生化反应。生化反应惯用来判别在形态或其它方面不易区分微生物，比如：肠道细菌中，大肠杆菌和伤寒杆菌，二者在形态上不易区分，但前者能发酵乳糖，后者不能。所以能够从它们能否发酵乳糖来区分它们，所以微生物生化反应是微生物分类判定主要依据之一。
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三、材料
菌种：大肠杆菌；枯草杆菌；变形杆菌；自己分离大肠杆菌。
培养基：糖发酵培养基（葡萄糖）；H2S试验用培养基；蛋白胨水培养基；葡萄糖蛋白胨水培养基；淀粉培养基。
试剂：吲哚试剂；碘液；甲基红试剂；V·P试剂。
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糖发酵试验是惯用生化反应，在肠道细菌判定上尤为主要，绝大多数细菌都能利用糖类作为能源及碳源，不过细菌分解糖类能力上有相当大差异，一些菌能使一些单糖或双糖分解，并产酸（乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（甲烷、氢、二氧化碳），或者只产酸而不产生气体。酸和气体产生是否，能够由培养后试管指示剂颜色改变和小套管内气泡有没有来判定。当发酵产酸时，指示剂溴甲酚紫由紫色（）变为黄色（）。其步骤以下：
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（1）取盛有葡萄糖发酵培养基试管四支（内装有小套管），一支接种大肠杆菌，第二支接自己分离大肠杆菌，第三支接枯草杆菌，第四支不接种，作空白对照。在各试管上标明菌名和组别，置37℃培养24小时。
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（2）观察结果：经培养后，指示剂呈黄色者表示为酸性，同时观察小套管中有没有气泡产生。
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2．吲哚试验
一些细菌能分解蛋白胨中色氨酸而生成吲哚。吲哚与对二甲基氨苯甲醛结合，形成玫瑰吲哚，此为红色化合物，其反应改变以下：
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（1）取蛋白胨水培养基试管四支，分别接种大肠杆菌，自己分离大肠杆菌，枯草杆菌，留一支作空白对照，并在试管上注明菌名和组别，置37℃培养48小时。
（2）培养后取出，在培养液中先加入乙醚约1毫升（使呈显著乙醚层），充分振荡，使吲哚溶于乙醚中，静置片刻，使乙醚层浮于培养基上面，这时再沿管壁慢慢加入吲哚试剂5~10滴，观察有没有红色出现。有红色环出现者为阳性，黄色者为阴性。
（注意：加入试剂后不可再摇动，不然被混合，红色不显著。）
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