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抗体检测技术与类风湿因子.ppt


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抗体检测技术
免疫酶技术
免疫荧光技术
凝集反应
沉淀反应
补体结合试验
放射免疫测定
蛋白印迹
免疫共沉淀
亲和力测定
凝集反应是指颗粒抗原与相应抗体结合反应出现的可见性现象。颗粒抗原如完整的细菌、红细胞等与相应抗体相混合,在一定条件下出现凝集。凝集反应中抗原称为凝集原,抗体称为凝集素。
沉淀反应
絮状沉淀反应
环状沉淀反应
双向扩散
单向免疫扩散
双向扩散法的操作:生理盐水配制1%-5%的琼脂,取4mL倒在显微镜用的载玻片上,凝固后打孔,中心孔滴入抗原,外周孔滴入抗体用于测定抗体效价,中心孔滴入抗体,外周孔滴入抗原,用于检测抗原的存在和定性抗原。
抗原抗体为单一体系时,抗原浓度不同,沉淀弧的特征不同:
抗原抗体为多体系时,出现的沉淀弧有多条,彼此互不干扰。
酶联免疫吸附测定实验 (ELISA) Enzyme linked immunosorbent assay
实验原理
1
ELISA利用了免疫反应的高度特异性和酶促反应的高度敏感性检测抗原或抗体
2
使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性
3
使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性
4
按一定步骤进行抗原抗体反应
加底物显色,根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析
ELISA既可测抗原又可测抗体,根据试剂来源、标本性状以及检测的具体条件,可设计出不同类型的检测方法:
直接法
间接法
双抗体夹心法
双夹心间接法

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  • 时间2025-02-11