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专题二十四 基因工程
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本专题高考考查频度非常高,内容包含了基因工程操作工具、基因工程操作流程、基因工程应用及蛋白质工程,其中操作工具中限制酶和DNA连接酶特点和在基因表示载体构建中应用考查较为频繁,故此,要充分了解这两种酶作用特点。基因工程操作流程要熟练,比如目标基因获取方法、基因表示载体构建、将目标基因导入受体细胞方法、目标基因检测判定方法及原理等等。相关基因工程应用只需熟悉相关基因即可,蛋白质工程则需记住流程图、相关概念及与基因工程区分。
北京大学 刘楚文
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考点53
考点54
试做真题
高手必备
萃取高招
对点精练
透析真题
基因工程原理、技术(含PCR技术)和操作程序
1.(·课标全国Ⅰ,38,15分,较低难度)真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所含有切除内含子对应RNA序列机制。已知在人体中基因A(有内含子)能够表示出某种特定蛋白(简称蛋白A)。回答以下问题。
(1)某同学从人基因组文库中取得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是 。
(2)若用家蚕作为表示基因A受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选取 作为载体,其原因是 。
(3)若要高效地取得蛋白A,可选取大肠杆菌作为受体。因为与家蚕相比,大肠杆菌含有 (答出两点即可)等优点。
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考点53
考点54
试做真题
高手必备
萃取高招
对点精练
透析真题
(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用检测物质是 (填“蛋白A基因”或“蛋白A抗体”)。
(5)艾弗里等人肺炎双球菌转化试验为证实DNA是遗传物质做出了主要贡献,也能够说是基因工程先导,假如说他们工作为基因工程理论建立提供了启示,那么,这一启示是
。
【答案】 (1)基因A有内含子,在大肠杆菌中,其初始转录产物中与内含子对应RNA序列不能被切除,无法表示出蛋白A
(2)噬菌体 噬菌体宿主是细菌,而不是家蚕
(3)繁殖快、轻易培养
(4)蛋白A抗体
(5)DNA能够从一个生物个体转移到另一个生物个体
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考点53
考点54
试做真题
高手必备
萃取高招
对点精练
透析真题
【解析】 (1)人基因A含有内含子,其转录出RNA需切除内含子对应RNA序列后才能翻译出蛋白A,大肠杆菌是原核生物,其没有切除内含子对应RNA序列机制,故将人基因A导入大肠杆菌无法表示出蛋白A。(2)噬菌体是一个专门寄生在细菌体内病毒,无法寄生在家蚕中。(3)大肠杆菌繁殖快、轻易培养,惯用作基因工程受体。(4)在分子水平检测目标基因是否表示应用抗原—抗体杂交法,即用蛋白A与蛋白A抗体进行杂交。(5)艾弗里肺炎双球菌转化试验原理是基因重组,经过重组使得S型细菌DNA在R型细菌中表示,这种思绪为基因工程理论建立提供了启示。
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考点53
考点54
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高手必备
萃取高招
对点精练
透析真题
2.(·课标全国Ⅱ,38,15分,较低难度)几丁质是许多真菌细胞壁主要成份,几丁质酶可催化几丁质水解。经过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病能力。回答以下问题。
(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶mRNA,常选取嫩叶而不选取老叶作为试验材料,原因是 。提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目标是 。
(2)以mRNA为材料能够取得cDNA,其原理是 。
(3)若要使目标基因在受体细胞中表示,需要经过质粒载体而不能直接将目标基因导入受体细胞,原因是 (答出两点即可)。
(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成化学键是 。
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考点53
考点54
试做真题
高手必备
萃取高招
对点精练
透析真题
(5)若取得转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物基因组中)抗真菌病能力没有提升,依据中心法则分析,其可能原因是 。
【答案】 (1)嫩叶组织细胞易破碎 预防RNA降解
(2)在逆转录酶作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配正确标准能够合成cDNA
(3)目标基因无复制原点;目标基因无表示所需开启子
(4)磷酸二酯键
(5)目标基因转录或翻译异常
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考点53
考点54
试做真题
高手必备
萃取高招
对点精练
透析真题
【解析】 (1)选取嫩叶为试验材料提取mRNA原因是嫩叶细胞细胞壁易破碎。提取RNA时加入RNA酶抑制剂目标是预防RNA降解。
(2)以mRNA为材料取得cDNA过程为逆转录,其原理是在逆转录酶作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配正确标准能够合成cDNA。
(3)目标基因无复制原点,无表示所需开启子、终止子等,其不能在受体细胞内表示,要使目标基因在受体细胞中表示,需要经过含有这些结构质粒载体将目标基因导入受体细胞。
(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成化学键是磷酸二酯键。
(5)假如目标基因已经整合到植物基因组中,但植物未表现出对应性状,可能原因是目标基因未转录,或是转录出mRNA未翻译出对应几丁质酶。
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