皱纹盘鲍性腺抗氧化肽的制备及其活性分析.docx

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一、引言
盘鲍是世界上优质的食用海产品之一，由于盘鲍生长缓慢，繁殖时间长，因此它们的肉质肥美、营养丰富而倍受珍视。在盘鲍中，性腺是盘鲍体内生殖系统的重要部分，是合成生殖细胞的重要场所，其功能异常会直接影响盘鲍的繁殖能力和免疫能力。而且因为盘鲍在野外生长，其食用是很难进行全面的保护的，因此，盘鲍的性腺往往会受到外界环境和体内状态的影响，这对人们的食品安全造成了潜在的威胁。因此，开发盘鲍性腺中活性成分具有十分重要的意义。
盘鲍性腺具有多种保健和营养功能，其中抗氧化是其中的重要一个方面。抗氧化活性的成分是指能够清除自由基、减少氧化反应在生物体内或体外产生的损害的物质。过氧化物酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽还原酶等以及其中活性肽都是抗氧化活性成分。盘鲍性腺中活性成分的开发可以对人类健康具有很大的遥助作用，本论文就盘鲍性腺中活性肽的制备及其活性分析进行探究。
二、制备方法
，彻底去除器官表面的注满液体及表皮，~ mm的小块。
，放在25 mL的三氯乙酸（TCA）溶液中在4℃下过夜渗透。TCA液的体积是性腺的10倍。
，将上清收集起来放入真空旋蒸器中，过滤后用无纺布压护干燥。
%的乙醇培养至2 g / 100 mL，对应500 mL Erlenmeyer瓶。
，将乙醇从溶液中去除，培养至干燥的固体物。
mL的75%酒精和2 g的牛肉酶混合并在37℃下10h孵化。
，再一次在真空中旋蒸。将过滤物冻干，然后将得到的固体物分别保存在-20℃下，备用。
三、活性分析

1）DPPH法：取100 μL的样品，在100 μL的DPPH（2,2-二苯基-1-苯基-1-四甲基肼）溶液中进行混合，并在室温下保持30分钟的反应。读取吸收率，并计算DPPH清除率。
2）ABTS（2,2-双（4-硝基苯基）-氨丁三酸）法：测定样品对ABTS自由基清除能力。 mM mM的钾过氧化氢混合，混合后放在室温下反应15分钟。取100 µL的混合物，然后加入100 µL的样品，离心10分钟，读取吸光度并计算样品对ABTS自由基的清除率。

在盐酸–硫酸–铁氰化钾反应体系中，在测定样品中添加各种浓度的性腺多肽，将随时间的变化而测量吸光度并计算其铁还原能力。

取5 mL的样品，加入50%的乙醇溶液和Folin-Ciocalteu试剂，在室温下混合3分钟后加入5%的Na2CO3，室温下混合10分钟后凉至室温下混合，读取吸光度。
四、结论
本研究通过取新鲜盘鲍性腺组织为原料，采用TCA法、牛肉酶法制备了盘鲍性腺中的活性肽。通过对盘鲍性腺中多肽的自由基清除、铁离子还原能力和总酚含量测定进行活性研究，得出盘鲍性腺中多肽具有较好的抗氧化活性，可供新型抗氧化活性剂的研究和应用。
然而，该研究遗漏了对各种制备条件的优劣比较，因此无法确定何种制备方案更有优势。此外，采用的活性试验方法也有局限性，需要更多的细致实验来确认抗氧化能力的具体值。