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摘要
本研究旨在探究转染RIZ1基因后食管鳞癌细胞株基因表达谱的变化。使用实时荧光定量PCR技术检测RIZ1基因在细胞中的表达以及基因表达谱的变化。结果表明，在RIZ1基因转染细胞中，RIZ1基因的表达增加明显。同时，存在大量基因表达谱的变化。细胞周期、基因转录、凋亡等方面的基因表达谱明显受到了影响。因此，本研究为进一步研究RIZ1基因在食管鳞癌治疗中的作用提供了参考。
关键词：转染、RIZ1基因、食管鳞癌、基因表达谱
引言
食管鳞癌是一种高发病率的消化道恶性肿瘤，常见于我国北方地区。患者往往因为早期症状不明显，被晚期发现，难以治疗。目前，手术切除、放疗、化疗等治疗手段已经被广泛应用，但由于食管鳞癌的复杂性，治疗效果并不理想。因此，寻找新的治疗手段对于提高食管鳞癌疗效非常重要。
RIZ1基因属于基因家族中的一员，它参与了细胞周期、凋亡、转录调节等生物学过程。近年来的研究发现，在多种恶性肿瘤中RIZ1基因的表达下降，并与肿瘤的恶性程度、患者预后密切相关。因此，RIZ1基因可能成为治疗肿瘤的新靶点。
本研究旨在通过转染RIZ1基因到食管鳞癌细胞中，探究RIZ1基因在食管鳞癌治疗中的作用及其对基因表达谱的影响。
材料和方法
细胞培养
人食管鳞癌细胞株EC109和人胚胎肾细胞293T细胞分别在DMEM培养基（10% FBS）中培养在37℃、5%CO2下。%%EDTA。
转染RIZ1基因
，转染前用PCR扩增检测并鉴定。 ，并加入200μL无血清DMEM培养基，-RIZ1重组质粒和5μLFECT荧光素转染试剂混合后滴加到培养基中。将混合物处理10分钟，将混合物滴加到细胞培养基中，一夜培养后用荧光显微镜和Western blotting检测绿色荧光蛋白和RIZ1蛋白的表达。
RNA提取和实时荧光定量PCR
RNA提取使用TRIzol试剂，提取后使用NanoDrop 1000检测RNA纯度和浓度。实时荧光定量PCR检测RIZ1、Cyclin D1、CDK2、p27等相关基因的表达。实验重复3次，并用ΔΔCq方法计算基因表达量。
结果
RIZ1基因的表达
使用PCR检测在EC109细胞中是否成功转染RIZ1基因。结果表明，RIZ1基因的表达量与对照组相比具有显著性差异。
基因表达谱的变化
使用实时荧光定量PCR技术检测细胞中基因表达谱的变化。结果表明，在RIZ1基因转染细胞中，存在大量基因表达谱的变化。与对照组相比，细胞周期、基因转录、凋亡等方面的基因表达谱明显受到了影响。
讨论
本研究通过转染RIZ1基因到食管鳞癌细胞中，探究了RIZ1基因在食管鳞癌治疗中的作用及其对基因表达谱的影响。结果表明，RIZ1基因的表达增加明显，并存在大量基因表达谱的变化。与对照组相比，细胞周期、基因转录、凋亡等方面的基因表达谱明显受到了影响。
前人的研究表明，RIZ1基因在肿瘤生长和转化中具有重要作用。被引起的基因表达变化可能与其在细胞周期、凋亡和转录调节等生物学过程中的作用相关。因此，RIZ1基因可能成为治疗食管鳞癌的新靶点。进一步研究可以将RIZ1基因与其他治疗手段结合应用，提高食管鳞癌的治疗效果。
总结
转染RIZ1基因后食管鳞癌细胞株基因表达谱发生了明显的改变，尤其在细胞周期、基因转录、凋亡等方面。因此，RIZ1基因可能成为治疗食管鳞癌的新靶点，未来可以结合其他治疗手段进行深入研究。