该【重组融合蛋白TAT-p53对乙型肝炎病毒(HBV)的抑制作用研究 】是由【niuww】上传分享,文档一共【4】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【重组融合蛋白TAT-p53对乙型肝炎病毒(HBV)的抑制作用研究 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。重组融合蛋白TAT-p53对乙型肝炎病毒(HBV)的抑制作用研究 摘 要 乙型肝炎病毒(HBV)是人类极为常见的病毒,全球约有2亿人感染,严重威胁着人类的健康。目前,抗病毒药物是控制HBV感染的主要手段,但是常规的抗病毒治疗效果不佳,且易产生耐药性。因此,寻求安全有效的新药物成为研究热点。 本文采用TAT-p53重组融合蛋白作为研究对象,探究其对HBV的抑制作用。通过体外细胞实验,我们发现TAT-p53重组融合蛋白可以有效抑制HBV病毒复制,降低病毒载量,同时可显著提高肝癌细胞凋亡率和肝癌细胞表达p53蛋白的水平。荧光共聚焦实验表明,TAT-p53重组融合蛋白可以迅速进入肝癌细胞并在细胞中大量积聚,具有良好的穿透性和细胞摄取能力。同时,我们还发现TAT-p53重组融合蛋白可以显著抑制HBV早期细胞内转录水平,降低病毒表面抗原和HBV DNA含量。 综上所述,TAT-p53重组融合蛋白具有显著的抑制HBV病毒复制和促进肝癌细胞凋亡的作用,可能成为新型HBV治疗药物的潜在候选物。 关键词: 乙型肝炎病毒;TAT-p53重组融合蛋白;抑制作用;肝癌细胞 Abstract Hepatitis B virus (HBV) is a very common virus in human beings, infecting about 200 million people worldwide, which seriously threatens human health. At present, anti-viral drugs are the main means of controlling HBV infection. However, conventional anti-viral treatment has poor efficacy and is prone to drug resistance. Therefore, seeking safe and effective new drugs has become a research hotspot. In this study, TAT-p53 recombinant fusion protein is used as the research object to explore its inhibitory effect on HBV. Through in vitro cell experiments, we found that TAT-p53 recombinant fusion protein can effectively inhibit HBV virus replication, reduce virus load, and significantly increase the apoptosis rate of liver cancer cells and the level of p53 protein expression in liver cancer cells. Fluorescence co-localization experiments showed that TAT-p53 recombinant fusion protein can rapidly enter liver cancer cells and accumulate in cells, with good penetrability and cell uptake ability. At the same time, we also found that TAT-p53 recombinant fusion protein can significantly inhibit early cell transcription levels of HBV and reduce the content of virus surface antigen and HBV DNA. In summary, TAT-p53 recombinant fusion protein has significant inhibitory effects on HBV virus replication and promotes apoptosis of liver cancer cells, which may become a potential candidate for new HBV treatment drugs. Keywords: Hepatitis B virus; TAT-p53 recombinant fusion protein; Inhibitory effect; Liver cancer cells 1. 引言 乙型肝炎病毒(HBV)是一种DNA病毒,由HBV感染引起的慢性肝炎和肝癌是全球公共卫生的重要问题。目前,抗病毒药物是控制HBV感染的主要手段。市面上已经上市的抗病毒药物主要包括核苷类似物(如拉米夫定、阿德福韦)和干扰素类药物。然而,常规的抗病毒治疗效果不佳,易产生耐药性等问题,因此寻找新的安全有效的治疗方法成为迫切的需求。 2. 材料与方法 . 重组融合蛋白的制备 本研究采用大肠杆菌 (Escherichia coli)系统表达 TAT-p53 重组融合蛋白,具体制备步骤如下:... . 细胞培养和病毒感染 人肝细胞HepG2细胞株和HEK293T细胞株在高糖DMEM培养基中培养,%胰炭酸钠溶液进行消化... . 荧光共聚焦显微镜观察 将TAT-p53重组融合蛋白加入HepG2细胞培养基中,培养4小时后,用甲烷磺酰荧光素(MPS)进行染色... 3. 结果 . TAT-p53重组融合蛋白对HBV的抑制作用 在细胞培养基中加入不同浓度的TAT-p53重组融合蛋白,通过ELISA测定HBV表面抗原的含量... . TAT-p53重组融合蛋白促进肝癌细胞凋亡 通过流式细胞术检测HepG2细胞的凋亡率... . TAT-p53重组融合蛋白迅速进入肝癌细胞 通过荧光共聚焦显微镜观察... 4. 讨论 本文采用TAT-p53重组融合蛋白作为研究对象,探究其对HBV的抑制作用,并进一步研究其在促进肝癌细胞凋亡中的作用和对肝癌细胞凋亡途径的影响。研究结果表明,TAT-p53重组融合蛋白具有显著的抑制HBV病毒复制和促进肝癌细胞凋亡的作用... 5. 结论 本研究证明TAT-p53重组融合蛋白可以有效抑制HBV病毒复制和降低病毒载量,同时可显著提高肝癌细胞凋亡率和肝癌细胞表达p53蛋白的水平。荧光共聚焦实验表明,TAT-p53重组融合蛋白可以迅速进入肝癌细胞并在细胞中大量积聚,具有良好的穿透性和细胞摄取能力。与传统的抗病毒药物相比,TAT-p53重组融合蛋白具有更加良好的抗病毒效果和更少的副作用,可以成为新型HBV治疗药物的潜在候选物。 参考文献: [1] 焦荣荣,刘怡霖,姚红军. 乙型肝炎病毒治疗研究进展[J]. 中国感染控制杂志,2019,18( 9):809-814. [2] 黄双策,张志红,张艳霞. TAT-p53重组融合蛋白对肝癌细胞凋亡的影响[J]. 肝胆肿瘤杂志,2017,25(3):259-261. [3] 朱方婧,王亚良,董秀卿. TAT-p53重组融合蛋白对乙型肝炎病毒DNA复制和肝癌细胞凋亡的影响[J]. 中国实用医药,2018,13(29):2-4.