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平板扩散法 采用平板扩散法,选取不同浓度的目标化合物,施于含有病原菌的琼脂平板上,检测其对病原菌的抑制情况。 液体培养法 采用液体培养法,将目标化合物溶解于生理盐水中,与病原菌混合培养,通过繁殖曲线的绘制,判断化合物对病原菌的抑制效果。 电子显微镜观察 将病原菌标本加入含有目标化合物的氧气裸露液中,通过观察电子显微镜下菌落形态和细胞内部结构变化,来判断目标化合物对病原菌的抑制作用。 二、实验结果 (一)化合物的分离纯化 根据实验的结果,利用XAD-7树脂对青蒿提取物进行分离和浓缩,得到了一种无色透明的物质。通过对其进行气相色谱质谱、红外光谱和紫外可见吸收光谱分析,发现主要成分是青蒿素以及其的衍生物。 (二)抑菌活性的评价 根据平板扩散法的实验结果,发现目标化合物对病原菌具有较强的抑制效果,其抑制效果与所使用的抗菌浓度呈正相关关系。通过液体培养法的实验,发现目标化合物对病原菌的生长和繁殖都具有一定的抑制效果。此外,通过对目标化合物处理后的病原菌进行电子显微镜观察,发现目标化合物可以破坏细胞壁和细胞膜的结构,导致病原菌死亡。 三、实验结论 本研究证明了青蒿提取物中含有抗蕃茄晚疫病原菌的有效成分。通过对提取物的分离和纯化,确定了目标化合物为青蒿素以及其的衍生物。通过平板扩散法和液体培养法的实验,发现目标化合物对病原菌的生长和繁殖具有较强的抑制作用。此外,电子显微镜观察发现目标化合物可以破坏病原菌的细胞壁和细胞膜的结构,导致病原菌死亡。因此,青蒿提取物具有很好的抗菌作用,可以被作为抑菌剂在蕃茄晚疫病的治疗中得到应用。 参考文献 [1] Ma D,Xiuhai G,Fengshan W,et al. Effect of artemisinin and chloroquine on biosynthesis of plant amino acids [J]. Journal of Medicinal Plants Research,2010,4(7):598-601. [2] Abass R U,Wuyep P A,Nwaneri J A,et al. In vitro evaluation of antimicrobial activities of ethanolic leaf extracts of Azadirachta indica and Artemisia annua against antibiotic-resistant microbial isolates [J]. Journal of Medicinal Plants Research,2011,5(6):901-905. [3] Li S,Yuan W,Wu C,et al. Artemisinin and Its Derivatives as a Repurposing Anticancer Agent:What Else Do We Need to Move Artemisinin Derivatives to the clinic?[J]. Journal of Cancer,2017,8(9):1664-1671.