实验 微生物的大小测量.docx

实验四微生物的大小测量、微生物的计数
一、实验目的和要求
,学习接目测微尺的校正方法及微生物大小的测定。
。
二、实验原理
,又因为放大倍数不同时,目镜测微尺每格实际代表的长度也随之变化,因此目镜测微尺在使用前必须用标准物镜尺进行校正.
接目测微尺是一块圆形玻璃片,其中央尺等分成100格.
,放在载物台上使用的,,(10微米),
利用血球计数板在显微镜下直接计数,,注入血球计数板与盖玻片之间的计数室中,,所以可根据显微镜下观察的微生物的数量计算出单位体积内的微生物总数.
血球计数板的计数室如下图所示,其中央为计数室,通常有两种规格25×16型或16××16型,其长和宽各为1毫米,盖上盖玻片后,,.
细胞数(CFU/mL)=50000×A×B
式中:A-5个中方格中细胞总数
B-菌液的稀释倍数

血球计数扳的构造
(中间平台分为两半,各刻有一个方格网)
()
血球计数板计数网的分区和分格
三、实验材料和器材
1、菌种: 固体斜面培养18-24小时酵母菌
2、培养基及试剂:马铃薯固体培养基、二甲苯、95%乙醇、苯酚等
3、器材及耗材:双目显微镜、恒温培养箱、恒温干燥箱、洁净工作台、紫外线灯管、紫外线灭菌手推车、血球计数板、接种环、试管、酒精灯、滤纸、擦镜纸、盖玻片、载玻片、打火机、棉花、滴瓶、圆塑料篓、长塑料篓、血红蛋白吸管、10mL塑料离心管、物镜物镜测微尺、目镜测微尺等
四、实验操作步骤
一)微生物大小测量
:将目镜头上的透镜旋下,把目镜测微尺裝入镜筒内,在显微镜里看到目镜测微尺的刻度。将物镜测微尺放在载物台上,有刻度的一面朝上,切勿放反了。调整光线后,先在低倍镜下找到物镜测微尺的尺子。然后转高倍镜观察到两把尺子,调节目镜测微尺,使两把尺的刻度线平行。再调节物镜测微尺,使目镜测微尺的一条刻度线与物镜测微尺上的一条刻度线重合,再寻找另一重合线,分别数出物镜测微尺及目镜测微尺的格数。以此计算在此放大倍数下目镜测微尺每一小格所代表的实际长度。例如:物镜测微尺的10格内含有目镜测微尺共45格,此物镜测微尺内有10小格,所以目镜测微尺每小格代表的实际长度=10格×10微÷45格=。
目镜测微尺每小格代表的实际长度(微米)=
:将物镜测微尺取下,把自制的酵母菌水浸片放于载物台上,通过旋转目镜筒的方法测出酵母菌菌体的长和宽,应测量5个菌体(先数格数,后计算)。
二)微生物的计数