氯化两面针碱的体外肾毒性研究论文.doc

氯化两面针碱的体外肾毒性研究论文.doc氯化两面针碱的体外肾毒性研究论文
【摘要】目的观察氯化两面针碱在体外对人胚肾细胞293的毒性作用。方法采用MTT法检测不同浓度氯化两面针碱对人胚肾细胞293的毒性。结果氯化两面针碱在体外对人胚肾细胞293有一定的毒性作用。结论氯化两面针碱可抑制人胚肾细胞293的增殖,对肾脏有一定的毒性。
【关键词】氯化两面针碱; 人胚肾细胞293; 体外肾毒性
Abstract:ObjectiveTo detect the toxicity of nitidine chloride in human kidney cell 293 in proliferation chloride inhibited the proliferation of human cell 293 in a dose-dependent chloride has the function of inhibiting proliferation on the kidney cell 293.
Key an kidney cell 293; Kidney toxicity; In vitro
中药抗肿瘤是目前医学界研究的一个热点,很多中药成分被证实具有较好的抗肿瘤效果而得以逐步走向临床。氯化两面针碱是两面针制剂的主要有效成分,在抗炎、镇痛、抗肿瘤、心血管系统等方面的作用已有较多报道。氯化两面针碱有较强的抗癌作用,据文献1报道,氯化两面针碱对LESO)(Sigma公司);DMEM(美国GIBCOBRL公司);胎生牛血清(杭州四季青生物材料研究所公司);胰蛋白酶(美国Amresco公司公司);谷氨酰胺(美国Amresco公司);PBS(美国Amresco公司);注射用青霉素钠(华北制药股份有限公司);注射用硫酸链霉素(大连美罗大药厂);HEPES(Sigma公司)。
仪器二氧化碳培养箱(美国Forma Scientific公司);倒置显微镜(日本Olympus公司);酶标仪(芬兰thermo公司);超低温冰箱(日本三洋公司);96孔培养板(美国BIO-RAD公司);6孔培养板(美国BIO-RAD公司);超净工作台(苏州净化设备厂);台式离心机(上海安亭科学仪器厂);电热恒温水浴锅(北京市医疗设备厂)。
细胞株人胚肾细胞293细胞株(南京凯基生物科技发展有限公司)。
2 方法
DMEM培养液的配置DMEM培养干粉以1 000 ml三蒸水充分溶解,加入NaHCO3 g, HEPES g,加入青霉素、链霉素使其终浓度为100 U·ml-1, 在超净工作台中过虑除菌,分装成90 ml/瓶,-20℃保存备用,临用前加10 ml热灭活(56℃,30 min)胎牛血清。
梯度氯化两面针碱的制备精密称定氯化两面针碱标准品适量用DMSO溶解后,用无血清培养液依次稀释, 25, 5,,,
μg/ml浓度梯度的氯化两面针碱系列浓度样品,置于4℃冰箱中保存备用。
细胞培养人正常胚肾细胞293分别培养于含DMEM完全培养液的玻璃培养瓶中,置于