猪瘟病毒蛋白与功能.ppt

猪瘟病毒蛋白的结构与功能
主要内容
猪瘟和猪瘟病毒
猪瘟病毒的结构蛋白和非结构蛋白
参与病毒穿入和吸附的蛋白及其细胞受体
病毒复制相关蛋白
宿主细胞嗜性相关蛋白
病毒毒力相关蛋白
免疫应答相关蛋白
与宿主相互作用的病毒蛋白
问题和展望
猪瘟
猪瘟(classical swine fever, CSF)是猪瘟病毒引起的急性、发热性、出血性、高度致死性传染病,死亡率高达80-90%。
世界动物卫生组织(OIE)将猪瘟列入须申报动物疫病名录( OIE-listed, notifiable disease),我国将其列为一类传染病。
可呈急性、亚急性或慢性经过。
猪瘟病毒
猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)属于黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestivirus)成员。
单股正链RNA病毒。
与BVDV和BDV有血清学交叉反应性。
猪瘟病毒
病毒核酸为RNA,含有唯一ORF,编码一多聚蛋白。
二十面体对称,有囊膜,直径34-35 nm。
病毒抵抗力不强,一般5-10%石灰乳、2-3%氢氧化钠、5%漂白粉可杀死病毒。
猪瘟病毒编码蛋白
多聚蛋白裂解为4个结构蛋白和7个非结构蛋白。
结构蛋白(C、Erns、E1、E2)。
非结构蛋白(Npro、p7、NS2-3、NS4A、NS4B、NS5A、NS5B)。
Npro
Erns
E2
p7
NS2
NS3
5-NCR
C
3-NCR
E1
4A
NS4B
NS5A
NS5B
多聚蛋白
猪瘟病毒结构蛋白
结构蛋白
Erns
E1
衣壳蛋白C
囊膜糖蛋白
E2
第一个结构蛋白,分子量14 kDa,能够调控病毒基因表达
高度糖基化蛋白,具有内切核酸酶活性,能够诱导机体产生中和抗体
包埋于病毒囊膜内,不诱导机体产生中和抗体
主要的诱导机体产生中和抗体的糖基化蛋白,大小在51-55 kDa
猪瘟病毒非结构蛋白
非结构蛋白
Npro
p7
NS2-3
NS4A
NS4B
NS5A
NS5B
第一个非结构蛋白,抑制IRF3转录,拮抗IFN-/产生
含70个氨基酸残基,分子量为6-7 kDa,参与离子通道?
进一步加工成NS2和NS3蛋白。存在3种形式,即NS2-3、NS2和NS3,可能参与CSFV的致细胞病变作用
NS4A是由NS3的蛋白水解酶活性水解多聚蛋白产生的非结构蛋白,由64个氨基酸残基组成
NS5B含有718个氨基酸残基,是病毒复制酶,具有RNA依赖的RNA酶活性,NS5B识别并起始病毒基因组复制
NS4B含有347个氨基酸残基,NS5A含有496个氨基酸残基,NS4B和NS5A是病毒复制酶的组成成份
参与病毒穿入和吸附的蛋白及其细胞受体
猪瘟病毒感染细胞是通过外膜糖蛋白Erns和E2与细胞表面蛋白的相互作用介导的。
Erns与细胞表面受体硫酸乙酰肝素(HS)作用,帮助病毒吸附细胞表面(Hulst et al, 2009)。
猪瘟病毒的E2受体未见报道,我们小组初步证明宿主细胞蛋白CDx与E2蛋白之间存在相互作用,可能是E2的一个受体。
CSFV 病毒蛋白受体将是CSFV研究的一个热点。
病毒复制相关蛋白
CSFV NS5B蛋白具有RNA依赖的RNA聚合酶活性(RdRp)(Xiao et al,2002)。
CSFV的复制起始于NS5B蛋白结合病毒的3-NCR,从而起始病毒RNA的复制(Steffens et al,1999)。
NS5A以及NS4B与NS5B蛋白能形成高度有序的复制酶复合体,共同对CSFV的复制起作用(Sheng et al,2010)。
NS3蛋白的RNA解旋酶活性能够提高病毒的翻译(Xiao et al,2008)。