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抗双链DNA抗体检测试剂盒(酶联免疫法)说明书
【产品名称】
通用名称:抗双链DNA抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Test Kit for Antibody to Double Stranded DNA (ELISA)
【包装规格】
48人份/盒。
【预期用途】
本试剂盒用于体外定性检测人血清中的抗双链DNA抗体(ds-DNA抗体)水平。
适用于系统性红斑狼疮(SLE)的辅助诊断[8]。
【检验原理】
本试剂盒应用间接酶联免疫吸附实验原理。在微孔板预包被ds-DNA抗原,加入样本稀释液及待检样本进行温育,样本中存在的抗ds-DNA抗体与包被抗原形成“包被抗原-抗体”复合物,洗板去除不与包被抗原结合的物质;加入酶结合物(辣根过氧化物酶标记的抗人IgG抗体)进行第二次温育,酶标二抗将与“包被抗原-抗体”复合物结合,形成“包被抗原-IgG抗体-酶标二抗”复合物;再次洗板后加入显色剂,复合物上连接的HRP催化显色剂反应,生成蓝色产物。终止反应后,变为黄色。若样本中无抗ds-DNA抗体,不显色或很浅色。
【主要组成成分】
表1. 抗双链DNA抗体检测试剂盒(酶联免疫法)组成成分
组成成份名称
数量
主要成分
-DNA包被板
4×12孔
固相化ds-DNA抗原
-DNA抗体阴性对照质控
150μl×1支
ds-DNA抗体阴性的混合人血清
-DNA抗体阳性对照质控
150μl×1支
ds-DNA抗体阳性的混合人血清

6ml×1瓶
含10%% pH PBS
(ds-DNA抗体用)
6ml×1瓶
辣根过氧化物酶标记鼠抗人IgG抗体

3ml×1瓶
3,3",5,5"-四甲基联苯胺(TMB)

3ml×1瓶
H2O2

3ml×1瓶
2M H2SO4
(30×)
15ml×1瓶
Tween-20 , 30×

1个

2张
注:不同批号的包被板、阴阳性对照质控、酶结合物不可互换。其他组份在有效期内可以互换。
【储存条件及有效期】
1. 储存条件:2~8℃避光贮存。
2. 有效期:12个月。
3. 打开后的包被板条用自封袋密封,2~8℃避光贮存不超过2周。
【适用仪器】
含波长450nm的酶标仪。
【样本要求】
1. 本试剂使用的样本为人血清。
2. 不能检测含有叠氮钠的样本,因叠氮钠抑制辣根过氧化物酶的活性;不能检测含有悬浮纤维蛋白或聚集物、重度溶血的样本。
3. 样本中应无微生物。无菌分离的样本可在2~8℃贮存1周,低于-18℃贮存三周,避免反复冻融。
4. 使用前请将样本置于室温(10~30℃)平衡30分钟以上,冷冻样本实验前需解冻至室温(10~30℃)并混匀。
【检验方法】
1. 配液: 用蒸馏水或去离子水将1瓶浓缩洗涤液全部稀释至450ml。
2. 样本稀释: 取90μl生理盐水于塑料试管中,再加10μl样本混匀。阴、阳对照已经1:10 稀释可直接使用。
3. 编号: 将样本对应的微孔按序编号,每板设阴性对照3孔、阳性对照2孔和