ELISA试剂盒检测中样品的处理.docx

ELISA试剂盒检测中样品的处理/各种检测样本的处理
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细胞培养物于室温1000g,离心10分钟后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。
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标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g,4℃离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
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可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后30分钟内于2-8℃,1000g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
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无菌收集取初尿,离心除去沉淀物,即可用于检测,要长期保存尿样,%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿样冰冻保护液放入-20℃冰箱长期保存。
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将组织标本先用PBS洗涤,除去多余血液,匀浆化后放在PBS于-20℃放置过夜,再经过二次反复冻融破膜,5000g,4℃离心5分钟,取上清即可检测。
ELISA法定量检测人细胞液、体液以及组织匀浆中8羟基脱氧鸟苷的含量。
试剂组成:包被平底微孔板,酶结合物,生物素,标准品,显色剂A,显色剂B,终止液,浓缩洗涤液(100倍稀释),使用说明书
自备物品
(尽量提前预热)
、吸头

样本的采集及保存
一般的生物标本包括有:
血液、体液、内脏器官、粪便、胃液、活检组织、组织提取液、天然孔分泌物及各种表达系统的表达产物等
一般为无菌操作,低温保存(-80℃、液氮)
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1、   器官实质不能太小
2、   以采集实质性病灶区为佳:如淋巴结、心脏、非、肺、脾以及肠管等病毒、病菌聚集的地方为佳
3、   同一病例装入同一容器,并做好标记
4、   应在0-8℃的低温储存和运输
5、   实质性器官的处理:
、,充分剪碎或研磨
、加入约500ul的PBS/生理盐水,充分混匀
、离心5000rmp x10min,去上清
、-20℃保存,作为待检标本(切勿反复冻融)
(常见的包括血清、血浆、唾液以及尿液等)的处理方式
1、血液包括血浆和血清,它们的主要区别就是:血清凝血而血浆不凝血,所以它们的处理方式也就不一样
、采集血浆时一般不加抗凝剂(主要为枸橼酸盐和柠檬酸盐),采集后立即离心800-1000rmp x 5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用;
、如要采集血清,一般要加入总体积1%的抗凝剂,采集后先室温或4℃静置半小时后,800-1000rmp x 5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用;
2、胃液和唾液的采集方式一般现采现用,但是一般饭后半小时内不易采集,因为刚进食的唾液中富含丰富的唾液淀粉酶,最好的采集的时间时空腹采集;
3、尿液的采集方式基本和唾液一样的,即现采现用,但是一般隔夜尿不采集;
4、组织提取液如肺泡灌洗液等,采集后离心分离,800-1000rmp x 5min,取上清,-20℃或4℃保存备用;
:采集后一般现用PBS/生理盐水溶解,充分混匀,800-1000rmp x 5min分离,取上清,-20℃或4℃保存备用;
,最常见的就