微生物标准操作规程六.doc

XXX人民医院检验科微生物室
标准操作文件
文件编号:WSW-SOP-007
版本号:2007 第1次修改
编写者:XXX XXX
审核者:XXX
修订日期:2012年1月15日
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粪便标本细菌学检验标准操作规程

规范粪便标本细菌学检验标准操作规程,确保检验结果准确可靠。

粪便培养。

标本类型粪便、直肠拭子。
标本采集
自然排便采集自然排便后,挑取其脓血、黏液部分2~3 g,液体粪便取絮状物2~3 ml,盛于灭菌容器内,或置于保存液(运送培养基)、增菌培养基中送检。
直肠拭子如不易获得粪便时,或排便困难病人及婴儿,可用直肠拭子采取,即以无菌棉拭用保存液或生理盐水湿润后,插入肛门内4~5 cm(幼儿 2~3 cm)轻轻转动取出,插入卡一布(Cary—Blair)运送培养基内或无菌容器内送检。
粪便标本应该立即送检,室温保存不能超过2小时,如不能及时送检可以放人磷酸盐甘油(pH 7 0)或转运培养基,但不能超过24小时。培养艰难梭菌的标本保于-20℃以下。培养沙门菌和志贺菌的标本应放置磷酸盐甘油溶液中保存。保存弯曲杆菌和弧菌的标本,需加CaCl2(100mg/L)试剂。
标本拒收标准
粪便标本放置时间超过2小时。
送检的粪便标本混有尿液。 3直肠拭子未置于运送培养基中。
、仪器
革兰染液、氧化酶试剂、麦康凯平板、SS平板、TCBS平板及相关生化试剂等。
VITEK鉴定系统;革兰阴性菌鉴定卡(GNI+)、革兰阴性细菌药敏卡(GNS)、革兰阳性菌鉴定卡(GPI)、革兰阳性细菌药敏卡(GPS)、真菌鉴定卡(YBC)、药敏纸片、ATB板条等,有效期及储存条件参见试剂说明书。
接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、C02培养箱等。
。

参见《质量管理程序》。

接收标本后,立即对标本进行编号、登记。
涂片检查粪便标本因各种正常菌群含量甚多,仅以染色性和形态无法分辨是否为病原菌。因此,粪便标本一般不作涂片检查。只有怀疑霍乱弧菌及菌群失调所致腹泻时,才作直接
涂片检查(观察动力和菌群比例)。
培养
沙门志贺菌培养参见《沙门菌属检验标准操作规程》、《志贺菌属检验标准操作规程》。
致病性大肠埃希菌培养参见《致病陛大肠埃希菌检验标准操作规程》。
霍乱弧菌培养参见《霍乱弧菌检验标准操作规程》。
副溶血弧菌培养参见《副溶血弧菌检验标准操作规程》。
小肠结肠炎耶尔森菌培养参见《耶尔森菌属检验标准操作规程》。
空肠弯曲菌培养参见《弯曲菌属检验标准操作规程》。