药物对小鼠肝微粒体谷胱甘肽s-转移酶的激活机制分析.docx

硕士论文 药物对小鼠肝徽粒体谷胱甘肽s一整!燮鹊适垫堂!里堕
药物对小鼠肝徽粒体谷胱甘肽S—转移膏的漱活机制研究1
浙江大学湖滨校区 药理学九九级研究生 郑英
导师 楼宣嘉教授
摘要
微粒体谷胱甘肽S一转移酶(microsomal glutathione S-transferase, mGST)是体内重要的解毒酶系之一,有关其被药物介导修饰激活及其生物学意义近来引起相关领域的关注。为论证药物在整体实验中对mGST活性的影响及其可能的机制,阐明整体动物中酶生物学特征被药物、毒物改变的生命现象本质,本研究选用在离体实验中对肝mGST具有修饰激活作用的对乙酰氨基酚(Acetaminophen,AAP)和环磷酰胺(Cyclophoshamide,CP),进行如下实验:
1、AAP和cP对小鼠mGST及相关酶活性的影响效应
0、鼠自由饮用1。%乙醇诱导CYP2E1 75 mg·k91苯巴比妥钠ip诱导
CYP2B:ip给药后测不同部位的谷胱甘肽s一转移酶(GST)、血清谷丙转氨酶
(sALT)活性变化来探讨药物对mGST的活性效应的特异性影响。实验结果显示:(1)量效和时效关系研究表明,AAP 90~210mg呶g~、CP t00—200mg呶91
。
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硕士论文 药物对小鼠肝徽粒体谷胱甘肽s一转移蘸的漱活机制研究分别引起sALT、血清GST(sGST)、TlIGST活性增加,胞浆GST(cGST)活性下降,且均呈剂量依赖性(P<~)。AAP、CP 150 mg·kg~,可使
sALT、sGST、mGST活性增加,cGST活性显著降低,均分别在2、3hr时达峰值(P<~)。(2)mGST与sGST、cGST活性相关性分析:在量效关系上,AAP、CP处理组分别在2、3 hr时,mGST与sGST活性呈正相关(r
、),与cGST活性呈负相关(r分别为-、-)。
,
提示药物致肝脏毒性损伤引起mGST活性增高及相关酶活性变化。y
2、AAP和cP对小鼠鹋sT活性调节途径及方式的研究
、髑H含量变化
,ip给药后测定诱导小鼠肝匀浆丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肤(glutathione,GSH)含量来说明药物及其代谢物是否引起肝脏脂质过氧化作用以及底物GSH含量的变化,以探讨其对mGST活性可能的影响机制。实验结果显示:(1)量效和时效关系研究表明,在AAP 90—210 mg·kg一、CP
100—200 mg·k91时,肝匀浆中MDA含量增加、GSH含量先降后增,均呈剂量依赖性。AAP、CP 150 mg·k91处理组,肝匀浆MDA含量增加,6 hr最显著;肝匀浆GSH含量在l hr极显著减少,在3—6 hr急剧增加,6 hr最显著(P<~):(2)mGST活性变化与GSH、MDA含量相关性分析:在量效关系上,在AAP、CP处理组分别在2、3 hr对,mGST活性与MDA含量呈正相关(,),与GSH含最呈负相关(r分别为-、)。提忝肝氧化损伤致MDA增加,GSH耗竭,mGST活性增高存在氧化
应激途径。l,
I
AAP和cP对小鼠肝GSH-PI活性的影响
,ip给药后测定诱导小鼠胞浆谷胱甘肽过氧化物酶(cytosolic
《,
glutatione peroxidase,cGSH—Px)和微粒体谷胱甘肽过氧化物酶
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硕士论文 药物对小赋肝徽粒体谷胱甘肽s一转移酶的激活机制研究
(microsomal cytosolic glutatione peroxidase,mGSH—Px)活性观察在功能上可作为GSH-Px的mGST与GSH-Px相关酶活性变化情况。实验结果显示:(1)量效和时效关系研究表明,在AAP 90—210 mg-kg一、CP 100-200
mg·k91时,cGSH—Px活性先增后降,均呈剂量依赖性。AAP、CP 150 mg·kg。处理组,mGSH—Px活性增加,cGSH—Px活性降低,mGSH—Px活性增高,分别在 2、3 hr时,达峰值(p<~)。(2)mGsT与GSH-Px活性变化相关性分析:在量效关系上,mGST与mGSH—Px活性里正相关(。 ),与cGSH—Px活性呈负相关(r分别为-,-)。提示引
发的氧化应激途径能短暂引起mGST、mGSH-Px活性同时上调。y
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AAP和cP作