野生灵芝与人工栽培灵芝对小鼠巨噬细胞吞噬功能的作用对比研究.doc

野生灵芝与人工栽培灵芝对小鼠巨噬细胞吞噬功能的作用对比研究.doc野生灵芝与人工栽培灵芝对小鼠巨噬细胞吞噬功能的作用对比研究
【关键词】灵芝巨噬细胞吞噬作用
灵芝为多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥子实体,具有抗肿瘤、免疫调节、降血糖、降血脂、抗氧化和抗衰老等广泛的药理作用。由于灵芝是一种腐生性真菌, 自然野生的灵芝又喜欢生于湿气较重的山林中,并多生于梅树、乐树的枯木上,而且在10万株枯木中只有两三株有灵芝生长,所以野生灵芝显得非常珍稀贵重[1]。20世纪50年代末我国用科学方法人工栽培灵芝取得成功后,研究开发人工栽培灵芝工作得到医药工重视。本研究采用给予小鼠灌胃野生灵芝和人工栽培灵芝水提液,6 d后进行腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验,并测定吞噬百分率和吞噬指数方法,观察比较野生灵芝与人工栽培灵芝对小鼠巨噬细胞吞噬能力的作用,以了解人工栽培灵芝在增强免疫功能方面与野生灵芝有无差异,为临床选择使用灵芝和研究开发利用人工栽培灵芝提供依据。
1 材料与仪器

野生灵芝,批号:080701,购自广州致信中药饮片有限公司,%;人工栽培灵芝,批号:080701,购自广州致信中药饮片有限公司,%。上述两种灵芝均产自云南,由广州中医药大学中药鉴定教研室谭树辉教授鉴定。SPF级昆明小鼠,购自广州中医药大学实验动物中心,动物合格证:粤监证2008A03。含台朌蓝染料的淀粉肉汤;5%鸡红细胞悬液;Hank's液。OLYMPUS倒置显微镜,日本奥林巴斯IX-71型。
2 方法
动物分组及处理小鼠30只,雄性,20~25 g,分为3组:正常对照组,正常饲养,实验第3天腹腔注射无菌淀粉肉汤1ml/次;人工灵芝治疗组:实验第3天腹腔注射无菌淀粉肉汤1ml/次,每日1次灌胃给予灵芝水提浓缩液1 ml,连续6 d;野生灵芝治疗组:实验第3天腹腔注射无菌淀粉肉汤1 ml/次,1次/d灌胃给予灵芝水提浓缩液1 ml,连续6 d。两种灵芝给药剂量均按成人(70 kg)每日服用50 g标准, g/kg小鼠灌胃给药。
吞噬功能检测注射5%鸡红细胞悬液1 ml于小鼠腹腔内,并轻揉腹部使鸡红细胞均匀分散至腹膜腔各处。30 min后小鼠颈椎脱臼处死后,腹腔注射Hank's液1 ml/只,轻轻按揉腹部数次,以充分洗出腹腔巨噬细胞。沿正中线将腹部皮肤剪开,暴露腹壁,提起腹壁剪开一小口,用吸管吸取1 ml腹腔洗液于24孔培养板内。于40
×光镜下观察,各组腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞情况见图1~3