肺癌的Survivin基因表达及其靶向治疗的研究.pdf

复旦大学
博士学位论文
肺癌的Survivin基因表达及其靶向治疗的研究
姓名:陈余清
申请学位级别:博士
专业:内科学
指导教师:蔡映云
20030615
中文摘要方法和更有效的治疗方法是肺癌研究的热门话题。现代分子生物学研究证明,肺常先于形态学改变,因此筛选发生率高、特异性强的异常基因及针对异常基因的魅芳觳庀酥Ь祷罴毂瓯竞吞狄褐蠸织和夹苑渭膊》巫橹质醣瓯疽约伟┖夹苑渭膊∠酥Ь祷法检测细胞生长抑制率,台盼蓝拒染实验检测死细胞率,流式细胞仪检测细胞凋研究背景肺癌是当今世界上发病率增长最快和死亡率最高的恶性肿瘤。目前,仅有%~%的患者得到早期诊断。尽管采用手术、放疗和化疗等综合治疗措施,由于转移和多药耐药,总的晟媛嗜缘陀ァR虼搜扒笮碌恼锒障碍是肺癌发生发展的关键,也是癌细胞产生耐药性的重要机制之一。基因的异靶向治疗策略有望成为肺癌诊断和有效治疗的新方法。基因是近年发现的一个凋亡抑制基因,不但具有抑制细胞凋亡和促进细胞增殖的功能,而且其表达具有明显的组织特异性,即在正常组织不表达,而在大多数肿瘤中高表达,故受到关注,但目前在肺癌诊断和靶向治疗中的研究甚少,尚未见纤支镜活检标本和痰液标本检测基因以及该基因靶向治疗对化疗药饔玫谋ǖ馈研究目的表达在肺癌诊断中的意义;魅钒邢騍姆匆骞押塑账对肺癌细胞株表达、细胞生长周期及细胞凋亡的影响;图亮堪邢芊裨黾踊埔┪颰的敏感性;魅稴研究方法第一部分:应用—ḿ觳伟┗颊呤质醣瓯镜陌┳橹┡宰检标本以及全部的上述颊咛狄罕瓯維表达,并与病理组织学、纤支镜刷检细胞学检查和痰液细胞学检查结果相比较。第二部分:谥侍褰榈枷拢直鹨、浓度的饔糜谛∠赴伟┫赴闚—和肺腺癌细胞株狝、笥肦狿法检测表达,法检测蛋白,流式细胞仪检测细胞凋亡并分析细胞周期分布。ザ馈⒘:蟃騜一饔梅伟┫赴闚—后,用亡并计算两药相互作用指数盋时,有协同作用;当时,协同作用显著。癌是一种基因性疾病,癌基因的激活或抑癌基因的失活导致细胞异常增殖和凋亡联合卜囊职┬Ч
研究结果与单独痰液细胞学检查相比,%.,特异性第二部分:—和狝赴员泶颯饔时狧蚐—细胞ǘ仍单独、联合騜一饔肗—赴蠓⑾諷联用时细胞生长抑制率为.%,亦优于单独应用ビ梅直鹞%和.%,第一部分:例肺癌患者手术切除癌组织标本率%哂诎┡∽.,而癌旁组织与良性肺疾病组织表达的阳性率无显著性差异.;例肺癌患者纤支镜活检标本表达的阳性率%也高于例良性肺疾病患者相应标本%伟┗颊呤质标本表达与否及表达强度与年龄、性别、病理分型、病理分级、%,%;肺癌患者痰液表达的敏感性%%.。蛋白。随着ǘ仍黾樱琒显著性,其中抑制率分别达.%和.%,效果最佳;随着加,狧蚐—细胞蛋白表达亦下降:细胞凋亡和细胞周期訬—和狝赴纳ひ种谱饔盟媾ǘ增大和作用时间延长而增强,诱导凋亡作用亦有相似变化。合饔玫男Ч飨杂庞诹揭┑ザ烙τ谩F淞S檬毕赴蛲雎蚀%,%。其联用时细胞生长抑制率达.%,而单用的抑制率分别为.%.%┝S米樗老赴蚀%,高于两药单用ビ梅直鹞%。S玫男Ч嗝飨杂于单独应用。%和.。%,也高于两药单用ビ檬钡%,滴.,表明显著协同作用。结论酥Ь祷罴毂瓯維检测可能成为肺癌珍断的分子表达的阳性明显下调,其差异具有分析发现,隑一隻一S靡簿哂不变。和
标志物之一。狄篠表达为肺癌无创诊断提供了一个新的辅助芄灰种品伟┫赴闟且效果呈时间、浓度依赖性,诱导凋亡的效果也呈剂量、时间依赖性,浓度作用笮Ч罴选哂邢灾拱┳饔谩关键词:肺癌反义核苷酸指标。及其蛋白表达,芄辉黾覶的敏感性。:螧一凋亡
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肺癌是当今世界上发生率和死亡率最高的恶性肿瘤,且呈上升趋势。%~%肺癌患者确诊时已属晚期。尽管采用了手术、放疗和化疗等综合治疗措菔。由于转移和多药耐药,总的晟媛嗜缘陀ァR虼似惹行枰Q扒笮碌恼断方法和更有效治疗方法。现代分子生物学研究证明,肺癌是一种基因性疾病,癌基因的激活或抑癌基因的失活导致细胞异常增殖和凋亡障碍是肺癌发生发展的关键,也是癌细胞产生耐药性的重要机制之一。基因的异常先于形态学改变,因此筛选发生率高,特异性强的异常基因及针对异常基因的靶向