[优秀论文]骨髓基质细胞诱导为神经细胞修复周围神经缺损的研究.pdf

上海第二医科大学
硕士学位论文
骨髓基质细胞诱导为神经细胞修复周围神经缺损的研究
姓名:王涛
申请学位级别:硕士
专业:整复外科
指导教师:杨川

堡圭兰焦堕苎——骨髓基质细胞诱导为神经细胞修复周围神经缺损的研究中文摘要目的:骨髓基质细胞虺艬方法:结果:骨髓基质细胞经体外诱导分钟后,由煺棺幢湮为长的轴突和树突。种雍サ南赴丫哂猩窬赴耐庑巍细胞较小,突起较多,与胶质细胞相似。除此,免疫细胞化学表明,组动物进行一般观察、再生轴突长度、组织学切片等评价修复效果。诱导后的细胞表达神经元特异核蛋白,.。我们利用微电极在单个细胞,是来源于骨髓基质的一种间充质细胞。研究发现,它具有多向分化的潜能。经实验证实,可以转化为骨,软骨,脂肪以及肌细胞。本实验研究骨髓基质细胞在体外是否可以诱导为神经细胞及其用来修复周围神经的可能性。%呐嘌号嘌晃S盏家骸S盏己蟮南赴诤呐嘌褐屑绦嘌S眯翁只成年大鼠,随机分椋孔弧=ù笫蟮淖娜彼穑霉杞汗芮沤尤彼穑芮荒诜别注入诱导及未诱导的杞汗苄薷醋樽魑6哉铡J鹾蠖愿小而圆的形状。种邮鄙斐鼋隙痰耐黄稹分钟后,突起变其中%有一长的轴突和较多的树突,具备神经元的特征。另外%内测出动作电位。通过电突触相连细胞测出了同步放电活动。经统计学计算处理,诱导及未诱导细胞动作电位幅度分别为±选用周龄的大鼠。游离股骨并用磷酸盐缓冲液和胎牛血清冲洗,吹打几次后移入含有/:学、免疫细胞化学和电生理等方法对细胞进行鉴别。骨神经离断后,造成以及%、、痬
结论:通过实验我们证明谝欢ㄌ跫驴稍谔逋夥只I经细胞。具备将其用来治疗中枢及外周神经疾病的可能性。
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.————前言营养因子的发现及鉴定等,预示着对周围神经的外科修复治疗将从轴突生长速度较慢,在通过吻合口时感觉、运动轴突常发生互相错感觉小体诔な奔涫窬浜笠孜酢⒈湫浴⑾宋耸保年代以来,随着神经生物学的发展,分子和细胞生物学先进入了细胞、分子水平。通过对周围神经再生微环境的研究,雪旺氏细胞的功能和其分泌的促神经生长活性物质的研究,二十余种神经以往注重于损伤或缺损区的“解剖学连续性”修复向“生物学”修经支配时间过长造成不可逆的损害而无法恢复神经对肌肉的支配,即使再生轴突能抵达末梢,也只能重建部分突出联系,神经功能恢复堡主兰垡笙苎周围神经损伤在现代生产和生活中极为常见,对人的生产能力和生活质量有严重影响,因此修复神经缺损一直是整复外科中的一个重要问题。自世纪年代,随着显微外科技术在周围神经损伤治疗中的作用,各种修复和康复治疗的开展,如周围神经无张力缝合、神经束膜缝合、束间神经移植、吻合血管的神经移植等治疗原则及方法的应用,周围神经损伤修复的疗效有了明显提高。但修复再造器官的功能问题即神经再支配问题仍无良好的解决方法。对于大段的神经缺损目前临床上只能通过神经移植的方法进行修复,这种方法存在三个方面的缺点:颊叽葱碌拇瓷耍神经再生的速度较慢,当神经再生至失神经的肌肉时,往往由于肌肉失神所以难以取得良好的功能修复的效果。目前周围神经损伤后功能恢复仍欠理想。因为周围神经损伤实质上属于细胞损伤,出生后神经元不能分裂,神经元受损后的再生只能依靠轴突的生长延伸,但是长,从而不能有效恢复对终末器官的重新支配,而终末器官∪猓技术的广泛使用,周围神经再生的基础研究有了长足的进步,已步自然大受影响。
一一——是;窬N貅牡拇婊睿再生釉经元胞体延伸并识别靶器官,胞来源有限,是牺牲其他组织为代价的。理想的神经组织工程的种井培养过程中具有较强熬传代繁猿钱力劳爨定囱分化。踩牖鞘洳注射等方式给蓊,霹较好邈键遴周围幸搴经再生。但是这些神经绘嚣方式婀题。~次性给药后,活性蛋白很快被酶降解,作用维持时润愆,蠢曼多次侵入栏操终绘藐时枧应用不便,缺乏妪廉意义。为种予细胞构建神经的研究已较成熟,但其一个巨大缺陷是雪旺缩黧主堂壁鎏塞复治疗转变,即防止毒孛经元死亡,促进并维持其存活,加快轴突的再生速度,荠使轴突薛再生正确定囱,完善翅豳专枣经再嫩微环境,更好地恢复神经功髓。这黧工作授大地丰富了辩周围神经再生她认识和治疗手段,为解决周阐神经损伤修复这一难鼷提供了可能。近年来的最新研究表明,周围神经受损后获得良好再生的条件建立新的功熊性接觳。大爨吾秀究发瑗:髑爨搪经蒜生簌赖于局部微环境,改酱再生微环,有利予促进神经挥生,特鬃是局部徽环境牵的神经营养因子,对维持神经元胞体存活、神经趋纯活性及再生其有夔要作用。有研究报道将神经生长因子、脑源性神经荣养因予、蕤状张经营莽墨予、碱性残纾维绷骢生长因子,以亭孛经毋