分子生物学
实
验
报
告
2011级生物科学师范
组长:
组员:
从甘薯中克隆ADK基因的核心片段
(西南大学生命科学学院,重庆400715)
摘要:甘薯为我国农业主要栽培作物,并且是分子生物学实验室常见材料,本次实验主要以甘薯叶片(部分为茎)为实验材料,第一次实验从材料中提取RNA并反转录cDNA第一链,经PCR扩增得到大量ADK基因核心片段,电泳检测胶回收ADK基因核心片段,将其与T载体相连并导入大肠杆菌DH5a感受态细胞中,扩增之后在加有相应抗生素的LB平板上筛选阳性克隆,这对后续生物信息学分析等有重要意义。第二次实验是用CTAB法提取甘薯DNA,PCR扩增再凝胶电泳检测纯度。(提取DNA也能扩增出ADK基因核心片段)
关键词:甘薯、PCR技术、腺苷酸激酶片段(ADK)、基因克隆、转化
Abstract: Sweet potato for my agricultural main cultivation crop, and is molecular biology mon material, this times experiment main to sweet potato leaves (part for stems) for experiment material, first times experiment from material in the extraction RNA and reverse recorded cDNA first chain, by PCR spread increased get large ADK gene core fragments, electrophoresis detection rubber recycling ADK gene core fragments, will its and t carrier connected and import Escherichia coli DH5 (feel State cell in the, spread increased in plus has corresponding antibiotics of LB Tablet Shang filter positive clone This importance to subsequent bioinformatics analysis. The second experiment was extracted by CTAB method DNA,PCR amplification and gel electrophoresis and purity of sweet potato. (Extraction of core fragment of DNA can be amplified ADK gene)
key words: sweet potato; PCR technologies; Adenylate Kinase Gene( adk ); gene clone; transformation
综述
甘薯(Ipomoea batatas (L. ) Lam.)属旋花科(Convolvulaceae)甘薯属((Ipomoea)蔓生一年生草本植物,染色体数为2n=6x=90。其又名山芋、红芋、番薯、红薯、白薯、地瓜、红苕等,因地区不同而有不同的名称,经济价值较高可食用也可入药。
世界甘薯主要产区分布在北纬40°以南。栽培面积以亚洲最多,非洲次之,美洲居第3位。1994年世界甘薯总面积为938万公顷,。甘薯是我国的主要栽培作物,常年种植面积6×106 hm2左右,栽培面积和总产量均居世界首位,它所富含的淀粉是重要的轻化工和食品加工原料。
选育推广优良品种是农业增产的重要措施,因此,在农业科技工作中,选育和推广优良品种始终处于重要地位,“渝苏303”是西南师范大学在育成“渝苏1号”、“渝薯 34”、“渝薯20”之后,于1991年从江苏省农科院提供的杂交种籽中选育而成的又一个甘薯新品种,原系号“91一31一303”,该品种(系)1994—1995年参加四川省甘薯新品种区域试验,1997年5月、1998年1月和1999年4月分别通过四川省、重庆市、江苏省农作物品种审定委员会审定,1998年该品种在重庆、四川、江西、江苏、贵州、河南等省市的种植面积在1×104hm2以上。经过较长较深时间的研究,甘薯应经成为西南大学生命科学学院分子生物学实验室的常用材料,从分子生物学角度对其进行基因水平上的实验研究对于提高甘薯的质量和产量都有重大意义。
ADK基因
腺苷酸激酶(
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