正相色谱柱的使用.ppt

正相液相色谱柱的使用与维护
色谱柱分类
正相色谱柱活化
色谱柱冲洗与再生
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样品
溶于有机溶剂
溶于水
溶于四氢呋喃
非离子化
离子化
溶于有机溶剂
溶于水
溶于正己烷
溶于甲醇或甲醇/水
或乙腈或乙腈/水
用硅胶的正相模式
用键合相的正相模式
用键合相的反相模式
用键合相的反相模式
低分子凝胶渗透色谱
用键合相的反相模式
抑制电离反相键合相色谱
离子对键合相的反相模式
用硅胶的正相模式
离子交换模式
凝胶渗透色谱
凝胶过滤色谱
大孔填料的离子交换模式
用大孔填料的反相模式
分子量>2000
分子量<2000
分离模式的选择
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正相色谱 20%
反相色谱
80%
正相吸附色谱
极性:固定相> 流动相
固定相- 极性
流动相(己烷, 庚烷)- 非极性
极性物质后出峰
正相色谱
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正相色谱柱的特点
正相色谱比反相色谱柱压低
使用的溶剂容易旋蒸除去
吡咯等蒸发性溶剂彻底改善了碱性有
机化合物在B型球形硅胶, Diol和PEG
正相液相色谱柱上的峰形。
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色谱柱的分类
按固定相作用性质分类
高效反相液相色谱柱
高效正相液相色谱柱
高效亲水液相色谱柱
高效离子交换液相色谱柱
InnovationTM高效多功能液相色谱柱
高效手性液相色谱柱
高效GPC凝胶液相色谱柱
高效Hilic液相色谱柱
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色谱柱的分类
按基质材料分类
硅胶基质柱
聚合物柱
ZrO2柱等
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按柱子尺
寸分类
毛细管柱
微柱
窄径柱
常规柱
制备柱
半制备柱
色谱柱的分类
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正相液相色谱柱
1、氨基柱
2、硅胶柱
4、Diol柱
3、氰基柱
正反相使用均可
绝不可沾水
正反相使用均可
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正相色谱柱的活化
活化注意要点:
1、保存溶剂:一般正相新柱出厂是用95%的正己烷:5%乙醇或纯异丙醇或正己烷保存;
例外:比如氰基柱既可以用作正相柱,也可以用作反相柱,一些厂家就用纯甲醇封柱。
2、异丙醇过渡:粘度大高柱压;小流速:·min-1;先流路后过柱;;若有缓冲盐,则应先用不含盐的同比例的流动相过柱,避免析出。
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氨基柱柱效检测
流动相:10%乙酸乙酯+90%正己烷
流速:·min-1
标准溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯
检测波长:254nm
参考(标准JB5226-91)液相色谱仪测试用标准色谱
柱
此方法同时适用氰基柱、硅胶柱
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