第五章植物离体微繁.pptx

植物有哪些繁殖方法?
思考:
分株繁殖
压条繁殖
播种繁殖
嫁接繁殖
扦插繁殖
组织培养繁殖

植物离体微繁(micropropagation):利用离体培养技术,将来自优良植
株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞放在试管内,给予人工培
养基和合适培养条件进行离体培养,达到高速增殖。在短期内获得大量遗传
性状一致的个体的方法。属离体无性繁殖(propagation in vitro) 。又称为快
速繁殖(rapid cloneprogagation)。
植物离体微繁的特点
:它的高速度是以下三种因素构成的:①有较高的增殖倍数;
②较短的增殖周期;③周年生产。
:占用空间小,生产效率高,省时、省工、节约土地。
;
、濒危、名贵、突变物种。
植物离体微繁过程
第一阶段无菌培养体系的建立
第二阶段诱导外植体生长与分化
第三阶段促进中间繁殖体的增殖
第四阶段壮苗与生根
第五阶段试管苗的出瓶种植与苗期管理
第一阶段:无菌培养体系的建立
任何植物细胞或组织培养体系的建立,都必须采制适宜的外植体。
外植体的选择有什么要求呢?
1)物种的选择:①易于离体培养的种类、品种、类型;②生产或研究上意义比较
大的种类、品种、类型。
2)外植体的部位:
茎尖:生长速度快,遗传稳定,无病毒分布。但材料来源有限,为此茎段也是重
要来源。
叶片:采用幼嫩的叶片较好。如:秋海棠、矮牵牛、菊花等。
花(花蕾):据一些学者的观点,在花诱导之前细胞的脱分化容易发生,故外
植体常取发育早期阶段的花,即花蕾。
胚:大多数花卉都可用胚培养的方式进行快繁,如:百合、羽叶甘蓝、蝴蝶
兰、卡特兰等。
外植体的选择
3)外植体的年龄:
①植株的生理年龄越小,外植体的再生能力越强,培养成功的可能性越大。
②同一植株上越接近基部的枝条,生理年龄越小。
4)取外植体的季节和时间:
①选取外植体的季节和时间,对培养材料的启动和培养至关重要。
②一般在生长季—春夏。
5) 外植体的大小
外植体过大,不易灭菌,过小,不易成活。-1cm;-。
外植体的灭菌
无菌的外植体材料是植物组织培养成功的重要前提与可靠保证,而消毒
则是获得无菌外植体的有效方法。取来的外植体需要经过仔细的表面灭菌处
理,外植体灭菌常用消毒剂。
消毒注意事项:、消毒时间,减少组织的死亡.
2. 在用消毒剂对材料表面消毒后,必须用无菌水漂洗3次以上以除去残留杀
菌剂,但用酒精消毒时,则不必漂洗。3. 与消毒剂接触过的切面在转移至无
菌基质前需切除,因为消毒剂会阻碍植物细胞对基质中营养物质的吸收。
4. 在外植体污染严重时,应用流水漂洗1h以上或先种子培养得到无菌种苗,
然后用其各个部分建立组织培养。,但较难从外植体去除,
对人的伤害也最大,用后要用水冲洗至少5次。
外植体的接种和培养
外植体的接种—无菌操作
外植体表面灭菌—切取分离—无菌培养基
外植体的培养
光照、温度、湿度、培养基pH、气体调节