2015 urtp 结题论文.doc

2015_urtp_结题论文中央民族大学大学生创新训练计划结题论文
URTP Final Thesis of Minzu University of China
利用HPLC法测定不同地区川西獐牙菜中不同部位口山酮类化合物的含量
HPLC Determination of Different parts pounds of xanthones in Swertia mussotii Franch


项目编号:
URTP2014110018
项目类型:
本科生研究训练计划
项目成员:

依托单位:
生命与环境科学学院
2015年3月10日
项目结题验收报告书
本项目首先利用超声提取法,以甲醇为溶剂,从不同地区川西獐牙菜的不同部位中高效提取含有口山酮类化合物的混合液,经预处理后制备成样品溶液备用。然后在HPLC色谱系统中以甲醇-%磷酸水为流动相,利用二元高压梯度法洗脱,探索出能将不同口山酮标样很好地分离并得到较好的图谱的条件,最后利用外标法测定样品溶液中对应的口山酮类化合物的含量。
预期目标及完成情况

(1)在超声提取方法下,改变溶剂,并经过旋蒸浓缩得到样品溶液,确定较佳的样品预处理方案。
(2)通过改变流动相以及色谱洗脱方法(等浓度梯度或二元高压梯度),得到能较好分离川西獐牙菜中口山酮类化合物的色谱条件。
(3)能测定得到多种不同地区中川西獐牙菜里口山酮类化合物的含量,并做适当的分析,为以后的民族医药研究提供基础的科学依据。

(1)经过大量实验证明:以甲醇为溶剂进行超声提取,再经过旋蒸浓缩是比较高效便捷的样品预处理方案。
(2)通过对比不同条件下的图谱,确定了以甲醇-%磷酸水为流动相在二元高压梯度的色谱条件下能较好的分离川西獐牙菜中口山酮类化合物。
(3)本实验最终测定了四川省两个地区、青海省三个地区的川西獐牙菜根、茎、叶、花不同部位中5种口山酮类化合物的含量。
2. 学术及应用价值
我国肝脏疾病发病率高,影响面广,对人民健康和国家经济危害严重,尤其是乙型肝炎,因此乙肝的防治已经被列为国家“十一五”规划,并明确提出肝炎防治药物研究是今后药物研究的主要任务之一。然而目前临床上对乙肝病毒(HBv)的治疗尚无特效药。虽然干扰素和核苷类似物等化学药物在这一方面的疗效较为突出,但是因其复发率高,价格昂贵,副作用大等诸多弊端而难以推广。而植物药在抗肝炎病毒的同时又能很好的保护肝脏的功能,还可为设计更理想的新药提供新的化学结构。据研究川西獐牙菜(Swertia mussotii Franch)系龙胆科獐牙菜属植物,藏名
“蒂达”。主要分布在四川、青海、西藏、云南等地。具有清热解毒,清肝利胆的作用。具有较好的防治肝炎的药用价值和开发新药前景,成为研发防治肝炎新药的研究热点。
川西獐牙菜的主要化学成分为游离口山酮及其苷类、环烯醚萜类、黄酮类、内酯、齐墩果酸等三萜类化合物。其中口山酮类化合物是川西獐牙菜中含量高、生物活性强、具有很大的药用价值和经济价值的有效成分。口山酮类化合物可分为口山酮和口山酮苷,其成分复杂多样、结构独特、药理活性多。仅其众多成分中的芒果苷就不仅具有抗氧化、抗辐射、抗病毒、抗菌、抗糖尿病及抗肿瘤的作用,还具有保肝利胆、保护心肌缺血再灌注损伤、使中枢神经系统兴奋等多种药理作用。川西獐牙菜是藏医广泛应用的蒂达类药材,掌握其有效成分含量对药材的采收和质量监控有重要的意义。

本实验依赖仪器以及需要大量的重复实验。但是由于HPLC仪器系统的不稳定和时间的有限,所以在实验过程中重复性有限,导致实验结果的精确度有所偏差。

经费使用情况一览表
项目
金额(元)
实验药品
化学试剂(甲醇、磷酸等)
实验材料(过滤膜、注射器、保护柱)
1700
500
800
总计
3000
指导教师意见:
作为指导教师,我已阅读该报告和论文,项目成果真实可靠,无学术不端现象,同时论文行文规范,无较大格式、语法错误。
签字(手签章无效):
日期:
年月日
摘要
实验目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定青海四川不同地区川西獐牙菜中不同部位5种口山酮类化合物,即当药醇甘(S1)、3,7,8-三甲氧基-1-O-(β-D-葡萄糖苷)(S2)、1-羟基-3,4,7,8-四甲氧基口山酮(S3)、1,7-二羟基-3,8-二甲氧基口山酮(S4)、1,8-二羟基-3,7-二甲氧基口山酮(S5)。实验方法:色谱柱为Hypersil C18柱(150mm×,5µm);流动相为甲醇-%磷酸水;二元高压梯度洗脱,洗脱条件为0min→30min→40min,甲醇:10%→50%→60%;检