呋喃唑酮，呋喃妥因和加替沙星化学发光酶联免疫吸附检测法建立.pdf

中文摘要随着现代经济的迅速发展,现代养殖业近年来也迅速发展,由此引起的抗生素的滥用导致的大量药物残留已经成为威胁人类健康的严重经济社会问题。硝基呋喃类和氟喹诺酮类药物是人工合成的广谱抗生素,因为其价格低廉,效果良好,被广泛应用于畜禽和水产养殖业。但是这些药物的滥用也不可避免的导致大量残留,对人体产生诸如致癌,致突变等毒副作用,引起细菌耐药性的增加,还通过国家进出口经济利益,建立方便快速可靠的硝基呋喃类和氟喹诺酮类药物的残留性差,不能进行准确的定性定量分析。酶联免疫检测法����朔�艘陨戏�本论文旨在建立呋喃唑酮,呋喃妥因和加替沙星的化学发光酶联免疫吸附检测法对于呋喃唑酮,根据其结构特点,从其代谢产物���龇⒅票该庖咴������缓罄�没旌纤狒�ㄓ牖罨�呐QG灏椎鞍����剂:铣闪嗣庖�原。将此免疫原免疫新西兰大白兔制得呋喃唑酮的多克隆抗体。合成免疫原的同限为����痬�8每固宄�訡��的交叉反应率较高外,和其他药物的交叉率环境和食物链的作用间接对人体健康造成潜在危害。现在很多国家已经规定了食品中硝基呋喃类和氟喹诺酮类药物残留的最高检出上限。为保障人民身体健康和检测方法是非常有必要的。很多国家已经为此而建立了一些药物残留的监测方法。包括传统的仪器法,微生物检测法和新兴的酶联免疫检测法����4�臣觳庖┪锊辛舻囊瞧鞣治�方法包括��、�.�、�.�和���甅�取U庑┓椒ㄓ诺闶亲既贰⑽榷ā�特异性好,可以作为标准方法,但仪器设备昂贵,笨重,需要大量的溶剂,对操作人员要求很高,样品前处理复杂、费时、费力、不易普及,不适合对大规模的样品进行即时检测。微生物检测法虽然可以进行大量样品的即时检测,但是特异法的缺点,是一种快速、灵敏、方便的检测方法,可以用于大量样品的即时检测,有着广阔的发展前景。而结合了化学发光分析的酶联免疫检测法��狤����由于有着更高的灵敏度,更宽的线性范围,成为了酶联免疫检测法的发展趋势。包被抗原。利用混合酸酐法合成的免疫原,先将��扔隒�偶连,衍生为时,也利用戊二醛法将��肼亚宓鞍���偶联合成了包被抗原。对呋喃唑酮,其抗体用间接竞争化学发光���ḿ觳饨峁�缦拢篒���.��痬��觳�曼虽曼曼曼皇曼曼量曼曼曼曼曼曼曼曼曼皇鼍曼量曼曼量曼曼曼鼍�柿炕事���麵鼍皇苎曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼量曼曼曼皇量寰曼曼曼曼皇曼曼皇曼曼皇曼���������。山东大学硕士论文
传统的比色���ㄏ啾龋��Х⒐釫��法有着更好的灵敏度和检测下限。用此抗体检测呋喃唑酮在养殖用水中的添加回收率,批间回收率范围在�.��ブ�间,批内回收率范围在�.��ブ�洹E�浔湟煜凳��.�%之间,批内变异对于呋喃妥因,其免疫原和包被抗原的合成方法与呋喃唑酮类似。也是从代谢产物��龇ⅲ�苌�狢��后,用混合酸酐法与活化的牛血清白蛋白���偶联合成了免疫原,免疫新西兰大白兔制得多克隆抗体。用戊二醛法将化学发光���ḿ觳饨峁�缦拢篒���.��/�,检测限为����痬���传统的比色���ǖ玫降募觳庀孪尬�.��痬�琁���.��痬�8每固宄��喃妥因在养殖用水中的添加回收率,批间回收率范围在�.���%之间,批内对于加替沙星,其免疫原和包被抗原由��ㄖ聘鳌F淇固逵眉浣泳赫��学发光���ḿ觳饨峁�缦拢篒���.��痬��觳庀尬�.��/�,而传统的比色���ǖ玫降募觳庀孪尬�.��/�,��是���/�。该抗体与其他氟喹诺酮类药物的交叉反应均很小。用此抗体检测加替沙星在牛奶样品中的添加回收率,批间回收率范围在�.��ブ�洌��诨厥章史段г����%之间。通过对硝基呋喃类和氟喹诺酮类药物的研究,我们成功地制备了呋喃唑酮,呋喃妥因和加替沙星的免疫原及包被抗原,并通过动物免疫制备了相应的多克隆抗体。基于这些抗体,我们建立了呋喃唑酮,呋喃妥因和加替沙星的化学发光美联免疫吸附检测法,并且验证了与传统的比色���ㄏ啾龋��Х⒐釫��法有着更好的灵敏度和检测下限。为最终开发商品化的检测试剂盒打下了良好的关键词:药物残留;抗体;呋喃妥因;��贿秽�蛲#籄�;加替沙星;化学发光酶联免疫检测�【广���均很小。而传统的比色���ǖ玫降募觳庀孪尬�.��痬�琁���.��痬���系数在���ブ�洹���肼亚宓鞍���偶联合成包被抗原。对呋喃妥因,其抗体用间接竞争���慕徊娣从Ρ冉厦飨酝猓�推渌�┪锏慕徊媛示�苄 S么丝固寮觳膺�回收率范围在�.���.�ブ�洹E�浔湟煜凳��.�%之间,批内变异系数在���ブ�洹�批间变异系数在���ブ�洌��诒湟煜凳����ブ�洹�基础,并为其他药物抗体的制备和检测试剂盒的开发开辟了道路。山东大学硕士论文�
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