高效液相色谱法测定补肾益气颗粒中补骨脂素和异补骨脂素含量.doc

高效液相色谱法测定补肾益气颗粒中补骨脂素和异补骨脂素含量.doc高效液相色谱法测定补肾益气颗粒中补骨脂素和异补骨脂素含量
关键词:补肾益气颗粒; 补骨脂素; 异补骨脂素; 高效液相色谱法
Abstract:ObjectiveTo establish a method for the determination of psoralen and isopsoralen in Bushenyiqi Diamonsil C18(200 mm× mm,5 μm)obile phase consisted of methanol-l・min- UV detective .ResultsThe linear range of psoralen ethod can be used to control the quality of Bushenyiqi granules ple,reliable and good reproducibility.
Key onsil C18(200 mm× mm,5 μm);流动相为甲醇水(55∶45); ml・min-1;检测波长245 nm。此条件下,补骨脂素和异补骨脂素可达基线分离,;理论塔板数大于2 000。色谱图见图1~2。
线性关系考察分别取补骨脂素和异补骨脂素10 mg,精密称定,以甲醇溶解并定容于25 ml容量瓶中制成混合对照品溶液(, mg・ml-1),,,,,,, 96, 92, 84, 76, 68, 6 mg・ml-1。分别吸取上述对照品溶液10 μl,按上述色谱条件进行测定。以峰面积积分值为纵坐标Y,对照品含量为横坐标X(μg),绘制标准曲线, 计算回归方程:补骨脂素:Y=10 609X-,r= 98,~ μg,在此范围内线性关系良好;异补骨脂素:Y=9 -,r= 98, 6~ μg,在此范围内线性关系良好。
图1 补骨脂素和异补骨脂素混合对照品色谱图(略)
图2 样品色谱图(略)
供试品溶液的制备取本品适量研匀,称取约1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 ml,精密称定,密塞,称定重量,超声处理1h,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
空白对照实验按本制剂的处方、工艺制成缺补骨脂的阴性制剂,按上述供试品溶液制备方法及测定方法实验,结果表明其他成分对补骨脂素和异补骨脂素的测定无干扰。色谱图见图3。
图3 空白对照色谱图(略)
精密度实验吸取同一混合对照品溶液,连续进样6次,测定峰面积,%,%。
重复性实验同一批号的样品,平行取样6份,按供试品溶液的制备方法进行制备,进样10 μl,测定, 0