双黄连注射剂中黄芩苷抗原的合成及抗血清的制备.pdf

双黄连注射剂中黄芩苷抗原的合成及抗血清的制备甊:【摘要】目的:合成黄芩苷免疫抗原并制备抗血清。方法:采用高碘酸钠法将黄芩苷与牛血清白蛋白涣#⑸涣!采用间接ḿ觳饩栖塑沼肱QG宓鞍赘春衔锩庖咝挛骼纪貌目寡G濉=峁检测出了黄芩苷与牛血清蛋白复合物的抗血清,计算抗血清效价为=崧郏汉铣傻幕芩苷与牛血清蛋白复合物具有免疫原性,并产生了针对黄芩苷的特异性抗体。黄芩苷与牛血丶蔿黄芩苷;抗原;合成;抗血清;制备;鉴定曾姣丽”,贺福元脐,戴儒文蜗簟鹾G,谢相贵湖南中医药大学药学院,湖南长沙:幸┮┬杂胍┬Ч抑幸揭┕芾砭种氐实验室,湖南长沙通过紫外扫描与甈ㄊ笛榧煅榛栖塑沼隑成功发生了交联。用间接清蛋白交联抗原的合成成功,为制备黄芩苷的单克隆抗体及建立快速检测黄芩苷析方法提供了依据,并为应用于双黄连注射剂找出致敏原奠定了基础。—琖珼【篢甅:.【基金项目易匀豢蒲Щ,,教育厅重点资胁第常页..【作者简介】曾姣丽,女,在读硕士研究生,研究方向:中药药剂及其质量控制的研究;,簔.【通讯作者馗T#淌冢┦可际Γ.:·.’,珼.,猶琗猤;琣瓹篢
约梁鸵瞧中药注射剂在我国已有多年的发展及应用历程。在这多年中,中药注射剂为我国医可替代的作用,在某些疾病的治疗上,中药注射剂的疗效高于部分化学药品H欢完全人工抗原才能应用于免疫操作。本文研究以T靥搴铣葿.,经紫外和单克隆抗体及建立快速检测黄芩苷治龇椒ㄌ峁┝艘谰荩⑽Sτ糜谒ɑ屏⑸浼【;籹;—籶;疗事业做出了巨大贡献,也为无数患者解除了病痛,中药注射剂在临床方面具有化学药品不来与中药注射剂相关的几次严重不良反应事件将中药注射剂推向了低谷。中药注射剂在临床应用最大的阻碍来自于医生对其安全性的担心,其次是对其疗效的不信任【。一些中药注射剂的有效成分被认为有致敏作用,如双黄连注射液中所含的绿原酸和异绿原酸就具有致敏原作用,可引起变态反应【浚蹇A樽⑸湟汉兴=翘崛∥铮诤鞍字剩也可能刺激机体产生相应的抗体,引起过敏反应绶⑷取⑵ふ睢⒆像【钔,对致敏原成分的分析判定研究,童路等【吭粤俅彩褂弥蟹⑸旅舴从臀捶⑸旅舴从Φ乃ɑ屏壅胍品进行薄层色谱比较分析,结合临床资料考察了黄芩苷、汉黄芩苷两种成分与致敏反应发生的相关性,认为致敏反应与黄芩苷有关。该研究初步提出了双黄连中一种主要化学成分的致敏性,但未能说明该制剂中其他致敏原的情况,所采用的技术方案也不适于对复杂未知成分的大规模筛选和对致敏性的确切分析。而且,其他类似研究均未见报道,更未见系统性的筛选研究报道。如此,远不能满足解决中药注射液高敛严重过敏反应难题的迫切需要。黄芩苷是双黄连药用成分的定量指标,目前检测黄芩苷的常用方法有紫外分光光度法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、薄层扫描法等种,但这些方法或者操作复杂,灵敏度低,或者分析成本高,耗时长。基于抗原抗体反应的酶联免疫检测且恢中滦偷姆治龇椒ǎ梢杂行Ы饩龃撤椒ㄋ嬖诘奈侍狻要建立紫纫5玫娇够栖塑盏目固澹ɑ栖塑障喽苑肿又柿拷闲。延谥苯佑糜免疫操作,必须和大分子的载体蛋自如牛血清白蛋白亚灏椎鞍椎扰剂V蠊钩电泳鉴定合成的人工抗原后,用问接治鲅G逯锌固宓男Ъ邸1疚奈V票富栖塑盏找出致敏原奠定了基础。黄芩营单体罄手蔡幔,蒸馏水,牛血清蛋白本┒锛际踉鹑斡邢薰司珼旖蚴写竺约脸В