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六味地黄丸有效成分的测定
论文摘要:文章分析了六味地黄丸(浓缩丸)有效成份的含量测定技术。
主题词: 六味地黄丸测定
中图分类号:Q501
六味地黄丸(浓缩丸)质量标准收载于部颁标准第11册。该方出于宋代?钱乙《小儿药证直诀?卷下》,系中医补肾的经典方,为滋阴补肾之著名方剂。笔者参考《中国药典》对该产品进行研究,在原部颁标准的基础上,对质量标准进行整理提高,用HPLC法测定牡丹皮中丹皮酚及山茱萸中马钱苷的含量,并进行了方法学考察。现将结果报道如下。
1 仪器与材料
仪器Waters液相色谱仪,Waters2487双波长紫外检测器,515泵(美国),7715 i进样器(美国),Empower色谱工作站(美国),C18色谱柱(依利特:250 mm× mm,5 μm)。
试剂甲醇、乙腈为色谱纯(中国上海陆都试剂厂),乙醚、乙醇、磷酸、四氢呋喃等均为分析醇,水为高纯水。
对照品丹皮酚对照品(中国药品生物制品检定所,110708-9704),马钱苷对照品(中国药品生物制品检定所,111640-200401)
样品六味地黄丸(浓缩丸)为苏州长甲药业有限公司生产。
2 方法与结果
牡丹皮的含量测定
色谱条件C18柱(依利特;250 mm× mm,5 μm),流动相:甲醇-水(6:4), ml?min-1,柱温30℃,检测波长为274 nm。
供试品溶液的制备取本品适量,研细, g,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇100 ml,密塞,摇匀,称定重量,超声处理30 min(功率250 W,频率40 kHz),放冷,再次称重,用甲醇补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液作为供试品溶液。
对照品溶液的制备精密称取对照品适量,加甲醇制成每毫升含16 μg的溶液,作为对照品溶液。
空白对照实验按处方去牡丹皮制成空白制剂, g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇100 ml,与供试品制备相同方法制得缺牡丹皮空白溶液。分别取出对照品溶液、样品供试液、空白对照溶液依法进样检验。结果显示空白对照无干扰。
线性关系的考察精密称取丹皮酚对照品适量, μg/ml,摇匀。分别精密吸取丹皮酚对照品溶液1,2,3,4,5 ml,加甲醇稀释至10 ml,摇匀,,,,, μg/ml的丹皮酚溶液。照高效液相色谱法,进样10 μl,测定其峰面积。以峰面积为纵坐标,以进样量(ng)为横坐标,进行回归处理,结果显示:~ ng的范围内线性关系良好。其回归方程为Y=9 -。相关系数r= 6。
精密度实验精密称取供试品(批号0501102) g,,精密吸取供试品溶液10
μl,测定峰面积。RSD=%(n=6),表明精密度良好。
稳定性实验取精密度供试液,分别在0,2,4,6,8,12 h进样,测定峰面积,RSD=%,结果表明丹皮酚溶液在12 h内稳定。