生物学指标的测定
细菌总数的测定
指1ml水(或1g样品),在普通琼脂培养基中经37℃、 24h培养后所生长的细菌菌群总数。
评定水体污染程度指标之一。
生活饮用水卫生标准(GB5749-2006)规定每毫升水的细菌总数不得超过100个。
水中通常存在的细菌大致可分为三类:
①天然水中存在的细菌。普通的是荧光假单孢杆菌、绿脓杆菌,一般认为这类细菌对健康人体是非致病的。
荧光假单胞杆菌
细菌分类
②肠道细菌。它们生存在温血动物的肠道中,故粪便中大量存在。水体中发现这类细菌,可以认为已受到粪便的污染。致病性肠道细菌有沙门氏杆菌(伤寒和副伤寒菌)、B型炭疽菌、痢疾志贺氏菌和霍乱弧菌等。
③土壤细菌。当洪水时期或大雨后地表水中较多。它们在水中生存的时间不长,在水处理过程中容易被去除。腐蚀水管的铁细菌和硫细菌也属此类。
大肠杆菌
铁细菌
平板计数法检验方法:在玻璃平皿内,接种一毫升水样或稀释水样于加热液化的营养琼脂培养基中,冷却凝固后在37°C培养24小时,培养基上的菌落数或乘以水样的稀释倍数即为细菌总数。
精度高,耗时长。为了简化检测程序、缩短检测时间,国内外学者进行了大量的快速检测方法的研究,提出了阻抗检测法、Simplate TM全平器计数法、微菌落技术、纸片法等检测方法。
平板计数法
总大肠菌群的测定
总大肠菌群:需氧及兼性厌氧的在35℃、48h之内生长时能使乳糖发酵、产酸产气的革兰阴性无芽胞杆菌,以每升水样中所含有的大肠菌群的数目表示。总大肠菌群既包括存在于人及动物粪便的大肠菌群,也包括存在于其他环境中的大肠菌群。
包括:大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌
生活饮用水卫生标准(GB5749-2006)规定每100mL水不得检出总大肠菌群。
多管发酵法
配制培养基
在密封瓶中的脱水培养基成品要存放在大气湿度低、温度低于 30℃的暗处,存放时应避免阳光直接照射,并且要避免杂菌侵入和液体蒸发。当培养液颜色变化,或体积变化明显时废弃不用。
初步发酵试验
水样分别接种到盛有乳糖蛋白胨培养液的发酵管中。在 37℃±℃下培养24h±2h。产酸和产气的发酵管表明试验阳性。如在倒管内产气不明显,可轻拍试管,有小气泡升起的为阳性。
多管发酵法
复发酵试验
微振荡初发酵试验阳性结果的发酵管,用 3mm接种环或灭菌棒将培养物转接到 EC 培养液中。在 ℃±℃温度下培养 24h±2h(水浴箱的水面应高于试管中培养基液面) 。接种后所有发酵管必须在 30min 内放进水浴中。培养后立即观察,发酵管产气则证实为粪大肠菌群阳性。
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