浅谈糖化血红蛋白检测.doc

浅谈糖化血红蛋白检测.doc:..浅谈糖化血红蛋白检测戴雨希(南京市秦淮区止马营社区卫生服务中心江苏南京210000)目的:探讨目前常见的各种糖化血红蛋白检测方法及其在临床实践中的应用价值。方法:介绍了离子层析法、电泳法、亲和层析、离子捕获法和免疫凝集法在临床检测糖化血红蛋白中的应用。结果:糖化血红蛋白测定方法众多,但离子交换层析法精密度高,重复性好,且操作简单是目前最适合临床开展的检测方法。关键词:糖化血红蛋白;检测;应用价值正常人有三种血红蛋白:HbA,HbF,HbA2,而成人红细胞中主要含有HbA。在用层析法分离血红蛋白时,可洗脱出3种含糖成分即:HbAla,HbAlb,HbAlc,合称为糖化血红蛋白。糖化血红蛋白是血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物。糖化血红蛋白越高表示血糖与血红蛋白结合越多,糖尿病病情也越重。血糖是通过弥散方式进入细胞内的,无需胰岛素参与。血糖与血红蛋白的结合过程很缓慢,而且是不可逆的,在红细胞死亡之前一直存在,。每一个红细胞内都有血红蛋白,而红细胞的寿命为120d,平均60d,所以糖化血红蛋白比例,能反应测定前1个〜2个月的平均血糖水平。糖化血红蛋白(HbAlc)检测用于常规实验室始于20世纪70年代末期,且稳定发展至今,检查糖化血红蛋白己成为了解糖尿病控制良好与否的重要指标。国外已将糖化血红蛋白监测作为糖尿病疗效判定和调整治疗方案的“金指标”。目前临床实验室中应用的糖化血红蛋白检测方法主要有两类:一类方法基于糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白所带的电荷不同,如离子层析法、电泳等方法;另一类方法基于血红蛋白上糖化基团的结构特点,如亲和层析、离子捕获法和免疫凝集法等。其中高压液相离子层析法(HPLC)被公认为金标法。1离子层析法基于血红蛋白β链N末端缬氨酸糖化后所带电荷不同,在偏酸溶液中,GHb及HbA均匀具有阳离子的特性,因此,当它们经过阳离子交换层析柱吋,就可被偏酸的缓冲液平衡过的树脂来吸附,但GHb与HbA对抗脂吸附率不同,,吸附率较弱的GHb漂洗下来,,吸附率较强的HbA。KCN可将Hb转化为高铁氰化血红蛋白,用分光光度计测定。2手工微柱法有Bio-Rad和西班牙BIOSYSYEMS等多家公司产品,手式微柱操作会受到人工因素影响,可能会洗脱不完全或过度洗脱并受外界环境温度的影响,而某些血红蛋白如HbF异常增加吋,也会与糖化血红蛋白冋吋洗脱,从而使结果产生偏差。相应的仪器以英国DREWSCENTIFIC公司DS5糖化血红蛋白仪为例(BIO-RAD公司DIASTA亦为同一产品),采用微柱法离子交换层析和梯度洗脱技术可全自动分离血红蛋白的变异体与亚刑,除可测定糖化血红蛋白外,还可同吋检测出HbS与HbC的存在与否,在计算糖化血红蛋白值吋会自动扣除变异体产生的影响,从而使结果更为准确,可靠,CV值<2%。同吋该仪器配有专门的稀释溶血器,可直接进行全血操作,5min即可报告结果,并自动储存样品检测结果,层析柱价格也较为低廉,适合于较多标本的医院检测。离子层析法精密度高、重复性好II操作简单,己被临床广