舒肝颗粒对大鼠肝星状细胞的凋亡作用.pdf

泸州医学院
硕士学位论文
舒肝颗粒对大鼠肝星状细胞的凋亡作用
姓名:秦文燕
申请学位级别:硕士
专业:@
指导教师:李昌平
20070101
英汉缩略词对照表�
�
英文缩写英文全称中文全称
ALD Alcoholic liver disease 酒精性肝病
A-V Annexin V法磷脂酰丝氨酸外翻分
析
ECM Extra cellular matrix 细胞外基质
FADD Fas-associated death domain Fas 相关的死亡结构
域
FS Fibrous septal 纤维隔
HF Hepatic fibrosis 肝纤维化
HSC Hepatic stellate cell 肝星状细胞
LC Liver cirrhosis 肝硬化
MPIF Metallo protease inhibitor factor 金属蛋白酶抑制因子
MMP Matrix metal proteinase 基质金属蛋白酶
MTT methyl thiazolyl tetrazolium 噻唑蓝
MLC myofibroblast like cells 肌成纤维样细胞
PI propidine iodide 碘化丙锭
α-SMA Alpha smooth muscle action α-平滑肌肌动蛋白




37
泸州医学院硕士研究生
学位论文独创性声明

本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及
取得的研究成果。学位论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含
其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启
发和所做的贡献均已在学位论文中作了明确的说明并表示了谢意。

学位论文作者签名: 签字日期: 年月日


泸州医学院学位论文版权使用授权书
本人完全了解泸州医学院有关保留、使用学位论文的规定,即:
泸州医学院有权保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和磁盘,
允许论文被查阅和借阅。本人授权泸州医学院可以将学位论文的全部
或部分内容编入有关数据库进行检索,可以公布学位论文的全部或部分内
容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存学位论文,即:泸州医学院
具有学位论文的数字化制品复制权,信息网络传播权和汇编权。保密的学
位论文在解密后适用本授权书。

学位论文作者签名: 导师签名:
签字日期: 年月日签字日期: 年月日�
�
51
题目:舒肝颗粒对大鼠肝星状细胞的凋亡作用�
作者:秦文燕�
学位:硕士�
学校:泸州医学院�
摘要

目的:肝纤维化(HF)是各种原因引起的慢性肝损伤所共有的病理改变,
肝星状细胞(HSC)的活化增殖是 HF 形成的中心环节,细胞外基质(ECM)过
量产生和沉积是形成 HF,最终导致肝硬化、肝功能衰竭的主要原因。因此,
抑制 HSC 活化增殖、促进 HSC 凋亡、抑制胶原合成分泌、促进胶原降解
可抗肝纤维化。目前,抗肝纤维化尚无有效的治疗药物,西医抗肝纤维化
治疗主要有抗氧化剂、细胞因子调节剂、血管活性物质调节剂、抑制信号
通路等药物,这些药物或因毒性太大,或抗肝纤维化的作用不强,使临床
应用受到限制。近年来,中医中药治疗肝纤维化显示出特有的优越性,包
括单方和复方的应用和研究,有的研究已深入到分子水平。剔毒护肝方、
复方 861 均从分子水平研究表明具有抑制体外培养的 HSC 增殖和促进 HSC
凋亡的作用[1,2]。舒肝颗粒主要是针对酒精性肝病(ALD)尤其是酒精性肝纤
维化的防治。通过细胞实验已证明舒肝颗粒能抑制肝星状细胞的增殖,抑
制胶原蛋白的分泌,可减少胶原纤维在肝脏内的沉积。为了进一步探讨舒
肝颗粒对肝纤维化的逆转是否有作用,我们采用舒肝颗粒作用于体外培养
大鼠肝星状细胞,观察其是否对大鼠肝星状细胞凋亡有影响,以探讨舒肝
颗粒对肝纤维化的防治作用的机制,为舒肝颗粒的临床应用进一步提供理
论依据。方法:(HSC-T6)。以 5×104 接种
1
培养好的肝星状细胞在六孔板,培养 24 小时后,加入舒肝颗粒,分为三个
浓度组:, , 。加药作用 24 小时后,取出镜下观
察细胞形态的变化。然后吹打细胞,使其成为单细胞悬液,收集细胞悬液,
1500 转/分离心,冷 PBS 冲洗后再离心,丢弃上清液,每根试管中加入 100µl
冷 PBS,振荡摇匀,成单细胞悬液;调整细胞浓度 1×106,缓冲