酶免技术.ppt

第十四章酶免疫技术
第一节酶免疫技术原理及分类
一、技术原理
二、分类
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第二节酶免疫技术要点
一、酶和酶作用底物
二、酶标记抗体或抗原
三、固相载体
第三节酶联免疫吸附试验
一、基本原理
二、方法类型及反应原理
第四节酶免技术应用
小结
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第一节酶免疫技术原理与分类
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标记免疫技术=
抗原抗体反应
示踪物标记
灵敏性
特异性
标记免疫技术的主要特点:
高特异性、高灵敏性
免疫技术+标记技术
一、标记免疫技术
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标记免疫技术
标记免疫技术指用示踪物标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应;
并借助于荧光显微镜,射线测量仪,酶标检测仪,电子显微镜和发光免疫测定仪等精密仪器,对实验结果直接镜检观察或进行自动化测定;
可以在细胞、亚细胞、超微结构及分子水平上,对抗原抗体反应进行定性和定位研究;
也可对体液中的半抗原、抗原或抗体进行定性和定量测定。
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标记免疫技术
免疫测定技术
免疫组化技术
示踪物及
标记技术
酶免疫技术
荧光免疫技术
放射免疫技术
化学发光技术
金免疫技术
生物素-亲和素免疫放大技术
……
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放射免疫技术
发光免疫技术
酶免疫技术
三大经典标记技术
三大经典标记免疫技术
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核心试剂:
酶标记的抗体或抗原
酶标物特点:
免疫学活性
酶对底物的催化活性
抗原抗体反应的特异性
+
酶高效催化反应的专一性、放大性
二、酶免技术原理及特点
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免疫技术: Ag +Ab → AgAb
酶标记的免疫技术: Ag*+Ab → Ag*Ab
标记物的作用有二:
一是便于观察反应结果,
二是提高测定的敏感性
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特点:
灵敏度高、特异性强、准确性好
酶标记试剂能够较长时间保持稳定
操作简便。
原理:
酶标抗体(抗原)与抗原(抗体)的特异性反应
酶对底物的显色反应
对抗原或抗体进行定位、定性或定量的测定分析
酶免技术原理及特点
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