沉淀反应.ppt

实验二沉淀反应
一、环状沉淀反应
二、双向琼脂扩散试验
原理:将可溶性抗原层积于抗体之上,如
果二者相应,则可在抗原、抗体两
液接触界面形成白色的沉淀环。
目的:以炭疽环状沉淀反应为例,掌握
沉淀反应原理、操作方法及结果
的判定方法。
一、环状沉淀反应
(沉淀原)的制备:
(1)热浸法取可疑材料约1克,研碎,加入5-10mL生理盐水混合,转至试管内,煮沸30min,取出冷却,用滤纸过滤,滤液即为被检的沉淀原。
(2)冷浸法取疑为炭疽的皮革和兽毛,高压灭菌后,取 1 或兽毛数克浸于5-%石炭酸生理盐水中,4℃浸渍18-24小时,同上法过滤。
一、环状沉淀反应
实验材料:

3、阳性炭疽沉淀素血清
%石碳酸生理盐水

沉淀反应管(Φ - )
一、环状沉淀反应
用毛细吸管吸取炭疽沉淀素,插入沉淀反应管底部,缓慢注入到距管底的1/3处。
用另一支毛细吸管吸取被检材料,插入离沉淀管底近1/3处,沿管壁缓慢加入到沉淀素的上面,边注边提使达到2/3高度处即可。
静置5-10min
结果观察
设阳性、阴性对照
一、环状沉淀反应
实验步骤
试验组
阳性对照组
阴性对照组
一、环状沉淀反应
结果判定:
(1)两液面交界处出现清晰、致密
如线的白轮,是炭疽阳性。
(2)无此现象为炭疽阴性。
一、环状沉淀反应
二、双向琼脂扩散试验
目的:掌握双向琼脂扩散试验的
原理、操作方法及结果判
定方法。
原理:
可溶性Ag与Ab在含有电解质的半固体(1%)琼脂内进行自由扩散,当两者由高浓度向低浓度扩散相遇时,如果二者相对应而且比例适当,则可在相遇处形成白色的沉淀线,为阳性反应。另外,沉淀带对于组成它的Ag、Ab具有特异地不可透过性,而对其它的Ag与Ab是可透过的,所以一条沉淀带仅代表一种AgAb系统的沉淀物。
二、双向琼脂扩散试验