实验,绿叶中色素提取和分离.ppt

实验
绿叶中色素的提取和分离
【实验原理】
:绿叶中的色素溶于有机溶剂无水乙醇而不溶于水,可用无水乙醇提取色素。
:各种色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快,反之则慢,从而使各种色素相互分离。
【实验步骤】
提取色素:称取5 g绿叶,剪碎,放入研钵中,加入
少量二氧化硅、碳酸钙和10mL无水乙醇
→研磨→过滤→收集到试管内并塞严试
管口
制备滤纸条:将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长
与直径的滤纸条,将滤纸条一端剪去
两角,在距离剪角一端1 cm处用铅笔
画一条细的横线
画滤液细线:用毛细吸管吸取少量的滤液,沿铅笔
线均匀地画一条细线,待滤液干后,
再画一两次
分离色素:将适量的层析液倒入试管中,装置如图
所示
滤液细线
层析液
观察结果:滤纸条上呈现四条颜色、宽度不同
的色素带,如图所示
橙黄色
叶黄素
叶绿素a
最多
黄绿色
?
提示:新鲜绿色的叶片中色素含量高,从而使滤液
中色素含量较高,实验效果明显。
?为什么研磨时要加入少量的CaCO3和SiO2?
提示:(1)叶绿素不稳定,易被破坏,因此研磨要迅
速、充分,以保证提取较多的色素。
(2)二氧化硅破坏细胞结构,使研磨充分。
(3)碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏。
?
提示:(1)叶片颜色太浅。(2)绿叶不新鲜。(3)研磨不充分。(4)未加碳酸钙或加入量太少。(5)加入无水乙醇量太多。
(6)研磨时间过长,部分叶绿素被破坏。
,需将一端的两个角剪掉?
提示:由于液面的不同位置表面张力不同,纸条接近液面时,其边缘表面的张力较大,层析液沿滤纸边缘扩散过快,从而导致色素带分离不整齐的现象。故需将插入层析液的滤纸条一端剪去两个角。
,且线要细、直?
提示:重复画线是为了增加色素的浓度,使分离出的色素带清晰分明。画线细、直是为了防止色素带之间出现重叠。
,为什么不能让滤液细线触及层析液?
提示:滤纸条上的滤液细线触及(或没入)层析液,会使滤液中的色素溶解于层析液中,滤纸条上得不到色素带,使实验失败。
?
提示:不同种类的色素在绿叶中的含量不同,含量多的在滤纸条上呈现的色素带宽,反之色素带窄。
实验中的注意事项及操作目的归纳