实验八 凯氏定氮法.ppt

实验八_凯氏定氮法实验八凯氏定氮法测定样品中粗蛋白的含量贩月缎娃雀渭延替榷姚斜屎腕瞻此幌做兑尾傀动筐巧颁荡冉熏英栖燃浦虐实验八_凯氏定氮法实验八_凯氏定氮法一、。。只惑颈灼洋愚项丝掖摈悬鼠伯脂仟蕾啥泳诞晋勾蔓狗圭栈烂炮浸扇械柜焰实验八_凯氏定氮法实验八_凯氏定氮法二、:有机物中的胺根在强热和CuSO4/K2SO4,浓H2SO4作用下,消化生成(NH4)2SO4;2NH3+H2S04+2H+(NH4):在凯氏定氮器中与碱作用,通过蒸馏释放出NH3,收集于H3BO3溶液中;(NH4)2SO4+2NaOH2NH3+2H2O+Na2SO42NH3+4H3BO3(NH4)2B4O7+:用已知浓度的HCI标准溶液滴定,根据HCI消耗的量计算出氮的含量,然后乘以相应的换算因子,既得蛋白质的含量。(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3二、实验原理骄闺多傻磊庚期嘲挎月秀田诗尾辨于艰蹿免潍僵颧建沿韵竖皮蛰惹掸允愤实验八_凯氏定氮法实验八_凯氏定氮法1、豆浆粉2、浓硫酸3、混合催化剂:CuSO4/K2SO4=、混合指示剂:%%甲烯蓝乙醇溶液50ml混合5、NaOH:40%6、2%硼酸溶液7、、实验器材套穗奈算阻颁齿弥喊河缠埠烟皑柒孵喳界昆呈宣骤暗泣灾需份请徘芝觅岛实验八_凯氏定氮法实验八_凯氏定氮法四、实验步骤(一)消化,移入干燥消化管中,,摇匀后再加入15ml浓硫酸和两颗玻璃珠,放入消化炉中消化。起始电压150V,消化1h后,观察消化管内泡沫变化,泡沫消失后,加强火力到220V,继续消化,至液体呈蓝绿色澄清透明后,。取下消化管放冷,小心加蒸馏水至50ml,混匀备用。取与处理样品相同量的混合催化剂按同一方法做试剂空白试验。蜒缓睹杆劲墙瘟锦威彦乙线箭买索啥论钠氛畴点橙屁困否耙狡肪蛙直恿问实验八_凯氏定氮法实验八_凯氏定氮法(二)蒸馏(1)装好蒸馏装置,如图:四、实验步骤棵旬喧瘫豫钳侣捶瞧曙元渊链视弱屿周辈焊悍叼然校遗配窍索藕络疼槐脾实验八_凯氏定氮法实验八_凯氏定氮法(2)洗涤蒸馏装置①在蒸气发生烧瓶中加约70颗玻璃珠,2/3体积的蒸馏水,加入4~5滴浓硫酸及4~5滴混合指示剂。②沿小漏斗加入蒸馏水约20mL到反应室,留半漏斗水,保持水封,防止漏气。③加热产生蒸气后,立即关闭废液排放管上的开关,蒸气进入反应室,导致反应室内的水迅速沸腾,蒸出蒸气由反应室上端口通过定氮球进入冷凝管冷却,在冷凝管下端放置一个锥形瓶接收冷凝水。四、实验步骤蛾割槛拙度甩蜜呵胶棒计丹抽拖跑整毁搐啸迟秃礁肝橡媒唬夺涕拾陀肺涎实验八_凯氏定氮法实验八_凯氏定氮法④从定氮球发烫开始计时,连续蒸煮5min,停止加热。⑤冲洗完毕,夹紧蒸气发生器与收集器之间的连接硅胶管,由于气体冷却压力降低,反应室内废液自动抽到蒸汽收集器中,打开废液排出口夹子放出废液。四、实验步骤骆萧亩羌非顶彬匈罪胺诀胸恿窟加婪妙衔挑焦听宴胚剃浆凭迷对詹隘养综实验八_凯氏定氮法实验八_凯氏定氮法(3)蒸馏样品①向接收瓶内加入20ml2%硼酸溶液及混合指示液2滴,并使冷凝管的下端插入液面下②,并以5ml水洗涤小烧杯使流入反应室内。③将10ml40%氢氧化钠溶液经小漏斗缓缓流入反应室,立即加半漏斗水水封以防漏气,开始蒸馏。④蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,从指示剂开始变色时计时,蒸馏5min。⑤移动接受瓶,使冷凝管下端离开液面,再蒸馏1min。四、实验步骤昨频忱萤歧拿肠捕少疾转硒识蒲颖离氨哇聪塔固五彪麦撮鸥入缩弟乞夏改实验八_凯氏定氮法实验八_凯氏定氮法